加替沙星中加替沙星的含量测定技术分析

李锴权

【摘要】 目的 测定注射用加替沙星中加替沙星的含量。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱柱为C18，ψ（乙腈∶甲醇∶醋酸-三乙胺缓冲液∶十二烷基磺酸钠）=30∶40∶30∶0.25 g为流动相。流速为1.0 mL/min，检测波长为290 nm。结果 加替沙星在8.05～161.0 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.9996），平均回收率为99.9%，RSD为0.4%。结论 本法准确、灵敏、可靠，能有效地控制该制剂的质量。

【关键词】 加替沙星 相高效液相色谱法

【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)06-0182-02

注射用加替沙星(gatifloxacin)为氟喹诺酮类抗菌药，具有抗菌谱广、抗菌作用强的特点。临床用于治疗由敏感细菌引起的呼吸道感染、急性副鼻窦炎、泌尿道感染、淋病。本文在文献的基础上建立了反相高效液相色谱法，具有操作简便，分离效果好、灵敏、准确等优点，可用于该产品的质量控制。

1仪器与试药

1.1仪器

Shimadzu Lc10A高效液相色谱仪（日本岛津），SPD5A紫外-可见分光光度检测器，OSDC18柱（大连仪器设备有限公司）。

1.2试药

加替沙星对照品（长沙市华美医药研究所提供），注射用加替沙星（海南三叶制药厂有限公司，批号为000402，000408，000412），乙腈、甲醇为色谱纯，冰醋酸、三乙胺、十二烷基磺酸钠为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件与系统适用性试验

以十八烷基硅烷合硅胶为填充剂，以ψ［乙腈∶甲醇∶醋酸三乙胺缓冲液（量取醋酸0.8 mL，三乙胺0.4 mL，加水稀释至500 mL，即得）∶十二烷基磺酸钠］=30∶40∶30∶0.25 g为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为290 nm；理论塔板数按加替沙星峰计算应不低于3 000，加替沙星与相邻主杂质峰的分离度应大于1.5。

2.2标准曲线

精密称取经105 ℃干燥至恒重的加替沙星对照品16.1 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取0.5、2.0、4.0、6.0、8.0 mL，分别置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，计算回归方程，得回归方程A=26812.9C＋133076.5，相关系数r=0.9996。结果表明加替沙星浓度在8.05～161.0 μg/mL范围内线性关系良好。

2.3回收率试验

取经105 ℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量，加入按处方比例的辅料，分别置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 mL，置10 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，代入标准曲线，按外标法计算回收率。

2.4稳定性试验

取回收率项下的溶液，置室温下放置2 d，分别于0、2、4、8、12、24 h分别取样测定，结果平均峰面积为1873108.8，RSD=1.9%，表明供试品溶液在室温下放置24 h稳定。

2.5精密度试验

精密称取经105 ℃干燥至恒重的加替沙星对照品33.4 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，搖匀，精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，重复测定6次，结果平均峰面积为1956241，RSD=0.48%，表明供试品含量测定方法精密度良好。

2.6供试品的测定

对照品溶液制备：精密称取经105 ℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量，加水溶解并稀释制成每1 mL中含80 μg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液制备：精密称取供试品适量（约相当于加替沙星80 mg），置100 mL量瓶中加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 mL，置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，按外标法以峰面积计算加替沙星含量。

HPLC法测定注射用加替沙星中加替沙星的含量取3批样品进行测定

3讨 论

采用反相高效液相色谱法测定注射用加替沙星的含量，经空白试验，结果表明空白辅料对测定结果无干扰。本方法灵敏度高，专属性强，线性关系良好，制备出来的溶液24 h内均稳定，回收率高，具有快速、简便、可靠的特点，可作为该制剂含量测定的检测方法。

参考文献

［1］中国药典(2000年版二部)［S］. 附录VD.436.

［2］黄其春.高效液相色谱荧光法测定加替沙星注射液的含量［J］.中国现代应用药学.2003,20(1):42.

［3］胡容峰，王剑，冯志英，等.HPLC法测定注射用加替沙星的含量［J］.中国新药杂志，2002,11(8):621.