孤立性房颤患者效应T细胞失衡的研究

安 萍，刘小慧

(首都医科大学附属安贞医院，北京100029)

心房颤动(房颤)是临床常见的心律失常，可明显增加患者脑卒中和心力衰竭的发病率。近年越来越多的证据表明，炎症反应在房颤的发生与进展过程中起重要作用[1－3]。目前已有研究证实效应性 T细胞在多种炎症反应中起重要调节作用[4－5]，但效应性T细胞在房颤中的作用在国内外鲜有报道。近期研究显示，Th1/Th2失衡与动脉粥样斑块形成及稳定性、高血压病所致靶器官损害有关，由此推测Th1/Th2失衡也可能影响心房炎症反应及结构重塑，从而促进房颤的发生及发展[3－4]。但目前房颤患者Th1/Th2平衡的变化仍不明确，本研究探讨了孤立性房颤与效应T细胞活性变化的相关性，以进一步认识房颤发生的可能机制。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2012年4月—2012年9月在安贞医院心内科住院的孤立性房颤患者40例，患者均有心电图或动态心电图明确记录房颤发作，入院前房颤持续时间≥7 d为持续性房颤，不足7 d为阵发性房颤。排除具有高血压病、高血脂症、冠心病、心肌炎、心肌病、心包炎、瓣膜性心脏病、心力衰竭、睡眠呼吸暂停综合征等易导致心律失常的疾病者，患有自身免疫性疾病或风湿性疾病者，合并肝肾功能不全者，高热以及3个月内曾发生心脏或其他部位炎症者，应用炎症抑制药物如非甾体类抗炎药、类固醇药物者，患有恶性肿瘤或妊娠期者。其中阵发性房颤25例(PAF组)，男17例，女8例，年龄(53±8)岁;持续性房颤15例(CAF组)，男11例，女4例，年龄(57±6)岁。另选择同期在我院进行体检的与患者年龄、性别匹配的健康体检者20例作为对照组，其中男12例，女8例，年龄(51±10)岁。

1.2 方法 患者在入院24 h内空腹状态下经肘静脉抽血装入含有肝素钠的抗凝管中，采血后30～60 min内4℃条件下离心5 min(3000 r/min)，将上层分离血浆分装至消毒EP管后保存于－80℃冰箱，后期用 ELISA法检测细胞因子水平。下层细胞用于分离外周血单核细胞，然后进行标记、孵育，流式细胞仪检测TH1和TH2细胞。对照组检测方法同房颤组。

1.3 统计学处理 采用SPSS 12.0统计学软件包处理，数据以均数±标准差(±s)表示，组间均数比较采用One Way Anova方差分析，两两比较采用LSD检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组Th1、Th2细胞比例比较 PAF组、CAF组Th1细胞比例明显高于对照组(P均＜0.01)，PAF组和CAF组间比较无显著性差异(P＞0.05);而Th2细胞比例 3组间比较均无显著性差异(P均＞0.05)。见表1。

表1 各组Th1、Th2细胞比例比较(±s，%)

表1 各组Th1、Th2细胞比例比较(±s，%)

注:①与对照组比较，P ＜0.01。

组别 Th1/CD4+T细胞 Th2/CD4+T 细胞对照组5.98 ±3.981.02±0.53 PAF 组 21.4 ±8.25① 1.75 ±1.57 CAF 组 19.9 ±8.38①1.42±0.98

2.2 3组血浆IFN－γ、IL－4水平比较 PAF组和CAF组IFN－γ水平显著高于对照组(P均＜0.01);而PAF组和CAF组间比较无显著性差异;3组间IL－4水平比较无显著性差异(P均＞0.05)。见表2。

表23 组IFN－γ、IL－4水平比较(±s，ng/L)

表23 组IFN－γ、IL－4水平比较(±s，ng/L)

注:①与对照组比较，P ＜0.01。

组别 IFN－γIL－4对照组5.25 ±0.915.06 ±3.22PAF 组 7.23 ±1.36① 6.80 ±6.22CAF 组 6.64 ±0.65①6.30 ±4.58

3 讨论

房颤是临床常见的心律失常之一，它可以引起心功能不全、心肌病、血栓和栓塞事件的发生，严重威胁着人们的生命健康。近几年来，房颤的治疗已经取得了长足的进步，但房颤的发病机制仍未明确，并成为当前研究的热点。

