吉非替尼联合用药对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株的实验研究

李娟+李宝平+张雷+梁娟

[摘要] 目的 研究吉非替尼联合用药对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株的影响。方法 用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测和培养肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株，待24 h、48 h、72 h后采用不同浓度的吉非替尼、奥曲肽、顺铂、5-FU进行单用和联用处理，流式细胞术检测细胞凋亡率，分析药物的增效效果。 结果 联合用药对肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株可起到协同抑制作用，与单独用药组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。联合用药组的肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株培育48 h后的IC50=（5.3±0.5）、（5.4±0.8） mg/L，单药组IC50=（20.1±1.2）、（20.3±1.4） mg/L，差异有统计学意义（P<0.05）。对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549和耐药A549/GR细胞株后凋亡率差异明显，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 吉非替尼联合用药对细胞的增生具有协同抑制作用，对其他肺癌的治疗也具有一定的效果。

[关键词] 吉非替尼；奥曲肽；肺癌敏感A549；肺癌耐药A549/GR；顺铂；5-FU

[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2014）14-0024-04

在临床治疗中肺癌是一种比较常见的呼吸道恶性肿瘤，并且一些小细胞肺癌不能进行手术治疗，因此化疗成为临床治疗的主要手段[1]。因为采用传统化疗药物并不能获得满意的治疗效果，并且治疗后会发生较多的不良反应，所以临床对于新药物和有效治疗方法极其渴求。根据相关研究结果证明，生长抑素及其类似物对许多肿瘤增生起到抑制作用，并且可以提高化疗药物的作用[2]。本次研究通过对肺癌耐药A549/GR和敏感A549细胞株进行研究和分析，探讨单独用药和联合用药对肺癌细胞株的影响，现总结如下。

1资料与方法

1.1 研究时间

本研究开展时间为2013年1～12月。

1.2细胞与试剂

人肺癌细胞株A549由武汉博士德生物有限公司提供，吉非替尼为阿斯利康有限公司生产，规格150 g/片，国药准字H20090759，奥曲肽为辽宁诺维诺制药股份有限公司，规格0.1 mg，国药准字H20080393。顺铂为锦州九泰药业有限责任公司生产，规格10 g，国药准字H21020213。氟尿嘧啶（5-FU）为安徽国森药业有限公司生产，规格50 mg，国药准字H34023446。四甲基偶氮唑蓝（MTT）购于美国Sigma公司，小牛血清购于上海江莱生物科技有限公司。二甲基亚砜（DMSO）购于无锡先创化学品有限公司，PBS粉剂购于行知生物科技有限公司，胰酶粉剂购于上海信然生物科技有限公司，EDTA购于北京中诺泰安科技有限公司。

1.3 仪器设备

二氧化碳孵箱（上海巴玖实业有限公司，型号2406-2）、超净台（上海雷韵试验仪器制造有限公司，型号：VD-650）、倒置显微镜（郑州南北仪器设备有限公司，型号DSZ5000X）、酶标仪（北京亚兴泰机电设备有限公司，型号：CA-2000）、96孔板（北京华兴科诺生物技术有限公司，规格型号：3897）、全自动化学发光仪（北京科美东雅生物技术有限公司，型号：CHEMCLIN 600），流式细胞分析仪（湖南弘林科学仪器有限公司，型号：FC，500）。

1.4 MTT法检测A459细胞增殖情况

在温度为37℃、CO2浓度为5%的环境下，取对数生长期的A549细胞接种于96孔细胞培养板中，孔内面积为5×103，培养24 h后吸取培养液[3]。试验设对照组为等量培养液；单药组包括：奥曲肽组：溶液浓度分为 1.3、2.6、5.2、10.4、20.8、41.6、83.3、166.7 mg/L；吉非替尼组：溶液浓度为：2.5、5、10、20、40 μmol/L；顺铂浓度0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128 mg/L；5-Fu浓度为 0.8、3.2、12.5、50、200、800、3200 mg/L；联合用药组包括：吉非替尼+奥曲肽组：按顺序剂量比值为1∶1、1∶2；顺铂+5-Fu组：按剂量的比值分别为 1∶2、1∶1、2∶1；奥曲肽+顺铂+5-Fu组：奥曲肽浓度为20 mg/L，40 mg/L，顺铂联合5-Fu剂量的比值为2∶1；吉非替尼+奥曲肽+顺铂+5-FU组：奥曲肽浓度为20 mg/L，40 mg/L。剩下的三种药按顺序剂量比值为1∶1∶1、1∶2∶1、1∶1∶2、2∶1∶1；吉非替尼+顺铂+5-FU组按顺序剂量比值为1∶1∶1、1∶2∶1、1∶1∶2、2∶1∶1。每组中同一药物浓度设4个复孔，实验重复3次，分别孵育24、48、72 h。

