高效液相色谱法对小柴胡颗粒剂黄芩苷含量的测定

罗晓霞

高效液相色谱法对小柴胡颗粒剂黄芩苷含量的测定

罗晓霞

目的分析高效液相色谱法（HPLC）对小柴胡颗粒剂中黄芩苷含量的测定。方法采用HPLC法对小柴胡颗粒剂中的黄芩苷含量进行测定。结果经过测定，小柴胡颗粒剂中黄芩苷的回收率为100%，RSD为0.96%。结论采用HPLC法可对小柴胡颗粒剂中黄芩苷含量进行准确测定。

高效液相色谱法；小柴胡颗粒剂；黄芩苷含量

黄芩是小柴胡颗粒剂的主要成分，其中黄芩的主要有效成分为黄芩苷，其主要功效为清热解毒、抗菌消炎以及降低转氨酶等。在临床中小柴胡颗粒剂被普遍应用于咽炎、肺炎、上呼吸道感染以及急性扁桃腺等疾病的治疗。为了提高药物的临床效果，需对药物中各种成分含量进行了解[1]。其中 HPLC法在小柴胡颗粒剂黄芩苷测定中具有操作方便、专属性强，且定量准确的优点[2]，因此本文采取HPLC法对小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量进行测定，对其测定结果进行分析，现报告如下。

1 仪器与药品

1.1 仪器 日本津岛生产的高效液相色谱仪 LC-14A。

1.2 药品 试药为中国药品生物制品鉴定所的黄芩苷，用以进行含量测定，其批号为110715-200212；甲醇为上海陆都化学试剂厂生产，其色谱纯，其余全部都是分析纯；所选用的小柴胡颗粒剂生产批号分别为001122、20030320、20030322、9907088。

2 测定方法

2.1 色谱条件 填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇-水-磷酸，其比例为45.0:55.0:0.2，检测波长为315nm。

2.2 对照品溶液制备 选取已经过4h 60℃减压干燥的黄芩苷对照品，精密称取 30ml，并将其放在100ml量瓶中，然后加入70%的甲醇进行稀释至刻度。

2.3 线性关系测定 将制备好的对照品溶液精密取出2ml、4ml、6ml以及8ml，分别放置于10ml的量瓶中，加入甲醇进行稀释至刻度，将以上溶液精密吸取10µg，直接注入高效液相色谱仪中，对其峰面积进行记录，其回归方程为 A=353599C＋56250，r=0.9994。结果显示，在溶液浓度为0.0238～0.1190mg·ml-1时，其浓度和峰面积具有良好的线性关系。

2.4 供试品溶液制备 取小柴胡颗粒剂1g，碾细，精密称定1g置于量瓶中，精密加入浓度为70%的乙醇30ml，进行20min的超声处理，放冷过滤后，将滤液放置在量瓶中，采用少量70%的乙醇对其容器和残渣进行分次清洗，并把清洗容器和残渣的溶液与滤液置于同一量瓶中，加入浓度为70%的乙醇，至刻度。

3 结果

3.1 精密含量测定 将不同批号的小柴胡颗粒样品，按2.4项进行处理制成供试品溶液，并将其注入液相色谱仪中，对其峰面积进行测定，依照外标法进行计算，经过测定，其结果如表1。

表1 供试品测定结果

3.2 重现性试验结果 按照以上方法，对批号为20030320的样品进行测定，将其测定药品分为5份，每份含量为5.17mg·g-1，其RSD为1.85%。测定结果显示，其重现性良好。

3.3 回收率试验 对其已经进行含量测定的供试品进行精密称取，适量即可，并加入一定量的黄芩苷对照品进行含量测定，计算回收率，其测定结果如表2。

表2 回收率试验结果(n=5)

4 讨论

小柴胡汤是汉代名医张仲景首创，药物组成为生姜、甘草、人参、柴胡、半夏、大枣、黄芩，功效主要为调理胃肠、舒畅气机、和解表里等，在临床外感疾病以及犯少阳证患者治疗中均有广泛应用[3]。小柴胡颗粒也就是“小柴胡汤”转化而成，主要是为了满足现代携带和使用方便的需求进行生产。其中对黄芩苷含量的测定，主要是对该药品质量进行有效保证[4]。经过以上测定，可以得出采用HPLC法对小柴胡颗粒剂中黄芩苷含量进行测定，行之有效，其测定结果显示小柴胡颗粒剂黄芩苷的回收率为100%，RSD为0.96%。曾有报道显示，采用流动相甲醇-水（45:55）法，对小柴胡颗粒剂中黄芩苷含量进行测定，并且未将磷酸加入其中，结果显示色谱峰的分离效果非常容易出现拖尾现象，不够理想。但是在采用HPLC法对此进行测定时，不但操作方便、快速，并且其重现性好，可以对临床中小柴胡颗粒剂用药的质量进行控制，且为临床提供有效的参考资料[5-7]。

对小柴胡颗粒剂中黄芩苷含量进行测定时，通过对吸收光谱的分析发现，在 315mm波长处黄芩苷具有最大吸收量，灵敏度高，可有效确保实验精度，因此在测定时，可采用315mm作为测定波长。另外其流动相甲醇-水-磷酸间的配合比例为45.0:55.0:0.2，理论搭板数应比3000大，各峰分离度均比1.5大，实验时间相比较短，辅料不会对含量的测定结果产生一定影响。就目前测定结果来看，市场上所销售的小柴胡颗粒剂中的黄芩苷含量具有较大差异。因此在临床用药中，要注意对不同批号小柴胡颗粒剂中黄芩苷含量进行分析，以此选择合适的临床用量。

[1] 李春红,梅志强,何兵,等.HPLC同时测定小柴胡颗粒中四种成分的含量[J].泸州医学院学报,2012,35(4):399-401.

[2] 何云.高效液相色谱法测定鼻炎灵胶囊中黄芩苷和麻黄碱的含量[J].中国医药导刊,2012,14(12):2203-2204.

[3] 郭庆冲,周宗辉,朱美玲.HPLC法测定小柴胡软胶囊中黄芩苷的含量[J].中医药临床杂志,2009,21(2):159-160.

[4] 刘逢芹,刘田云,余晓东,等.RP-HPLC考察黄芩、柴胡配伍对黄芩苷成分的影响[J].中国实验方剂学杂志,2009,15(7):3-5.

[5] 肖林林,温建东,吴坚.RP-HPLC法测定小柴胡汤丸中黄芩苷的含量[J].中国现代药物应用,2011,5(22):66-67.

[6] 张祥伟,罗奇志,伍彪,等.小柴胡汤超微饮片与常规饮片化学成分溶出特性的对比研究[J].时珍国医国药,2009,20(11):2750-2752.

[7] 申安,秦松.HPLC法测定三黄感冒合剂中黄芩苷的含量[J].中国医药导刊,2010,12(9):1623-1624.

Determination of the Content of Baicalin Xiaochaihu Granules by HPLC

Luo Xiaoxia

ObjectiveAnalysis on the determination of the content of Baicalin in Xiaochaihu granules by HPLC.MethodsHPLC method was used to determine the content of Baicalin in Xiaochaihu granules.ResultsAfter the determination of baicalin,recovery of Xiaochaihu granules was rate was 100%,RSD was 0.96%.ConclusionFor determination of Baicalin in Xiaochaihu granules was changed by HPLC method.

High performance liquid chromatography;Xiaochaihu granules;Baicalin

R927.2

A

1673-5846(2014)02-0020-02

广东省中医院，广东广州 510120

罗晓霞（1978.11-），女，广东省广州人，本科学历，广东省中医院药师，主管药师。研究方向：药学。