蛹虫草富锗胞外多糖对大鼠长期毒性研究

王菊凤，杨道德，李鹄鸣

（1.中南林业科技大学野生动植物保护研究所，湖南长沙 410004；2.吉首大学生物资源与环境科学学院，湖南吉首 416000）

蛹虫草（Cordycepsmilitaris）含有虫草多糖和虫草素等重要的生物活性成分，具有抗真菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、增强免疫力等多方面的药理作用［1-3］。有机锗是一种生物活性很高的物质，具有诱发自身干扰素，增加NK细胞活性，活化巨噬细胞，抗脂质过氧化，抗肿瘤，抗病毒，降血脂，清除自由基等多重医疗保健功能；同时对骨质疏松、高血压、糖尿病等也有一定疗效，含锗食物和药物被认为是治疗癌症和艾滋病的主要药品之一［4-8］。

药用真菌菌丝体对锗有较强的富集能力，可以使无机锗转化为有机锗，降低或消除其对机体的毒害作用，增加有机锗的利用率，提高锗的生物效应，同时增加菌丝体中有效活性成分的含量，更好地改善药用真菌的品质与保健功效。

本文利用蛹虫草富锗胞外多糖对大鼠进行了6个月连续给药试验，研究蛹虫草富锗胞外多糖对大鼠的长期毒性作用。

1 材料

1.1 实验药物 蛹虫草富锗胞外多糖，其中多糖含量为95%，锗含量为288×10-6。由湖南天国力生物工程有限公司提供。

1.2 实验动物 清洁级SD大鼠160只，平均体质量90～110 g，♀♂各半，由湖南农业大学动物科技学院实验动物养殖场提供。

1.3 饲养条件 每组分笼饲养。自由采食和饮水，室温20～25℃，湿度60% ～70%。换气次数12次/h，照度2 000 lux，氨气浓度20×10-6以下，噪音50分贝以下。

1.4 仪器 F-800全血细胞分析仪，日本东亚生产；自动生化分析仪，ACTOANALYSER，意大利生产。

2 方法

2.1 动物及分组 按体重将160只大鼠均分成4组（n＝40，♀♂各半）。第1组为对照组，给予蒸馏水20 ml·kg-1；第2、3、4组为蛹虫草富锗胞外多糖高、中、低剂量组。剂量分别为3.0、1.5和0.75 g·kg-1。相当于人用剂量的100、50和25倍。

2.2 药物配制和给药方法 取蛹虫草富锗胞外多糖内容物，用蒸馏水配成0.30、0.15和0.075 g/ml的混悬液，均按大鼠体重10 m l·kg-1灌胃给药，每天1次，连续给药26周，每周称体重1次，并调整给药量，同时计算摄食量。

2.3 实验方法 给药至第8周、第17周和第26周，于末次给药后24 h，每组活杀10只动物（先禁食6 h，♀♂各半），其余动物继续给药。各组动物处死时，取血做血液细胞学和生化指标检查，系统解剖，肉眼观察各脏器，并对主要脏器进行组织病理检查。第26周，即第3次活杀动物后，每组剩余的10只动物停止给药，继续观察2周后，再同法处理。

2.4 观察指标 主要从外观体征和行为活动、血液学指标、血液生化指标、尸解及组织学检查等几个方面进行观察检测。

2.5 统计学处理 实验统计数据以¯x±s表示，统计数据首先采用F检验，然后t检验。

3 结果

3.1 一般观察 实验期间，对照组与3个给药组大鼠行为活动正常，毛色光亮，紧贴其身，饮食、饮水、摄食量及二便均正常，眼、口及肛门等处无异常分泌物，体重正常增长，且♀♂3个给药组分别与对照组比较，差异无显著性（P＞0.05）。

3.2 血液细胞学指标 给药8周、17周、26周及恢复期结束大鼠血液细胞学检测，结果显示，高、中、低剂量组与同期对照组比较，差异无显著性（P＞0.05）。且各组所有指标均在动物血象正常值范围（Tab 1）。

3.3 血液生化学指标 给药8周、17周、26周及恢复期结束大鼠血液生化学检测，结果显示，高、中、低剂量组与同期对照组比较，天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、肌酐（Crea）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（T-CHO）、血糖（GLU）、总胆红素（T-BIL）的差异无显著性（P＞0.05）（数据略）。