1.5 流式细胞术检测肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株凋亡

采用流式细胞仪从各个组别中挑选出浓度明显的只做48 h，并计算出各组的IC50值。待以上各组的胰酶-EDTA消化后，收集悬浮和贴壁细胞，在温度为4℃的环境下，用浓度为70%的乙醇进行固定，时间控制在2 h[4]。加入加RNase（终质量浓度50 mg/L），37℃水浴1 h。加入碘化丙啶染色30 min[5]。流式细胞术检测细胞凋亡情况。以上实验重复3次。

1.6 观察指标

观察单组药以及联合用药组在24、48、72 h三个时刻的肺癌细胞生长情况，并计算细胞生长抑制率；检测培育肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株48 h后的IC50水平；检测对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549细胞株后的细胞凋亡情况并计算凋亡率。

1.7 统计学处理

应用SPSS18.0统计学软件进行分析，计量资料以（x±s）表示，两组比较行t检验，多组比较行F检验；计数资料以率（%）表示，组间比较行χ2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

2.1单药组和联合用药组对肺癌细胞生长的抑制作用

不同浓度的吉非替尼、奥曲肽、顺铂、5-FU单独应用对肺癌细胞的增殖均起到抑制作用，联合用药组的抑制率明显高于单用组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。其中单药组的肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株培育48 h后的IC50为20 mg/L左右，并呈剂量依赖性（P<0.01），联合用药组IC50明显低于单独用药组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.2三组对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株凋亡的影响

通过流式细胞仪检测对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549细胞株后，三组之间凋亡率相比，差异有统计学意义（P<0.05）。诱导肺癌耐药A549/GR细胞株后，对照组、单药组、联用组之间凋亡率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3讨论

近年来，在种类众多的治癌药物中，顺铂作用似烷化剂，与多种抗肿瘤药有协同作用、且无交叉耐药等特点，作为当前联合化疗中最常用的药物之一，应用广泛，但因其又对肾功能有损害、严重骨髓抑制的副作用，让人很担忧。5-FU对消化系统癌（食管癌、胃癌、肠癌、胰腺癌、肝癌）和乳腺癌疗效较好，对宫颈癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、膀胱癌、头颈部肿瘤也有效，但同样有严重的骨髓抑制副作用。所以近些年来，吉非替尼被认为是治疗非小细胞肺癌的首先药物，由各国研究人员对其治疗效果进行了临床试验，同时也对不同的肿瘤细胞进行了各种尝试，被证实其对多种肿瘤细胞的增长均能起到抑制作用[6]。王亚丽等[3]研究发现，吉非替尼可抑制肺腺癌细胞的增殖，并且能够影响表皮生长因子受体的表达，从而起到治疗的作用。然而有部分学者认为吉非替尼的作用效果还存在进一步研究的价值，有报道称，通过吉非替尼治疗晚期肝癌的临床效果并不显著，并且在多数小细胞肺癌中也为达到令人满意的效果[7]，所以，有必要进行吉非替尼与传统化疗药物的联合应用，对其是否能增强治疗效果进行探讨。

