胃癌患者血清斯钙素-2基因的表达及临床意义

杨立成 吴 醒 姚国忠 汤伟民

江苏省溧阳市人民医院普外科，江苏溧阳 213300

胃癌是我国常见的恶性肿瘤，5年生存率在10%左右。早期诊断可明显改善胃癌预后，但在我国内镜筛查尚未普及，因此，寻找胃癌特异性的血清肿瘤标志物具有重要意义[1]。斯钙素（stanniocalcin-2，STC-2）是一种糖蛋白激素，参与调节钙磷代谢，促进脑神经元分化，以及影响骨骼和肌肉的发育[2]。近来研究发现，STC-2在包括胃癌在内的多种肿瘤发生发展过程中起着十分重要的作用，并可能作为一种新型肿瘤标记物[3]。因此，本研究拟检测STC-2蛋白在胃癌外周血中的表达，并分析其临床意义。

1 材料与方法

1.1 组织标本

75例原发性胃癌外周血标本来自溧阳市人民医院普外科2007年7月～2010年7月住院患者，所有病例均经病理组织学检查明确诊断，术前均未接受放、化疗，男 44例，女 31例，年龄44～82岁，中位年龄62岁，肿瘤分期根据国际抗癌联盟（UICC）2010标准，其中Ⅰ期8例，Ⅱ期23例，Ⅲ期37例，Ⅳ期7例。患者术前常规检查及术后7～10 d分别以促凝管留取外周血10 mL。同期收集40例胃良性疾病（20例慢性胃炎、20例胃溃疡）患者血标本做对照，其中男22例，女18例，中位年龄61岁，与肿瘤患者具有可比性。血清收集方法：3000 r/min，离心10 min，离心半径为7.5 cm，保留上层血清。本研究经医院伦理委员会批准并取得患者知情同意。

1.2 方法

采用ELISA方法检测血清STC-2表达。DuoSet ELISA试剂盒购自美国R&D公司，按试剂盒说明操作，于450 nm波长下读取吸光度值。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0软件进行分析，计量资料采取t检验，诊断敏感性和特异性根据受试者特征曲线（receiver operating characteristics，ROC）计算，P ＜ 0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清STC-2水平

75例胃癌患者术前血清STC-2平均水平为（1694.4±566.16）ng/L，同期40例良性胃疾病患者血清STC-2蛋白水平为（691.75±318.48）ng/L，差异有统计学意义（P ＜ 0.001）。 术后 7～10 d，胃癌患者血清STC-2 平均水平为（1126.0±419.43）ng/L，较术前明显下降，差异有统计学意义（P＜0.001）。见图1。

图1 各组血清斯钙素-2表达水平

2.2 血清STC-2的诊断效能

ROC曲线表明，血清STC-2水平具有良好的诊断敏感性和特异性，曲线下面积（area under the curve，AUC）为 0.945（95%CI：0.908～0.982，P ＜ 0.001），约登指数（Youden index）为 0.76。 见图 2。

图2 胃癌患者与胃良性疾病患者血清斯钙素-2表达的受试者ROC曲线

3 讨论

STC是一种首先在硬骨鱼类中发现，并已被充分阐明的糖蛋白激素。随后在人和哺乳动物中发现也存在类似的蛋白，根据氨基酸序列的差异可以分为STC-1和STC-2，在生物体内发挥着相辅相成的作用。STC-2基因定位于人染色体5q35.1，全长5341 bp，所编码的分泌蛋白含302个氨基酸。目前认为STC-2在人体组织器官中广泛表达，但主要在心脏、脾脏、肾脏和胰腺中表达，以旁分泌和自分泌方式，参与调节多种病理生理过程[2]。STC-2对钙磷浓度的调节可能参与肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的信号传导，有诱导肿瘤细胞适应低氧环境以维持能量代谢稳定等作用。Law等[4]证实，STC-2启动子上有缺氧诱导因子（HIF-1）的结合位点，缺氧条件下HIF-1可上调STC-2表达，促进乳腺癌和卵巢癌细胞增殖。STC-2还可通过VEGF/VEGFR2和血管生成素途径，调节内皮细胞功能，促进新生血管形成[5]。由于缺血缺氧是肿瘤微环境的重要特征[6]，因此，SCT-2过表达可能是对肿瘤微环境的适应性反应。