流行病学、临床以及基础研究均提示炎症参与了房颤的发生、发展与复发[1－2]。炎症反应参与清除凋亡细胞，导致一氧化氮生成减少，促进心房肌细胞坏死、间质纤维化，电传导不均一，引起局部传导阻滞或折返，影响心肌细胞间信号的传导，最终导致解剖重构电生理重构，以及房颤的持续发生。效应性T细胞能够调节多种炎症反应，它分为Th1和Th2等亚群，Th1细胞主要表达IFN－γ、IL－2、IL－6、IL－12及 TNF－α等，可激活巨噬细胞并促进调理素和补体的产生，从而主要在细胞免疫中发挥重要作用。Th2细胞主要分泌IL－4、IL－5、IL－10及IL－13等特征性因子，主要在体液免疫中发挥作用。Th1细胞所分泌的IFN－γ可刺激自身增殖，形成自分泌环，Th2也可通过IL－4刺激自身增殖。二者通过分泌不同的细胞因子相互调节，Th1细胞分泌的IFN－γ可抑制Th2细胞分化，反之Th2细胞分泌的IL－4及IL－10可抑制Th1细胞分化。Th1及Th2细胞在免疫网络中发挥不同的生物学功能，一旦两者之间的平衡被破坏，就可能出现病理状态。

目前研究认为，动脉粥样硬化、高血压病所致靶器官损害及心肌重塑过程均与Th1/Th2失衡有关，Th1/Th2失衡可导致斑块不稳定[3]。在高血压病方面，血管紧张素Ⅱ水平较高的ApoE－/－高血压小鼠粥样斑块更不稳定，纤维帽更薄，脂质核心更大，有更多巨噬细胞和T淋巴细胞浸润，脾脏细胞流式分析显示Th1细胞优势明显，提示血管紧张素Ⅱ导致斑块不稳定的机制也与Th1/Th2失衡有关[4]。而在高血压所致的心脏ECM重塑的过程中，刺激Th1细胞增殖可降低心室顺应性及心排血量，Th1/Th2平衡可能通过影响胶原蛋白合成、降解及交联调控心脏ECM组成，从而影响心脏重塑过程及心室舒张功能[5]。在房颤方面，目前国内外证实Th1/Th2失衡与之相关的直接证据很少，但Th分泌的细胞因子如IL－2、IL－4、IL－6、TNF－α等均可影响房颤的发生发展过程。其中Th1分泌的IL－2、IFN－γ水平与冠状动脉旁路移植术(CABG)术后房颤的发生相关[6]，低IL－2水平是成功电转复的预测因素[7]。房颤患者IL－6水平较无房颤者高[8]，IL－6启动子基因多态性与术后房颤发生相关[9]，并且是电转复成功的预测因素[10]。Th2分泌的IL－10水平也与CABG术后房颤发生相关，且其基因多态性与孤立性房颤的发生相关[9]。由Th1/Th2失衡可加重高血压所致左室结构重塑推测，Th1/Th2失衡可能通过影响心房胶原蛋白合成、降解及交联过程，造成心房结构重塑[5]，而心房结构重塑是房颤发生及进展中重要组成部分，故Th1/Th2失衡可能通过影响多种炎症因子，造成细胞凋亡及电传导不均一，最终影响房颤的发生及发展。

本研究发现房颤患者的TH1细胞比例较对照组明显增加，Th2细胞比例无变化，血浆中IFN－γ水平显著升高，而IL－4水平无明显变化，IFN－γ与IL－4比值增大，表现为Th1型免疫反应亢进和Th1/Th2失衡，而阵发房颤和持续房颤相比无明显差异。由此进一步证实了笔者先前的推测，效应T细胞的失衡在某种程度上可能参与了房颤的发生发展，从而也进一步支持了房颤与炎症的关系，为临床上房颤患者炎症的干预性治疗提供了理论基础，今后，随着房颤发病机制研究的进一步深入，可能会给当前捉襟见肘的房颤药物治疗带来新的曙光。本研究虽然证实了效应性T细胞可能与房颤的发生、发展相关，但由于本研究经费有限，样本量较小，研究结果存在一定的局限性，本研究中阵发房颤和持续房颤相比无明显统计学差异，可能也与样本量较小有关，有待于今后进一步深入研究。

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