有报道称吉非替尼与奥曲肽联合作用可有效延长肺腺癌的一年内无进展生存率和中位生存期，所以确定最佳的联合方案必须通过大量的研究才能应用于临床[8]。温莹浩等[9]索拉非尼与吉非替尼联合应用于人肺癌细胞株A549研究，结果显示，两药联合能够有效抑制人肺癌细胞株A549的生长。陈智伟等[5]研采用CCK8法检测人肺癌细胞A549、H460、H1299、SPC-A、95C、95D对于吉非替尼与西妥昔单抗的IC50，并以流式细胞技术进行细胞凋亡监测，结果显示，1 nmol/L吉非替尼与5 μmol/L西妥昔单抗对于A549细胞的生长抑制率约为30%和40%，而将两者联合应用时，抑制率可提高至50%以上；两药单独应用时，A549细胞迁移降低率分别为18%、22%，两药联合应用时，细胞迁移降低率为35%。由此可见，将吉非替尼与其他药物联合应用可能具有协同作用，有望提高药物对于肺癌细胞生长及迁移的抑制作用，可能对于肺癌的治疗具有较大潜力。本次研究结果显示，在体外肺癌细胞试验中，吉非替尼单用组与奥曲肽单用组对细胞增长均起到抑制作用，并且具有浓度依赖性的特点，随着浓度的增加抑制率也逐渐增强，当奥曲肽浓度超过50 mg/L以上后，抑制率未进一步增加，可能是肺癌A549细胞达到饱和状态，这种情况在其他研究中也有类似现象[10]。当吉非替尼与奥曲肽联合应用时抑制率明显高于单独用药，因此表明两种药物具有协同抑制作用，可增加药物的敏感性，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制DNA的合成，从而提高化疗效果。同时本次研究结果显示，吉非替尼组的凋亡率与奥曲肽组相比差异不明显，无统计学意义（P>0.05），但是对照组、单药组、联用组之间差异较明显（P<0.05），A549细胞的凋亡率显著升高，说明联合用药对细胞的增生具有协同抑制作用，可促进细胞凋亡，增加治疗效果。研究结果中，联合用药组IC50=（5.3±0.5）、（5.4±0.8）mg/L低于两组单独用药组（20.1±1.2）、（20.3±1.4）mg/L，说明联合用药对治疗其他肺癌也具有一定的疗效，敏感A549与耐药A549/GR肺癌细胞株间对肺癌A549的治疗效果不影响。

总之，吉非替尼联合用药可增强对细胞的抑制作用，将其与其他化疗药物联合应用于肺癌的治疗具有良好疗效。

[参考文献]

[1] 秦培艳，庄洪卿，袁智勇，等. 吉非替尼不同加药时间肺癌A549细胞放射增敏研究[J]. 中华放射肿瘤学杂志，2010，19（2）：150-152.

[2] 康小红，龚亚斌，王立芳，等. 蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975的影响及机制研究[J]. 中国中西医结合杂志，2013，33（8）：1081-1085.

[3] 王亚丽，牟晓燕，游力，等. 吉非替尼对肺腺癌细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响[J]. 中国老年学杂志，2010，30（6）：805-808.

[4] 周晓，王伟，戴捷，等. 顺铂与氟尿嘧啶联合化疗对腹壁皮瓣的影响[J]. 组织工程与重建外科杂志，2011，6（14）：109-110.

[5] 陈智伟，虞永峰，李子明，等. 吉非替尼和西妥昔单抗联合治疗非小细胞肺癌的体外实验研究[J]. 中国癌症杂志，2010，20（4）：275-280.

[6] 陶显东，钟镭，薛磊，等. 载顺铂的纳米羟基磷灰石对A549肺腺癌细胞体外胀亡的影响[J]. 组织工程与重建外科杂志， 2012，1（15）：121-122.

[7] 马丽，韩晓红，王帅，等. 盐酸埃克替尼对肺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中华医学杂志，2012，92（36）：2561-2564.

[8] 玄香兰，周彩存，安昌善，等. 不同用药顺序吉非替尼、多西他赛联用对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用[J]. 山东医药，2012，52（17）：32-34.

[9] 温莹浩，林小小，钱海华，等. 索拉非尼联合吉非替尼对人肺癌细胞株A549的生长抑制作用[J]. 广东医学，2013， 34（12）：1826-1829.

[10] 魏超，周乃珍，郭慧，等. 不同序贯的吉非替尼与化疗药物联合对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用[J]. 安徽师范大学学报（自然科学版），2011，34（3）：265-268.

