兔机械性肠梗阻模型的建立

尹雪峰 杭州市红十字会医院普外二科 杭州 310003

兔机械性肠梗阻模型的建立

尹雪峰 杭州市红十字会医院普外二科 杭州 310003

目的建立可用于研究机械性肠梗阻的家兔动物模型。方法选取54只家兔，随机分为正常对照组、低位小肠梗阻组（实验1组）、结肠梗阻组（实验组），每组18只，以头皮针及丝线结扎回肠末端及乙状结肠方法建立完全性单纯机械性肠梗阻模型，术后24、48、72h，测量腹围、梗阻肠管周径、肠道内压及腹腔内压。结果实验组与对照组比较，术后24、48h腹围无明显增大（P＞0.05），术后72h腹围增大（P＜0.05）；实验组梗阻肠道周径、肠道内压、腹腔内压术后24h无明显增加（P＞0.05），术后48h增加明显（P＜0.05），术后72h增加显著（P＜0.05）。结论该动物模型符合机械性肠梗阻的临床表现及肠道变化，可以用于研究机械性肠梗阻。

家兔；动物模型；机械性肠梗阻

肠梗阻是外科常见的急腹症之一，发病率仅次于急性阑尾炎。近年来虽然其总发病率（根据部分医院统计）略有降低，但其病死率仍为10%左右，尤其绞窄性肠梗阻的病死率依然高达4.5%～30%[1]。国内外对于机械性肠梗阻的研究缺乏有效的实验动物模型。笔者通过结扎法建立兔梗阻模型实验如下。

1 材料与方法

1.1实验动物和分组 健康、清洁级大白兔54只，4月龄，雌雄不限，体质量2.0～2.5kg，哈尔滨医科大学第一医院实验动物中心提供（实验动物合格证号：SCXK（黑）20020002）。实验前24h禁食，自由饮水。54只健康大白兔不分雌雄，无体质量限制，随机分为正常对照组、低位小肠梗阻组（实验1组）、结肠梗阻组（实验2组），每组18只。

1.2结扎带制作 取头皮针的塑胶管，长度约2cm，将7号丝线穿过塑胶管，制作完毕后，结扎带备用。

1.3肠梗阻模型建立方法 家兔称重，固定，3%异戊巴比妥钠（30mg/kg）耳缘静脉麻醉，麻醉满意后，固定于手术台，备皮，碘伏消毒后铺无菌巾，取腹正中切口入腹。实验1组无菌条件下将回盲部牵出体外，距回盲瓣10cm处将结扎带自肠系膜穿过，将肠道结扎固定；实验2组将直乙交界处牵出，将结扎带自肠系膜穿过，进行肠道结扎。实验组的结扎力量以完全阻断肠管为准，即完全性肠梗阻，正常对照组仅做肠道探查。

1.4观察指标 ①测量腹围。②肠道内压测定：封闭梗阻肠段以上10cm后采用测定中心静脉压的方法，即悬挂输液器，连接盐水后，将头皮针刺入肠道内，观察液面，下降停止后，液柱的高度即为肠道内压力[2]。③肠道周径测量：选择梗阻处以上3cm的肠管，将一段丝线从肠系膜穿过后，围绕肠腔一周，首尾相接，此丝线的长度即为肠道的周径。④腹腔内压测定：采用导尿管测定膀胱内压间接获得腹腔内压。将去除针头的头皮针经尿道插入兔子膀胱中，先注入盐水约50mL，然后连接输液器并打开调节阀，观察液面，下降停止后测量液柱高度，即为膀胱内压，腹腔内压与膀胱内压之间的关系为膀胱内压：腹腔内压=0.77cm H2O[3]。

1.5统计学方法 实验数据以（） 表示，应用SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

三组手术均顺利完成，术后72h兔存活52只，实验1组与实验2组各死亡1只，死亡率为3.7%。术后24h探查：正常对照组未见肠管扩张，肠道颜色正常，血运丰富，蠕动活跃；实验1组梗阻肠管略有扩张，血运良好，蠕动稍增强，近端可见食物残渣；实验2组梗阻肠管略有扩张，蠕动增强，近端可见食物残渣，血运较好。术后48h探查：对照组结果同24h；实验1组肠管扩张明显，颜色略粉红，血运良好，蠕动增强，近端可见较多食物残渣腹腔略有渗出；实验2组肠管扩张较为明显，肠道颜色略淡红，蠕动增强，近端可见较多食物残渣，腹腔有轻微渗出。术后72h探查：对照组，腹腔略有渗出，无明显粘连；实验1组小肠梗阻近端肠道扩张显著，颜色淡红，蠕动减弱，血运尚可，腹腔有较轻粘连；实验2组结肠梗阻近端扩张显著，动脉搏动减弱，蠕动明显减弱，腹腔渗出较多，粘连比实验1组严重，未形成粘连性肠梗阻。

