微小病理组织留取与保存送检的方法

汪海滨 侯旭 董静 李若愚 于铠睿

手术中取下的病理组织过小(检材长径≤0.2cm)的情况非常常见，如膀胱肿瘤、声带息肉、脑部胶质瘤、各部位淋巴结等。传统方法是使用大头针将病理组织扎牢，固定于试纸或滤纸上。如果病理组织如大头针尖样大小，就难以固定。即便是放在试纸或滤纸上，病理组织经固定液固定后，颜色苍白，与试纸或滤纸近似，难以辨认。因此手术室工作人员与病理科交接病理取材时，寻找及识别病理组织非常困难。需要反复的辨识、确认，耗时费力。当遇到病理组织过小这种情况时，可以通过使用伊红将微小病理组织染色的方法，将它们染成红色，很容易看出哪个是送检的微小病理组织，降低了识别送检组织的难度，提高了相关工作人员的工作效率。伊红是一种酸性组织染色剂，溶于水及乙醇。它是病理组织检查过程中使用的常规染色剂。使用伊红染色后的病理组织，细胞核呈蓝色，细胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色，钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色［1］。它不会引起病理组织的结构及质量的变化，不影响病理组织检查报告的结果。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011至2012年我院收治的声带息肉拟行手术切除患者100例，其中男56例，女44例;年龄41～45岁。随机分试验组与对照组，每组50例。试验组中，男23例，女27例;平均年龄(42.8±1.4)岁。对照组中男21例，女29例;平均年龄(43.2±1.3)岁。2组一般资有均衡性。

1.2 方法

1.2.1 对照组:将手术中取下的微小病理组织先放置在试纸或滤纸上妥为包裹，然后放入专用病理容器内;尽快浸泡于装有足够量固定液的容器中固定;固定后，按规定程序送检。固定液量应浸没包裹病理组织的试纸或滤纸包。常规固定液为4%中性甲醛。

1.2.2 试验组:用干燥、洁净的大镊子尖，轻蘸一下准备好的伊红粉剂，随后轻轻夹取或蘸取微小病理组织，在此过程中要求力度适中，不能改变病理组织的结构和形态。微小病理组织遇伊红即被染成红色，将其放置在试纸或滤纸上。或先将微小病理组织放置在试纸或滤纸上，再用干燥、洁净的大镊子尖，轻蘸一下准备好的伊红粉剂，再用这把大镊子尖部，轻轻接触一下病理组织，使病理组织染成红色后，包裹好放入专用病理容器内，加入固定液，固定液量应浸没包裹病理组织的试纸或滤纸包。固定后，按规定程序送检。常规固定液为4%中性甲醛。

1.2.3 信息化处理:将病理标本容器条码化，用PDA手持终端先扫描患者腕带信息，再扫描病理容器外面的信息，即完成了病理组织的确认及送检。与病理科交接时使用PDA手持终端扫描条码，显示患者及病理组织信息，即完成交接确认工作。PDA在病理组织留取、送检确认中的应用具有实时、动态、方便、快捷等优点，PDA的语音输入、图像传输、对话呼叫、储存记忆等功能极大地方便医护人员的工作，提高病理组织送检工作的准确性、安全性。

1.3 观察指标

1.3.1 辨识难易度:①轻度:病理组织辨识时间1～10 s。②中度:病理组织辨识时间11～20 s。③重度:病理组织辨识时间21～30 s。④极重度:病理组织辨识时间在31 s以上或难以辨识。

1.3.2 病理诊断准确率:随机将微小病理组织分别按以上两种方法保存、送检。分别统计2组病理诊断报告的正确例数。依照《临床技术操作规范》和《临床诊断指南》的病理诊断标准，采用苏木精-伊红(HE)染色做出病理诊断。计算2组病理诊断的准确率，计算公式:

1.4 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2组观察指标识别难易度比较差异有统计学意义(P＜0.05);2组观察指标诊断准确率均为100%，2组比较间差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 2组观察指标识别难易度比较 n=50，例