（收稿日期：2014-02-28）

2结果

2.1单药组和联合用药组对肺癌细胞生长的抑制作用

不同浓度的吉非替尼、奥曲肽、顺铂、5-FU单独应用对肺癌细胞的增殖均起到抑制作用，联合用药组的抑制率明显高于单用组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。其中单药组的肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株培育48 h后的IC50为20 mg/L左右，并呈剂量依赖性（P<0.01），联合用药组IC50明显低于单独用药组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.2三组对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株凋亡的影响

通过流式细胞仪检测对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549细胞株后，三组之间凋亡率相比，差异有统计学意义（P<0.05）。诱导肺癌耐药A549/GR细胞株后，对照组、单药组、联用组之间凋亡率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3讨论

近年来，在种类众多的治癌药物中，顺铂作用似烷化剂，与多种抗肿瘤药有协同作用、且无交叉耐药等特点，作为当前联合化疗中最常用的药物之一，应用广泛，但因其又对肾功能有损害、严重骨髓抑制的副作用，让人很担忧。5-FU对消化系统癌（食管癌、胃癌、肠癌、胰腺癌、肝癌）和乳腺癌疗效较好，对宫颈癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、膀胱癌、头颈部肿瘤也有效，但同样有严重的骨髓抑制副作用。所以近些年来，吉非替尼被认为是治疗非小细胞肺癌的首先药物，由各国研究人员对其治疗效果进行了临床试验，同时也对不同的肿瘤细胞进行了各种尝试，被证实其对多种肿瘤细胞的增长均能起到抑制作用[6]。王亚丽等[3]研究发现，吉非替尼可抑制肺腺癌细胞的增殖，并且能够影响表皮生长因子受体的表达，从而起到治疗的作用。然而有部分学者认为吉非替尼的作用效果还存在进一步研究的价值，有报道称，通过吉非替尼治疗晚期肝癌的临床效果并不显著，并且在多数小细胞肺癌中也为达到令人满意的效果[7]，所以，有必要进行吉非替尼与传统化疗药物的联合应用，对其是否能增强治疗效果进行探讨。

有报道称吉非替尼与奥曲肽联合作用可有效延长肺腺癌的一年内无进展生存率和中位生存期，所以确定最佳的联合方案必须通过大量的研究才能应用于临床[8]。温莹浩等[9]索拉非尼与吉非替尼联合应用于人肺癌细胞株A549研究，结果显示，两药联合能够有效抑制人肺癌细胞株A549的生长。陈智伟等[5]研采用CCK8法检测人肺癌细胞A549、H460、H1299、SPC-A、95C、95D对于吉非替尼与西妥昔单抗的IC50，并以流式细胞技术进行细胞凋亡监测，结果显示，1 nmol/L吉非替尼与5 μmol/L西妥昔单抗对于A549细胞的生长抑制率约为30%和40%，而将两者联合应用时，抑制率可提高至50%以上；两药单独应用时，A549细胞迁移降低率分别为18%、22%，两药联合应用时，细胞迁移降低率为35%。由此可见，将吉非替尼与其他药物联合应用可能具有协同作用，有望提高药物对于肺癌细胞生长及迁移的抑制作用，可能对于肺癌的治疗具有较大潜力。本次研究结果显示，在体外肺癌细胞试验中，吉非替尼单用组与奥曲肽单用组对细胞增长均起到抑制作用，并且具有浓度依赖性的特点，随着浓度的增加抑制率也逐渐增强，当奥曲肽浓度超过50 mg/L以上后，抑制率未进一步增加，可能是肺癌A549细胞达到饱和状态，这种情况在其他研究中也有类似现象[10]。当吉非替尼与奥曲肽联合应用时抑制率明显高于单独用药，因此表明两种药物具有协同抑制作用，可增加药物的敏感性，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制DNA的合成，从而提高化疗效果。同时本次研究结果显示，吉非替尼组的凋亡率与奥曲肽组相比差异不明显，无统计学意义（P>0.05），但是对照组、单药组、联用组之间差异较明显（P<0.05），A549细胞的凋亡率显著升高，说明联合用药对细胞的增生具有协同抑制作用，可促进细胞凋亡，增加治疗效果。研究结果中，联合用药组IC50=（5.3±0.5）、（5.4±0.8）mg/L低于两组单独用药组（20.1±1.2）、（20.3±1.4）mg/L，说明联合用药对治疗其他肺癌也具有一定的疗效，敏感A549与耐药A549/GR肺癌细胞株间对肺癌A549的治疗效果不影响。

总之，吉非替尼联合用药可增强对细胞的抑制作用，将其与其他化疗药物联合应用于肺癌的治疗具有良好疗效。

[参考文献]

[1] 秦培艳，庄洪卿，袁智勇，等. 吉非替尼不同加药时间肺癌A549细胞放射增敏研究[J]. 中华放射肿瘤学杂志，2010，19（2）：150-152.

