YKL-40和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义*

尚 倩 赵淑萍

(1.青岛大学医学院，山东 青岛 266071; 2.青岛大学医学院附属医院妇科,山东 青岛 266000)

卵巢癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，其致死率较高，好发于45岁以上的妇女，在早期发病隐匿，病情不容易被察觉，病程进展较快[1-2]，当发现时多已经是晚期，耽误了治疗的最佳时机，因此，对于卵巢癌的早期诊断是非常重要的，早诊断，早治疗，可以采取有效的措施促进患者健康。本实验对YKL-40和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义进行了研究，旨在找出判断卵巢癌的标志物，具体情况如下。

1 资料和方法

1.1临床资料 选择青岛大学医学院附属医院2012年1月-12月收治的30例卵巢癌患者，另选择同期正常卵巢标本20例和卵巢良性肿瘤患者20例，年龄35～64岁，平均年龄(45.5±4.2)岁，三组一般情况差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2检测方法 三组均采用免疫组化的方法检测YKL-40和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达，SP免疫组化试剂盒为武汉博士德公司产品，石蜡切片机购自德国Leica公司，VEGF兔抗人单克隆抗体购自北京中杉金桥公司，鼠抗人YKL-40单克隆抗体购于SanDiego公司，切片采用免疫组化SABC法染色，选用公司配置的阳性切片作为阳性对照，用磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照，染色步骤按产品说明书进行：石蜡切片脱蜡至水；3%H2O2室温孵育30 min，消除内源性过氧化物酶的活性；在微波炉中煮沸，每间隔 30 s煮沸，共 30 min，室温放凉，磷酸盐缓冲液冲洗 5 min×2；滴加5%BSA封闭液，减少背景染色；滴加VUWH兔抗人单克隆抗体和鼠抗人YKL-40单克隆抗体；4℃冰箱过夜，滴加生物素标记的二抗；滴加试剂SABC，滴加DAB溶液显色，苏木素复染15 min，充分水洗，二甲苯透明、中性树胶封固。

1.3统计学处理 采用SPSS17.0统计软件进行数据处理,计数资料采用χ2检验,以P≤0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1YKL-40和VEGF在三组患者中的表达 20例正常卵巢组中，YKL-40全部为阴性，VEGF有4例阳性，阳性率为20%。20例卵巢良性肿瘤组中，YKL-40有4例阳性，阳性率为20%，VEGF有7例阳性，阳性率为35%。30例卵巢癌组中，YKL-40有24例阳性，阳性率为80%，VEGF有22例阳性，阳性率为73.3%。经卡方检验，YKL-40和VEGF的表达在卵巢癌中最高，结果具有统计学意义(χ2=32.879，P=0.000；χ2=15.355，P=0.000)，见表1。

2.2YKL-40和VEGF的表达与卵巢癌临床病理特征的关系 YKL-40和VEGF的表达与卵巢癌的临床分期有关，与年龄、组织分级、组织分型都无关，结果具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 YKL-40和VEGF在三组患者中的表达

表2 YKL-40和VEGF的表达与卵巢癌临床病理特征的关系

3 讨 论

卵巢癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，近年来，越来越多的人罹患此病，上皮性卵巢癌尤为常见，YKL-40因其一条肽链氨基端的3个起始氨基酸：酪氨酸、赖氨酸和亮氨酸，符号分别为 Y、K和 L，且其相对分子质量约为40000而被称为 YKL-40，近年的研究发现，YKL-40在上皮性卵巢癌等多种人类恶性肿瘤患者的血清中明显高表达，而且与部分肿瘤的恶性临床表型密切相关，Hogdall等[3-4]研究发现卵巢癌患者血浆和肿瘤组织中YKL-40均高表达，并且血浆YKL-40水平可作为卵巢癌患者预后的标志物，Johansen等对YKL-40在13种不同的恶性肿瘤中，包括2500例病人的综合研究中证实，YKL-40在肿瘤细胞的增生、分化、生长、侵袭和转移、血管发生、炎症反应以及肿瘤周围细胞外基质的重塑中起重要作用，Gronland等研究发现血清 YKL-40水平升高增加了卵巢癌二线化疗药物耐药性的风险，从生物学角度说明 YKL-40表达增高可能与卵巢癌细胞的增殖和抗凋亡有关，血管内皮生长因子(VEGF)及其受体是目前所发现的最关键的促血管生长因子之一，它是肿瘤细胞自分泌的一个重要调节因子，它可调节肿瘤细胞的增殖、诱导新生血管的生成，并且与肿瘤自身的生长、浸润及远处转移有关，能刺激血管内皮细胞增生、分裂诱导新生血管形成，削弱血管的屏障作用，并可增加微血管通透性，引起血浆蛋白外渗，诱导蛋白水解酶的形成，降解细胞外基质，加速上皮性卵巢癌的血管生成、浸润和转移，为转移灶的形成提供必要的途径和血供，本研究结果显示20例正常卵巢组中，YKL-40全部为阴性，VEGF有4例阳性，阳性率为20%，20例卵巢良性肿瘤组中，YKL-40有4例阳性，阳性率为20%，VEGF有7例阳性，阳性率为35%，30例卵巢癌组中，YKL-40有24例阳性，阳性率为80%，VEGF有22例阳性，阳性率为73.3%，提示在卵巢癌中，YKL-40和VEGF的表达最高，结果具有统计学意义(P<0.05)，YKL-40和VEGF的表达与卵巢癌的临床分期有关，与年龄、组织分级、组织分型都无关，结果具有统计学意义(P<0.05)，与于歌等[5-6]研究结果一致，提示YKL-40和VEGFDE 表达与卵巢癌的发生、发展有关，可以作为判断卵巢癌患者预后的一种新分子标志物，在实践中有一定的指导意义。

[1] 邹萍,张佐阳,吴继锋.胃癌组织中cxcl12和cxcr4的表达及意义[J].临床与实验病理学杂志,2009,70(5):444-454.

[2] 梁正东,卞度宏.卵巢癌细胞对顺铂耐药及其逆转的实验研究[J].中华妇产科杂志,2010,22(9):542-545.

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[4] Johansen JS, Jensen BV, Roslind A, et al.Is YKL-40 a new therapeutic target in cancer[J].Expert Opin Ther Targets,2010, 11(2): 219-234.

[5] 于歌,王晶.卵巢肿瘤组织中HABP-1、VEGF的表达及其临床病理意义[J].实用肿瘤学杂志,2010,18(12):1045-1047.

[6] Johansen JS,Jensen BV,Roslind A,et al.Is YKL-40 a new therapeutic target in cancer[J].Expert Opin Ther Targets,2011,l4(1):23-25.