术后24h，实验组与正常对照组比较，腹围、腹腔内压、肠道周径、肠道压力均无显著增加（P＞0.05），见表1；术后48h，实验组与正常对照组比较，腹围无显著增加（P＞0.05），腹腔内压、肠道周径、肠道压力显著增加（P＜0.05），见表2；术后72h时，实验组与正常对照组比较，腹围、腹腔内压、肠道周径、肠道压力均显著增加（P＜0.05），见表3。

3 讨 论

肠梗阻，即肠道内容物不能正常运行、顺利通过肠管，是外科常见的急腹症之一。机械性肠梗阻是肠梗阻中最为普遍的梗阻方式，发病原因有如肠管堵塞（寄生虫、大胆石、粪块、异物等）、肠管受压（粘连带压迫、肠管扭转、肿瘤压迫）、肠壁病变（先天性肠闭锁、炎症狭窄、肠道肿瘤）等[4]，文献报道单纯机械性小肠梗阻病死率为1%～6%[5]。目前用于肠梗阻研究的动物模型制作方法多样，大致分为腹腔粘连模型、不完全梗阻模型、单纯性完全梗阻和绞窄性梗阻模型。腹腔粘连模型的制作是对肠管的浆膜面和/或壁层腹膜造成机械性损伤，由于损伤修复过程中纤维组织的增生而导致肠管和肠管、肠管和腹腔内其他脏器以及肠管和壁层腹膜之间的粘连。不完全性肠梗阻模型制作可采用肠管半周缝扎法[6]和肠套叠法[7]。单纯性完全性肠梗阻模型多采用丝线单纯结扎肠管的方法。国内外建立的动物模型大多数为回肠梗阻模型，对于结肠梗阻模型的建立甚为少见。

表1 术后24h各组肠梗阻观察指标比较（）

表1 术后24h各组肠梗阻观察指标比较（）

组别正常对照组实验1组实验2组P值n6 6 6腹围/cm 28.723±0.370 29.257±0.303 29.368±0.244 P＞0.05腹腔内压/cmH2O 11.360±0.037 13.374±0.019 15.593±0.126 P＞0.05小肠周径/cm 2.459±0.049 2.677±0.067 2.587±0.055 P＞0.05结肠周径/cm 3.243±0.086 3.808±0.038 4.108±0.092 P＞0.05小肠压力/cmH2O 10.190±0.014 11.198±0.015 11.325±0.029 P＞0.05结肠压力/cmH2O 11.175±0.044 12.910±0.035 13.305±0.019 P＞0.05

表2 术后48h各组肠梗阻观察指标比较（）

表2 术后48h各组肠梗阻观察指标比较（）

组别正常对照组实验1组实验2组P值n6 6 6腹围/cm 28.320±0.121 30.348±0.241 30.528±0.178 P＞0.05腹腔内压/cmH2O 11.407±0.012 16.383±0.250 17.070±0.505 P＜0.05结肠压力/cmH2O 11.163±0.038 12.953±0.027 15.537±0.017 P＜0.05小肠周径/cm 2.471±0.033 3.032±0.047 2.913±0.018 P＜0.05结肠周径/cm 3.391±0.064 4.371±0.033 4.937±0.055 P＜0.05小肠压力/cmH2O 10.210±0.013 13.277±0.046 11.539±0.017 P＜0.05

表3 术后72h各组肠梗阻观察指标比较（）

表3 术后72h各组肠梗阻观察指标比较（）

组别正常对照组实验1组实验2组P值n6 6 6腹围/cm 29.177±0.139 34.598±0.179 36.707±0.402 P＜0.05腹腔内压/cmH2O 10.998±0.015 19.240±0.250 20.087±0.393 P＜0.05小肠周径/cm 2.516±0.031 4.330±0.051 2.854±0.030 P＜0.05结肠周径/cm 3.510±0.099 4.253±0.076 5.852±0.113 P＜0.05小肠压力/cmH2O 10.201±0.014 15.320±0.037 11.315±0.028 P＜0.05结肠压力/cmH2O 11.201±0.042 12.836±0.058 17.480±0.019 P＜0.05