[2] 康小红，龚亚斌，王立芳，等. 蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975的影响及机制研究[J]. 中国中西医结合杂志，2013，33（8）：1081-1085.

[3] 王亚丽，牟晓燕，游力，等. 吉非替尼对肺腺癌细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响[J]. 中国老年学杂志，2010，30（6）：805-808.

[4] 周晓，王伟，戴捷，等. 顺铂与氟尿嘧啶联合化疗对腹壁皮瓣的影响[J]. 组织工程与重建外科杂志，2011，6（14）：109-110.

[5] 陈智伟，虞永峰，李子明，等. 吉非替尼和西妥昔单抗联合治疗非小细胞肺癌的体外实验研究[J]. 中国癌症杂志，2010，20（4）：275-280.

[6] 陶显东，钟镭，薛磊，等. 载顺铂的纳米羟基磷灰石对A549肺腺癌细胞体外胀亡的影响[J]. 组织工程与重建外科杂志， 2012，1（15）：121-122.

[7] 马丽，韩晓红，王帅，等. 盐酸埃克替尼对肺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中华医学杂志，2012，92（36）：2561-2564.

[8] 玄香兰，周彩存，安昌善，等. 不同用药顺序吉非替尼、多西他赛联用对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用[J]. 山东医药，2012，52（17）：32-34.

[9] 温莹浩，林小小，钱海华，等. 索拉非尼联合吉非替尼对人肺癌细胞株A549的生长抑制作用[J]. 广东医学，2013， 34（12）：1826-1829.

[10] 魏超，周乃珍，郭慧，等. 不同序贯的吉非替尼与化疗药物联合对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用[J]. 安徽师范大学学报（自然科学版），2011，34（3）：265-268.

（收稿日期：2014-02-28）

2结果

2.1单药组和联合用药组对肺癌细胞生长的抑制作用

不同浓度的吉非替尼、奥曲肽、顺铂、5-FU单独应用对肺癌细胞的增殖均起到抑制作用，联合用药组的抑制率明显高于单用组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。其中单药组的肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株培育48 h后的IC50为20 mg/L左右，并呈剂量依赖性（P<0.01），联合用药组IC50明显低于单独用药组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.2三组对肺癌敏感A549、耐药A549/GR细胞株凋亡的影响

通过流式细胞仪检测对照组、单药组、联合用药组诱导肺癌敏感A549细胞株后，三组之间凋亡率相比，差异有统计学意义（P<0.05）。诱导肺癌耐药A549/GR细胞株后，对照组、单药组、联用组之间凋亡率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3讨论

近年来，在种类众多的治癌药物中，顺铂作用似烷化剂，与多种抗肿瘤药有协同作用、且无交叉耐药等特点，作为当前联合化疗中最常用的药物之一，应用广泛，但因其又对肾功能有损害、严重骨髓抑制的副作用，让人很担忧。5-FU对消化系统癌（食管癌、胃癌、肠癌、胰腺癌、肝癌）和乳腺癌疗效较好，对宫颈癌、卵巢癌、绒毛膜上皮癌、膀胱癌、头颈部肿瘤也有效，但同样有严重的骨髓抑制副作用。所以近些年来，吉非替尼被认为是治疗非小细胞肺癌的首先药物，由各国研究人员对其治疗效果进行了临床试验，同时也对不同的肿瘤细胞进行了各种尝试，被证实其对多种肿瘤细胞的增长均能起到抑制作用[6]。王亚丽等[3]研究发现，吉非替尼可抑制肺腺癌细胞的增殖，并且能够影响表皮生长因子受体的表达，从而起到治疗的作用。然而有部分学者认为吉非替尼的作用效果还存在进一步研究的价值，有报道称，通过吉非替尼治疗晚期肝癌的临床效果并不显著，并且在多数小细胞肺癌中也为达到令人满意的效果[7]，所以，有必要进行吉非替尼与传统化疗药物的联合应用，对其是否能增强治疗效果进行探讨。