近来研究表明，STC-2可能是一个新的肿瘤标志物。有学者[7]通过基因芯片在食管癌组织与正常组织，以及原位食管癌与转移淋巴结中筛选差异基因，发现STC-2是二者中重复的基因，进一步通过实时定量PCR证实，88.5%（62/70）的食管癌组织STC-2 mRNA水平高于癌周正常组织，且STC-2高表达与淋巴结转移、分期和不良预后有关。在胆囊癌[8]、结直肠癌[9]、肝癌[10]和激素抵抗前列腺癌[11]中均有报道STC-2表达上调，体外实验也证实STC-2过表达可促进肝癌细胞（YY-8103）和前列腺癌细胞（22Rv1）生长。Yokobori等[3]发现，108例胃癌的STC-2 mRNA表达水平明显高于相应正常组织，且STC-2高表达（54例）与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、脉管癌栓以及腹膜转移相关。还有报道，STC-2 mRNA在胃癌外周血中的表达也较健康志愿者增高，外周血STC-2 mRNA高表达与胃癌术后复发有关[12]。

本研究的结果进一步证实，胃癌患者血清STC-2蛋白水平明显高于胃良性疾病患者，且在术后7～10 d，胃癌患者血清STC-2蛋白水平明显下调，考虑是由于肿瘤负荷减低所致，因此提示其不仅是胃癌早期诊断的潜在指标，还有可能成为预后判断的分子标记，如动态监测血清STC-2水平升高，则高度怀疑肿瘤有复发或进展之可能。由于蛋白分子标志物的稳定性，ELISA检测技术也较PCR方便，故血清STC-2蛋白水平较mRNA表达具有更好的应用前景。

[1]梁大立，李介华，陆灶其，等.血清癌胚抗原、糖类抗原199、糖类抗原724检测对胃癌的诊断价值[J].中国医药导报，2012，9（28）：89-90.

[2]Yeung BH，Law AY，Wong CK.Evolution and roles of stanniocalcin [J].Mol Cell Endocrinol，2012，349 （2）：272-280.

[3]Yokobori T，Mimori K，Ishii H，et al.Clinical significance of stanniocalcin 2 as a prognostic marker in gastric cancer[J].Ann Surg Oncol，2010，17（10）：2601-2607.

[4]Law AY，Wong CK.Stanniocalcin-2 is a HIF-1 target gene that promotes cell proliferation in hypoxia [J].Exp Cell Res，2010，316（3）：466-476.

[5]Law AY，Wong CK.Stanniocalcin-1 and-2 promote angiogenic sprouting in HUVECs via VEGF/VEGFR2 and angiopoietin signaling pathways[J].Mol Cell Endocrinol，2013，374（1-2）：73-81.

[6]杨红丽，董少婷，王爽.微环境对肿瘤发生和发展的影响[J].实用肿瘤杂志，2013，28（1）：100-104.

[7]Yuan Y，Yang ZL，Zou Q，et al.A Comparative study of clinicopathological significance， BIRC7，and STC2 expression between squamous cell/adenosquamous carcino masandadenocarcinomaofgallbladder[J].Neoplasma，2013，60（6）：698-705.

[8]Kita Y，Mimori K，Iwatsuki M，et al.STC2：a predictive marker for lymph node metastasis in esophageal squamous-cell carcinoma[J].Ann Surg Oncol，2011，18（1）：261-272.

[9]Ieta K，Tanaka F，Yokobori T，et al.Clinicopathological significance of stanniocalcin 2 gene expression in colorectal cancer[J].Int J Cancer，2009，125（4）：926-931.

[10]Wang H，Wu K，Sun Y，et al.STC2 is upregulated in hepatocellular carcinoma and promotes cell proliferation and migration in vitro[J].BMB Rep，2012，45（11）：629-634.

[11]Tamura K，Furihata M，Chung SY，et al.Stanniocalcin 2 overexpression in castration-resistant prostate cancer and aggressive prostate cancer[J].Cancer Sci，2009，100（5）：914-919.

[12]Wang YY，Li L，Zhao ZS，et al.Clinical utility of measuring expression levels of KAP1，TIMP1 and STC2 in peripheral blood of patients with gastric cancer[J].World J Surg Oncol，2013，11：81.