筒鞘蛇菰壮阳作用的研究△

覃大保 米长忠 杨 力 周 琴 罗选骐 米玺霖

(吉首大学医学院，湖南 吉首 416000)

筒鞘蛇菰Balanophora involucrate Hook.f.是蛇菰科蛇菰属草本寄生植物，筒鞘蛇菰别名鸡心七，是湘西土家族传统的“四大名药”之一[1－5]。具有清热解毒、凉血止血、益肾养阴的功效。主要用于治疗肾虚腰痛、肺热咳嗽、咯血、血崩、痔疮肿痛等症，民间多应用于治疗阳痿病人[6]。

我国是把蛇菰入药最早的一个国家，《本草纲目》有较详细记载，称蛇菰为“葛花菜”和“葛乳”。俗称为“鹿仙草”。植物的形态在《中国植物志》等文献中有详细描述[2－6]。

2009～2011年我们在主持湖南省科技厅项目中发现湘西产筒鞘蛇菰，对其生态环境及寄生植物、肝保护成分的提取及对酒精性肝病保护作用作了相关研究[3－10]。

对筒鞘蛇菰的壮阳作用研究，是为了进一步搞清楚壮阳时间及机理，对于科学合理的临床用药，药物标准制定具有深远的意义。国内外学者在蛇菰的化学成分和药理活性等方面做了一定的研究工作，为蛇菰资源的开发利用和保护奠定了基础[8－10]。该研究观察筒鞘蛇菰对肾阳虚作用的影响。

1 材料

1.1 药物:筒鞘蛇菰 Balanophora involucrate Hook.f.是蛇菰科蛇菰属草本寄生植物，采于湖南省永顺县。

1.2 动物:湖南省长沙市天勤生物有限公司购买，机构代码:67359287－2，实验等级:SPF级，动物品种品系:大鼠，SD，动物规格:体重180～220g，性别:雄性大鼠40只，雌性大鼠20只。

1.3 药品与试剂:氢化可的松注射液(上海市现代哈森药业有限公司生产)，批号:H41021930，男宝(长春长红制药有限公司生产，批号:Z22023282)，雌二醇 、NO试剂盒(南京建成生物工程研究所生产)。

1.4 实验分组:将雄性SD大鼠40只随机分成5组，即正常大鼠生理盐水组，阳虚大鼠生理盐水组，阳虚大鼠蛇菰高剂量组，阳虚大鼠蛇菰低剂量组，阳虚大鼠男宝组，每组8只。

1.5 模型制备与给药:除正常组外，其余待SD大鼠适应环境后，背部皮下注射氢化可的松25mg/kg，连续7d，制造肾阳虚模型。高剂量组按蛇菰0.65g/kg灌胃，低剂量组按蛇菰0.15g/kg灌胃，阳性对照组按男宝0.65g/kg灌胃，正常对照组和肾虚模型组按生理盐水0.65g/kg灌胃，每日给药1次，连续21d。

1.6 结果用 记录，利用SPSS 19.0统计软件，单因素方差分析，组间比较采用q比较，P ＜0.05。

2 方法与结果

2.1 骑跨实验[7]:在雄鼠末次给药前2h，将每只雌鼠灌雌二醇，末次给药后1h，每组随机取2只，先将其中1只雄鼠放入鼠笼中5min，使其适应环境，再将2只雌鼠放入其中，保持环境安静，计时20min，按上述方法将剩余的雄鼠交配完，然后观察下列指标:(1)捉捕次数(以雄鼠舔外生殖器为标准);(2)20min交配次数(以雄鼠有骑跨动作为标准)。

由表1可知，在大鼠交配能力中，阳性对照组交配能力最强;空白组与模型组相比，交配能力增加，高剂量组与空白组相比，交配能力有所提高。

表1 蛇菰对雄性大鼠交配能力的影响(n=8，±s)

表1 蛇菰对雄性大鼠交配能力的影响(n=8，±s)

注:与模型组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01;

0.65g/kg 25.21±4.11 0.67±0.35阳虚大鼠生理盐水组 0.65g/kg 23.01±5.09 4.01±0.82阳虚大鼠蛇菰高剂量组 0.65g/kg 15.33±3.78* 2.67±0.92*阳虚大鼠蛇菰低剂量组 0.13g/kg 8.00±0.01* 0.33±0.15*阳虚大鼠男宝组 0.65g/kg 35.51±4.65＊＊ 7.50±2.52组别 剂量 捉捕次数 交配次数正常大鼠生理盐水组＊＊

2.2 雄性附睾、精囊腺、前列腺称重[7]:手术取下大鼠阴茎、睾丸、附睾、精囊腺、用电子秤称重。蛇菰对大鼠阴茎、睾丸、附睾、精囊腺无明显影响，结果见表2。

表2 大鼠阴茎、睾丸、附睾、精囊腺如下(n=8，±s)

表2 大鼠阴茎、睾丸、附睾、精囊腺如下(n=8，±s)

