乙肝病毒既往感染者血清HBV DNA检测

马士恒，李明

（河北大学附属医院感染性疾病科，河北 保定 071000）

乙肝病毒既往感染者血清HBV DNA检测

马士恒，李明

（河北大学附属医院感染性疾病科，河北 保定 071000）

目的 研究HBV既往感染者血清中HBV DNA。方法 从门诊健康体检者中筛选HBV既往感染者，应用PCR方法检测血清HBV DNA。结果 HBV既往感染者血清HBV DNA阳性率为3.39%，但较HBV携带者低，χ2=146.109，P=0.000。HBV既往感染者血清HBV DNA阳性者血清HBV DNA对数均值为3.93±0.90，明显低于HBV携带者，F=14.846，P=0.000。结论 部分HBV既往感染者体内仍有HBV低水平复制，其意义有待研究。

乙肝病毒；既往感染；HBV DNA；乙肝血清学标志物

乙型肝炎在中国是危害最大的传染病，人群的乙肝病毒（HBV）感染率曾超过50%。由于乙肝疫苗的广泛接种，感染率虽然有所下降，但大量的HBV既往感染者仍然存在。对HBV既往感染者血清HBV DNA进行检测，以明确既往感染者体内病毒复制情况。

1 材料和方法

1.1 研究对象

自2009年12月至2014年1月，从河北大学附属医院感染性疾病科门诊就诊进行乙肝五项健康查体者的人群中，筛选研究对象。研究对象分为观察组和对照组。观察组为HBV既往感染者，纳入标准：无乙型肝炎病史，无临床表现，肝功能正常；血清乙肝五项中，HBV表面抗原（HBsAg）阴性，HBV e抗原（HBeAg）阴性，HBV核心抗体（HBcAb）、e抗体（HBeAb）或表面抗体（HBsAb）至少有一项阳性，如HBsAb单独阳性需除外乙肝疫苗接种。对照组为HBV携带者，即血清HBsAg阳性，无临床表现，肝功能正常。

1.2 检测方法与试剂

乙肝五项检查采用时间分辨荧光免疫法检测，试剂盒由苏州新波公司生产。HBV DNA检测采用荧光定量PCR，试剂盒为上海科华公司生产，＞1 000拷贝/毫升为阳性。

1.3 统计分析

研究采用Excel表建立数据库，利用SPSS17.0软件进行数据分析处理。采用χ2检验比较不同组之间阳性率的差异，方差分析（ANOVA）比较均数之间差异是否有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV既往感染者HBV抗体及HBV DNA阳性情况

符合HBV既往感染标准的感染者共有177人。其中男性83例，女性94例。年龄5～76岁，平均（39.71±15.70）岁。HBV抗体及HBV DNA阳性情况见表1，抗体模式与付桂英等[1]研究相似。因阳性样本量较少，不同模式之间未进行统计学分析。对照组为同期进行查体时发现的HBV携带者，随机选择HBsAg及HBeAg均阳性的携带者30例，HBsAg阳性、HBeAg阴性携带者30例。

表1 177例HBV既往感染者HBV抗体及HBV DNA阳性情况

2.2 HBV既往感染者中HBV DNA阳性率

HBV既往感染者及HBV携带者中血清HBV DNA阳性率，3组比较，χ2=146.109，P=0.000；HBV既往感染组与HBsAg（+）HBeAg（-）组比较，χ2=67.364，P=0.000；HBV既往感染组与HBsAg（+）HBeAg（+）组比较，χ2=144.694，P=0.000。见表2。

表2 HBV既往感染者及HBV携带者血清HBV DNA阳性率比较

2.3 HBV既往感染者中HBV DNA水平

血清HBV DNA阳性HBV既往感染者及HBV携带者血清HBV DNA水平比较见表3。

表3 HBV既往感染者及HBV携带者血清HBV DNA水平比较

3 讨论

HBV感染人体后，会出现多种抗原，随着机体对病毒的不断清除，这些抗原的产生会逐渐减少，最后从血中消失，而其抗体随后会出现在血液中。这些抗体随时间的推移，也会逐渐减少，甚至消失。一般说HBcAb持续时间最长，常为终身[2]。因此，只要HBcAb、HBeAb或HBsAb有一项阳性，且目前无肝损害，无临床表现，即可认为是既往感染者。但如HBsAb单独阳性需除外乙肝疫苗接种。