有报道称吉非替尼与奥曲肽联合作用可有效延长肺腺癌的一年内无进展生存率和中位生存期，所以确定最佳的联合方案必须通过大量的研究才能应用于临床[8]。温莹浩等[9]索拉非尼与吉非替尼联合应用于人肺癌细胞株A549研究，结果显示，两药联合能够有效抑制人肺癌细胞株A549的生长。陈智伟等[5]研采用CCK8法检测人肺癌细胞A549、H460、H1299、SPC-A、95C、95D对于吉非替尼与西妥昔单抗的IC50，并以流式细胞技术进行细胞凋亡监测，结果显示，1 nmol/L吉非替尼与5 μmol/L西妥昔单抗对于A549细胞的生长抑制率约为30%和40%，而将两者联合应用时，抑制率可提高至50%以上；两药单独应用时，A549细胞迁移降低率分别为18%、22%，两药联合应用时，细胞迁移降低率为35%。由此可见，将吉非替尼与其他药物联合应用可能具有协同作用，有望提高药物对于肺癌细胞生长及迁移的抑制作用，可能对于肺癌的治疗具有较大潜力。本次研究结果显示，在体外肺癌细胞试验中，吉非替尼单用组与奥曲肽单用组对细胞增长均起到抑制作用，并且具有浓度依赖性的特点，随着浓度的增加抑制率也逐渐增强，当奥曲肽浓度超过50 mg/L以上后，抑制率未进一步增加，可能是肺癌A549细胞达到饱和状态，这种情况在其他研究中也有类似现象[10]。当吉非替尼与奥曲肽联合应用时抑制率明显高于单独用药，因此表明两种药物具有协同抑制作用，可增加药物的敏感性，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制DNA的合成，从而提高化疗效果。同时本次研究结果显示，吉非替尼组的凋亡率与奥曲肽组相比差异不明显，无统计学意义（P>0.05），但是对照组、单药组、联用组之间差异较明显（P<0.05），A549细胞的凋亡率显著升高，说明联合用药对细胞的增生具有协同抑制作用，可促进细胞凋亡，增加治疗效果。研究结果中，联合用药组IC50=（5.3±0.5）、（5.4±0.8）mg/L低于两组单独用药组（20.1±1.2）、（20.3±1.4）mg/L，说明联合用药对治疗其他肺癌也具有一定的疗效，敏感A549与耐药A549/GR肺癌细胞株间对肺癌A549的治疗效果不影响。

总之，吉非替尼联合用药可增强对细胞的抑制作用，将其与其他化疗药物联合应用于肺癌的治疗具有良好疗效。

[参考文献]

[1] 秦培艳，庄洪卿，袁智勇，等. 吉非替尼不同加药时间肺癌A549细胞放射增敏研究[J]. 中华放射肿瘤学杂志，2010，19（2）：150-152.

[2] 康小红，龚亚斌，王立芳，等. 蟾毒灵联合吉非替尼对肺癌细胞H1975的影响及机制研究[J]. 中国中西医结合杂志，2013，33（8）：1081-1085.

[3] 王亚丽，牟晓燕，游力，等. 吉非替尼对肺腺癌细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响[J]. 中国老年学杂志，2010，30（6）：805-808.

[4] 周晓，王伟，戴捷，等. 顺铂与氟尿嘧啶联合化疗对腹壁皮瓣的影响[J]. 组织工程与重建外科杂志，2011，6（14）：109-110.

[5] 陈智伟，虞永峰，李子明，等. 吉非替尼和西妥昔单抗联合治疗非小细胞肺癌的体外实验研究[J]. 中国癌症杂志，2010，20（4）：275-280.

[6] 陶显东，钟镭，薛磊，等. 载顺铂的纳米羟基磷灰石对A549肺腺癌细胞体外胀亡的影响[J]. 组织工程与重建外科杂志， 2012，1（15）：121-122.

[7] 马丽，韩晓红，王帅，等. 盐酸埃克替尼对肺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中华医学杂志，2012，92（36）：2561-2564.

[8] 玄香兰，周彩存，安昌善，等. 不同用药顺序吉非替尼、多西他赛联用对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用[J]. 山东医药，2012，52（17）：32-34.

[9] 温莹浩，林小小，钱海华，等. 索拉非尼联合吉非替尼对人肺癌细胞株A549的生长抑制作用[J]. 广东医学，2013， 34（12）：1826-1829.

[10] 魏超，周乃珍，郭慧，等. 不同序贯的吉非替尼与化疗药物联合对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用[J]. 安徽师范大学学报（自然科学版），2011，34（3）：265-268.

（收稿日期：2014-02-28）