注:器官质量与模型组间无显著差别，P＞0.05

±0.18组别 剂量g/kg±0.23肾阳虚大鼠生理盐水组 0.65g/kg 0.23±0.03 3.43±0.39 0.71±0.10 1.061±0.05肾阳虚大鼠蛇菰高剂量组 0.65g/kg 0.25±0.03 3.23±0.3 0.80±0.05 1.053±0.15肾阳虚大鼠蛇菰低剂量组 0.13g/kg 0.24±0.01 3.14±0.26 0.75±0.07 1.08±0.05肾阳虚大鼠男宝组 0.65g/kg 0.27±0.02 3.3±0.35 0.78±0.13 0.803阴茎质量 睾丸质量 附睾质量 精囊腺质量正常大鼠生理盐水组 0.65g/kg 0.22±0.06 3.07±0.20 0.97±0.09 0.94

2.3 蛇菰对大鼠脏器系数的影响[7]:蛇菰对大鼠胸腺、脾、 肾系数无显著影响，结果见表3

表3 蛇菰对大鼠胸腺、脾、肾系数的影响(n=8，±s)

表3 蛇菰对大鼠胸腺、脾、肾系数的影响(n=8，±s)

注:脏器系数各用药组与模型组间无显著差别，P＞0.05

胸腺系数 脾系数 右肾系数 左肾系数正常大鼠生理盐水组 0.65 0.37±0.05 1.00±0.12 1.09±0.30 1.17±0.29组别 剂量g/kg肾阳虚大鼠生理盐水组 0.65 0.41±0.12 1.05±0.12 1.06±0.12 1.21±0.09肾阳虚大鼠蛇菰高剂量组 0.65 0.29±0.03 1.08±0.26 1.14±0.17 1.02±0.13肾阳虚大鼠蛇菰低剂量组 0.13 0.27±0.09 0.78±0.16 1.06±0.14 1.05±0.09肾阳虚大鼠男宝组 0.65 0.28±0.11 0.73±0.12 1.20±0.23 0.99±0.12

2.4 一氧化氮指标的检测:SD大鼠灌胃结束后，颈总动脉插管取血5mL，再取其2mL血液于离心管中，于3000rpm离心15min，吸取上清液10μL作进一步分析[9]。对大鼠的血液NO含量比较中，空白组NO的含量比模型组高，高、低剂量组、阳性对照组与模型组相比，NO含量明显增高，结果见表4。

表4 一氧化氮的含量(n=8，±s)

表4 一氧化氮的含量(n=8，±s)

注:与模型组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01

组别 NO浓度(mmol/L)3255.3±82.02肾阳虚大鼠生理盐水组 1909.033±1.27肾阳虚大鼠蛇菰高剂量组 3997.367±72.76*肾阳虚大鼠蛇菰低剂量组 3724.550±136.26*肾阳虚大鼠男宝组 3217.975±7.84*正常大鼠生理盐水组

3 讨论

3.1 本实验首先建立肾阳虚模型，在这基础上观察蛇菰对雄性大鼠交配能力的影响:在大鼠交配能力中，阳性对照组交配能力最强;空白组与模型组相比，交配能力增加;高剂量组与对照组相比，交配能力有所提高。结果显示，蛇菰能够改善大鼠交配能力。

3.2 蛇菰不同剂量对大鼠阴茎、睾丸、附睾、精囊腺的质量及胸腺、脾、肾系数无明显影响。

3.3 肾阳虚大鼠蛇菰高剂量组、低剂量组和肾阳虚大鼠生理盐水组及正常大鼠生理盐水组比较，蛇菰对大鼠血液中NO的含量有明显影响，使NO含量增高。

[1]杨得胜.土家族药学[M].西宁:青海人民出版社，2009:186.

[2]侯宽昭.中国种子植物科属词典[M].北京:科学出版社，1984:621.

[3]米长忠，吴仕筠，周卫华，等.筒鞘蛇菰的生药学鉴别研究[J].广西中医学报，2010，3:53－54.

[4]谷中村.湘西药用植物概览[M].青海人民出版社，2004:53.

[5]米长忠，周卫华，等.湘西产筒鞘蛇菰生态环境及寄生植物初探[J].湖南中医药大学学报，2011，11:38－39.

[6]罗延华.贵州少数民族药物集[M].长沙:贵州民族出版社，1997:246.

[7]李仪奎主编.中药药理实验方法学[M].上海科学技术出版社，1991:278－283.

[8]张颖，泰丽媛，谭绍银.筒鞘蛇菰的现代研究进展[J].中国中医药咨讯，2010(2).243

[9]郑辉，颜苹苹，蔡文秀，等.血清一氧化氮测定方法[J].福建医科大学学报，1997，31(4)452－454

[10]周卫华，石慧娟，杨梅松竹，等.筒鞘蛇菰对酒精性肝损伤大鼠保护作用的研究[J].中国老年学，2012，20:4438－4440