我们应用自制的结扎带，建立单纯性机械性肠梗阻的家兔模型。建模所需的结扎带材料易得，且效果确切，长度为2cm左右，小于正常肠管的周径，以此来造成肠腔的完全闭塞。此外，由于结扎带塑胶条的弹性作用，即使在完全性肠梗阻模型中，也不会因为结扎过紧而导致结扎处肠壁缺血坏死，也不会因为丝线的切割作用而引起肠壁的受损，甚至导致穿孔。对建模过程中死亡的兔子进行解剖发现：实验1组的兔子死于腹腔感染，在其腹腔内发现多处散在小脓腔，在脓腔中发现兔毛，可能是备皮过程中残留的兔毛，经切口落入腹腔内未取出，造成感染；实验2组的兔子死于肠瘘造成的腹腔感染，在其结扎肠管以上5cm处，发现肠道破损处，可能是在手术过程中找寻目标肠道时，手术操作不规范，也可能在提出肠道进行结扎过程中，未察觉对肠道造成的小损伤。因此，在建模过程中，完成备皮后，应将散落的兔毛清理干净，手术过程中应严格遵循无菌原则及规范的手术操作，游离肠道时动作应轻柔，结扎肠道完成后可以对肠道进行探查，避免未察觉的小损伤致使建模失败，也可以进行适当的腹腔冲洗，既能有效防止肠道粘连，亦能降低感染。手术完成后，如有条件可以对兔子预防性应用抗生素。

实验结果显示，实验组梗阻24h时因肠道有一定的顺应性，故肠管的扩张不明显，腹围无明显增大，肠道的周径及肠道内压无明显增加，腹腔内压亦无明显增加；梗阻48h时，尽管腹围增加不显著，但肠道的周径、肠道内压较正常对照组增加显著，腹腔内压亦明显增加（P＜0.05）；梗阻72h时，实验组腹围增加显著，肠道扩张明显，肠道内压增加显著，腹腔内压亦有明显增加（P＜0.05）。随着梗阻的进展，梗阻后食物在肠管中的潴留增多，大量的消化液未被肠道吸收，使得肠管扩张，致使肠腔压力增高，肠道内压力的增高，引起腹腔压力的增加，临床表现为腹胀、呕吐。

综上所述，我们建立的动物模型能模拟机械性肠梗阻后肠道自然的病理生理变化，可以用于机械性肠梗阻的研究。

［1］陈卫国，刘玉村.肠梗阻的手术适应证［J］.中国实用外科杂志，2003，23（7）：398.

［2］赵卫川，崔乃强，白景文，等.肠内压对肠道内毒素转运影响的实验研究［J］.中国中西医结合外科杂志，1997，3（5）：329-332.

［3］陈玮.腹内压力及其监测［J］.国外医学护理学分册，1999，18（6）：266.

［4］吴在德，吴肇汉，郑树，等.外科学［M］.第6版.北京：人民卫生出版社，1984，475.

［5］张志明，张才全.不同类型肠梗阻内毒素移位时段变化的实验研究［J］.中国普通外科，2007，16（4）：389-390.

［6］闰瑾.大承气颗粒对大鼠不完全性肠梗阻小肠上皮细胞保护作用的研究［D］.天津：天津医科大学，2005.

［7］Kawaguehi AL，Dunn JC，et al.Glucose up take in dilated small intestine［J］.J Pediatr Surg，1998，33（11）：1670-1673.

Establishment of Rabbit Model of Mechanical Intestinal Obstruction

YIN Xuefeng. Department of Surgery，Hang zhou Red Cross Hospital，Hangzhou（310003），China

ObjectiveTo establish a rabbit model of mechanical intestinal obstruction（MIO）.MethodsFiftyfour rabbits were randomly divided into control group（n=18），small bowel obstruction group（n=18），and large bowel obstruction group（n=18）.Ligation of the ileum（terminal part）and sigmoid was achieved by using scalp needle and 7-0 thread to establish simple MIO model，respectively.At 24h，48h，72h after modeling,abdominal circumference, perimeter of obstructed intestine，intestinal pressure and intra-abdominal pressure were measured.ResultsCompared with control group,the abdominal circumference in small bowel obstruction group and large bowel obstruction group was not significantly different（P＞0.05）at 24 and 48 h after modeling，but increased at 72h（P＜0.05）；the perimeter of obstructed intestine，intestinal pressure and intra-abdominal pressure in small bowel obstruction group and large bowel obstruction group did not increase at 24h after modeling，but increased at 48 and 72h（P＜0.05）.ConclusionThe animal model is in accordance with clinical manifestations and intestinal changes of MIO.It can be used for MIO studies.

rabbit；animal model；mechanical intestinal obstruction

2013-05-31

修回日期：2014-02-10

黎介寿院士肠道屏障专项研究基金（No.LJS-2009023）

尹雪峰，E-mail：smallyxf@126.com