3 讨论

由于医疗技术水平的飞速发展、人们对自身健康的认识与重视程度的加强，我们能够对很多疾病进行早期发现、早期诊断、早期治疗、早期手术。很多手术切除的病理组织由于体积非常小，在确认、保存及送检过程中就需要我们特别注意，要防止病理组织送检过程的差错及丢失，病理组织的固定液质量要符合要求:即浸泡固定之后，不造成组织结构的改变，保证得出正确的病理诊断。

3.1 病理诊断的重要性 病理医师应用病理学知识和相关技术与个人专业实践经验，就送检的标本(包括活体组织、细胞和尸体等)进行病理学检查，结合相关临床资料，做出的关于该组织标本的病理诊断。病理学诊断是临床医师诊断疾病、制定治疗方案、评估疾病预后和总结诊治疾病经验等的重要依据，并在疾病预防与传染病预防中发挥着重要作用［1］。

3.2 病理组织对于病理诊断的作用 医院病理科所接收的手术部的病理组织标本，主要是做活体组织病理学检查(简称活检)、细胞病理学检查(简称细胞学检查)，就送检的病理组织标本，做出疾病的病理学诊断(简称病理诊断)［1］。所以，病理组织是病理科医师做出正确病理诊断的基础。手术部护士应正确掌握病理组织标本的留取、保存、送检的相关知识，这是非常重要的。如发生标本严重自溶、腐败、干涸、标本组织过小等不能或难以制做切片的情况，以及其他可能影响病理检查可能性和诊断准确性的情况，病理科对此类病理组织是不予接收的［1］。上述情况会延误患者疾病的正确诊断，使医生不能实施正确的治疗方法，护士不能采取正确的护理措施，患者失去疾病的最佳治疗时机，造成不良影响及后果。所以，手术部护士要加强对病理组织的管理，不断学习，更新知识，改进工作。

3.3 微小病理组织留取、送检注意事项 手术中切除的微小病理组织，如何固定、保存、送检，防丢失及差错，是做出正确病理诊断的关键。病理组织离体后，应尽快浸泡于装有足够量固定液的密闭容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的5～10倍［1］。但微小病理组织(检材长径≤0.2cm)的固定液量应以浸没包裹病理组织的试纸或滤纸包为妥。微小病理组织只能用试纸或滤纸包裹，禁用纱布包裹。因微小的病理组织会沾附在纱布纤维上，如不染色，微小病理组织将难以辨认，即使已用伊红染色，病理组织也难以从纱布上取下。会给病理检验工作带来极大的难度。手术中快速病理诊断或称手术中快速活体组织病理检查(简称术中快速活检)，是临床医师在实施手术过程中，就与手术方案有关的疾病诊断问题，请求病理医师快速进行的紧急会诊。仅用30 min，就可以做出诊断。但手术中取下的过小的标本(检材长径≤0.2cm)，是不宜做快速病理诊断的［1］。术中所需要的细胞病理学检查，大多是脱落细胞的检查。如胸、腹腔积液或冲洗液、关节腔积液、脑脊液等的脱落细胞检查。因脱落的细胞极易自溶，所以要求手术部护士，采集的标本中不用添加任何固定液，尽快送检。因条件限制，不能立即送检制片的，应将采集的标本置于低温环境或加入适量95%乙醇，短时间保存［2］。

3.4 伊红染色微小病理组织的应用价值 它有效地防止了微小病理组织的丢失，创造了便利的工作条件，节约了工作时间，提高了相关工作人员的工作效率，有效地增加了科室之间合作的满意度、医患之间的满意度。使用伊红染色微小病理组织后，再固定液固定、送检的方法，来替代传统保存、固定微小病理组织方法，两组辨识难易度比较差异有统计学意义(P＜0.05)，2组诊断准确率间差异无统计学意义(P＞0.05)，表明该方法安全、有效。

综上所述，伊红染色微小病理组织，省时省力，既有效地防止了微小病理组织丢失、又可以获得病理诊断的准确结果，且取材方便、可操作性强，值得临床推广应用。

1 吴阶平，韩启德，王陇德，等主编.临床技术操作规范·病理学分册.第 4 版.北京:人民军医出版社，2004.1，11，27，39.

2 吴阶平，韩启德，陈竺，等主编.临床诊疗指南·病理学分册.第1版.北京:人民卫生出版社，2009.1007.