HBV DNA是HBV的核酸成分，血清HBV DNA阳性是HBV存在并有复制的可靠指标。血清HBeAg（+）是病毒活跃复制的标志，HBeAg（+）者中血清HBV DNA阳性率高[3]。研究表明在HBV既往感染者中有3.39%仍有病毒复制，梁红、石伍华等[4-5]研究也曾得出过类似结果。结果也显示，HBV既往感染者血清HBV DNA阳性率明显低于HBeAg（+）组，也低于HBeAg（-）组。说明有病毒复制的既往感染者比例很低。关于不同感染模式的既往感染者的HBV DNA阳性率的差异，因阳性样本量太少，未能进行进一步的比较。以往认为随着HBV抗原的消失，HBsAb的出现，病毒复制就会停止。但随着检测水平的不断进步，敏感度不断提高，血中微量的病毒也能检测出来。HBV既往感染者原来不能检测出病毒，主要是检验敏感性不够所造成的。

研究也对血清HBV DNA阳性HBV既往感染者的复制程度与HBV携带者进行了比较，结果显示既往感染者中血清HBV DNA水平明显低于HBeAg（-）的携带者，更低于HBeAg（+）的携带者。结果说明，虽然HBV既往感染者有一部分仍有病毒复制，但其复制水平很低，传染性弱。有病毒复制的HBV既往感染者的转归有待进一步研究。

[1] 付桂英, 秦红, 杨丹丹, 等. 26217 例乙肝病毒血清标志物表达模式的探讨[J]. 中国卫生检验杂志, 2007, 17(5): 864-865.

[2] 何宗忠, 裘宇容. 乙型肝炎病毒生物标志物检测的研究进展[J]. 分子诊断与治疗杂志, 2009, 1(2): 136-138.

[3] 丁柳, 刘丽, 雷学忠, 等. 5600 例血清标本乙肝病毒 DNA 定量与免疫学标志物检测的对比分析[J]. 四川大学学报: 医学版, 2006, 37(2): 313-314.

[4] 梁红, 胡同平, 张文兰. 乙肝肝炎表面抗原阴性、核心抗体阳性样本的临床意义[J]. 现代预防医学, 2011, 38(15): 3048-3049.

[5] 石伍华, 王海清, 许艾明, 等. 荧光定量 PCR 检测 HBV-DNA 与 ELISA 方法测定乙肝五项指标相关性分析[J]. 临床和实验医学杂志, 2009, 8(1): 87-88.

（责任编辑：高艳华）

Detection of serum HBV DNA in past infection people of Hepatitis B virus

MA Shiheng, LI Ming
(Infectious Diseases Department, Affiliated Hospital of Hebei Univercity, Baoding 071000, China)

Objective To detect the serum HBV DNA in people infected previously. Methods Past HBV infection people were screened from physical examination persions in Out-patient department. The serum HBV DNA were detected by PCR. Results The positive rate of the serum HBV DNA in past HBV infection people was 3.39%. It was lower than in HBV carriers, χ2= 146.109, P=0.000. Logarithmic Mean of the serum HBV DNA in HBV DNA positive people of the past HBV infection was 3.93±0.90. It was lower than in HBV carriers, F=14.846, P=0.000. Conclusion There are low level HBV reproductions in some past HBV infection people. Its significance needs to study further.

Hepatitis B virus; Past infection; HBV DNA; Serum HBV markers

R51

A

1674-490X(2014)05-0013-03

2014-09-13

马士恒（1968— ），男，河北博野人，主任医师，硕士，主要从事感染性疾病的诊治及教学工作。E-mail: mashiheng@126.com