3.4 病理解剖及组织学检查

3.4.1 脏器系数 给药8周、17周、26周及恢复期结束大鼠脏器系数检测，结果显示，高、中、低剂量组与同期对照组比较，差异无显著性（P＞0.05）（数据略）。

3.4.2 组织学检查 给药期大鼠解剖时经肉眼观察，各脏器均未见异常或病变。3个给药期大鼠心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、胰腺、胸腺、大脑、食道、胃、小肠、膀胱、睾丸、前列腺、子宫、卵巢等组织经病理切片检查，结果给药组和对照组大鼠相比较无异常或病变现象（数据略）。

Tab 1 Effect of germanium-enriched extracellular polysaccharide on blood cytology index of rats（±s，n＝10）

Tab 1 Effect of germanium-enriched extracellular polysaccharide on blood cytology index of rats（±s，n＝10）

Time Group RBC/×1012·L-1 HB/g·L-1 HCT/% PLT/×109·L-1 WBC/×109·L-1N/% L/% Clotting time/s Control 6.35±0.63 130.7±11.2 39.9±2.2 572.5±105.3 10.5±1.5 31.2±1.4 68.8±5.4 111.8±16.0 8 week High dose 6.44±0.54 129.1±9.4 39.9±3.8 567.7±142.0 10.7±1.7 32.0±4.2 68.0±4.2 115.5±13.6 Middle dose 6.35±0.68 131.0±10.8 40.1±3.0 546.9±106.3 10.8±1.1 30.1±4.7 69.9±4.7 119.0±10.9 Low dose 6.36±0.64 135.8±10.7 39.6±2.4 513.2±130.0 10.6±1.1 32.9±6.4 67.1±6.4 119.0±12.7 Control 6.49±0.72 128.2±10.4 38.8±2.6 540.6±100.6 10.7±1.6 31.4±5.1 68.6±5.1 112.1±14.3 17 week High dose 6.23±0.60 136.1±12.8 39.1±2.9 558.8±112.5 10.5±1.4 28.7±6.6 71.3±6.6 123.5±13.5 Middle dose 6.22±0.64 128.6±12.0 38.1±1.5 574.4±131.1 10.8±1.7 28.4±5.2 71.7±5.2 115.6±14.7 Low dose 6.41±0.73 134.4±8.8 38.6±2.8 551.0±112.4 11.0±1.7 31.1±6.9 68.9±6.9 115.2±10.4 Control 6.50±0.59 131.9±10.8 38.5±2.8 607.5±107.4 11.2±1.6 30.0±4.3 70.0±4.3 115.5±10.9 26 week High dose 6.38±0.62 136.0±10.8 39.1±3.2 566.4±110.3 10.9±1.5 28.2±4.7 71.8±4.7 119.2±12.5 Middle dose 6.44±0.64 130.1±9.7 40.1±3.7 519.9±116.2 11.1±1.8 30.8±5.5 69.2±5.5 112.7±13.5 Low dose 6.49±0.72 132.4±11.0 40.8±3.0 557.7±134.0 10.7±1.6 30.8±4.2 69.2±4.2 124.1±11.3 Control 6.51±0.66 133.4±11.3 41.7±2.6 526.7±127.8 10.8±1.3 30.4±6.1 69.6±6.1 120.7±13.4 Recovery High dose 6.69±0.75 132.5±10.4 40.5±2.4 521.6±119.7 11.1±1.6 28.4±7.3 71.6±7.3 115.1±11.4 Middle dose 6.61±0.69 132.3±10.6 41.1±2.7 562.9±130.5 10.4±1.2 33.1±4.8 66.9±4.8 117.0±14.0 Low dose 6.40±0.50 133.6±11.4 39.9±3.4 583.3±129.7 10.5±1.0 32.3±6.4 67.7±6.4 111.6±14.6

4 讨论

有研究表明，有机锗具有明显预防血糖升高的作用，并具有抗脑细胞老化、提高智商，以及增加抗氧自由基的能力。有机锗除了具有抗肿瘤、抗炎与免疫调节、抗病毒、抗衰老以及镇痛等作用以外，它还具有广谱抗癌、毒性极低、无骨髓毒性等优点，其本身无直接细胞毒性作用。

本项研究结果表明，蛹虫草富锗胞外多糖是一种无毒的有机锗。大鼠灌胃给药连续26周和恢复期，所有指标检查均未见异常，证实蛹虫草富锗胞外多糖无毒的特点。由此也证明了我们原来的推断是正确的，即从理论上来看，蛹虫草富锗胞外多糖与两个前体蛹虫草多糖和有机锗Ge-132相比较，蛹虫草富锗胞外多糖在毒副作用方面比有机锗进一步降低。因此，蛹虫草富锗胞外多糖在临床推荐用药剂量下使用是安全的，可以作为进一步开发药品和保健食品的原料。

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