不同色谱柱对麦白霉素片A系列组分及有关物质测定结果比较

吴群，刘映倩，沈丹丹，林昀

(重庆市食品药品检验所、重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121)

不同色谱柱对麦白霉素片A系列组分及有关物质测定结果比较

吴群，刘映倩，沈丹丹，林昀

(重庆市食品药品检验所、重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121)

目的 比较不同色谱柱对麦白霉素片组分及有关物质的测定结果。方法色谱柱为C18柱,以0.2 mol·L-1甲酸铵溶液(用三乙胺调节pH至7.6)-乙腈(62∶38)为流动相,柱温30℃,检测波长为232 nm,流速为1.5mL·min-1。结果采用不同色谱柱测定各厂家麦白霉素片组分及有关物质含量有很大差异。结论色谱柱对麦白霉素片组分及有关物质的质量控制有很大影响。

麦白霉素片；色谱柱；组分；有关物质

麦白霉素系大环内酯类抗生素,《中华人民共和国药典》2005年版首次将其收载,但由于缺乏必要的组分分析数据,仅采用高效液相色谱(HPLC)法控制其中麦迪霉素A1的含量不得低于35.0%［1］,但国产麦白霉素是以麦迪霉素A1和吉他霉素A6组分为主组分的多组分混合物,为了促进生产厂家改进工艺,提高活性组分的含量［2］,2010年版《中华人民共和国药典》增加了麦白霉素A1、A2与吉他霉素A4、A6、A8组分和有关物质的测定。由于不同色谱柱对各组分的分离情况不同,而影响了对组分和有关物质的测定结果。为此,笔者通过不同色谱柱对麦白霉素片组分和有关物质进行考察,筛选出适用于麦白霉素片分析的色谱柱。

1 仪器与试药

Agilent1100高效液相色谱仪和WatersE2695高效液相色谱仪,紫外检测器,麦白霉素标准品(中国食品药品检定研究院,批号:0341-9402,麦迪霉素A1含量49.0%)。5个厂家麦白霉素片分别用A、B、C、D、E表示。乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯。

2 色谱条件

色谱柱:①Agilent柱ZORBAX SB-C18,4.6 mm× 150 mm,5μm；②Agilent柱ZORBAX SB-C18,4.6 mm× 250 mm,5μm；③Agilent柱ZORBAX SB-C18,3 mm× 100 mm,3.5μm；④Thermo柱ODS HYPERSIL,4.6 mm× 250mm 5μm；⑤GRACE柱Alltima C18,4.6mm×150mm, 5μm；⑥Diamonsil C18,4.6 mm×150 mm,5μm；⑦Waters柱Sun Fire,4.6 mm×250 mm 5μm；⑧Phenomenex Luna 5u C18,4.6 mm×150 mm,5μm。

流动相:以0.2mol·L-1甲酸铵溶液(用三乙胺调节pH至7.6)-乙腈(62∶38),柱温30℃,检测波长为232 nm,流速为1.5 mL·min-1。麦白霉素色图谱见图1。

3 实验方法与结果

3.1 溶液的制备 对照品溶液:取麦白霉素对照品约20 mg,精密称定,置10 m L量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

供试品溶液:取供试品10片,精密称定,研细,精密称定适量(相当于麦白霉素20 mg),置10 mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

3.2 Agilent1100 高效液相色谱仪的实验结果 Agilent1100高效液相色谱仪采用色谱柱1,2,3,4,5,其他色谱条件不变,对照品图谱见图2,结果见表1～5。

图1 《中华人民共和国药典》2010年版HPLC方法分析麦白霉素的典型色谱图2.吉他霉素A8;4.吉他霉素A6;5.麦迪霉素A1;6.吉他霉素A4;8.麦迪霉素A2(1,3,7号峰未考察)

色谱柱1,2,5的色谱图峰形及分离情况较好,所测5个厂家麦白霉素片组分和有关物质的结果相差不大,能反映药品的真实质量。色谱柱3的色谱图中各组分不能得到有效分离,色谱柱4麦白霉素A1峰峰形不佳,色谱柱3,4所测5个厂家麦白霉素片组分和有关物质的结果相差较大。

3.3 WatersE2695 高效液相色谱仪的实验结果 WatersE2695高效液相色谱仪采用色谱柱6,7,8,其他色谱条件不变,对照品图谱见图3及结果见表6～8。

色谱柱6,8的色谱图峰形及分离情况较好,所测5个厂家麦白霉素片组分和有关物质的结果与色谱柱1,2,5测定结果相似,能反映药品的真实质量。色谱柱7的色谱图中由于A6峰完全不能分离,导致其A6组分含量偏高。

4 讨论

图2 5种色谱柱分析所得的对照品色谱图a.色谱柱1;b.色谱柱2;c.色谱柱3;d.色谱柱4;e.色谱柱5

表1 色谱柱1组分及有关物质测定结果 %

表2 色谱柱2组分及有关物质测定结果 %

表3 色谱柱3组分及有关物质测定结果 %

表4 色谱柱4组分及有关物质测定结果 %

表5 色谱柱5组分及有关物质测定结果 %

2010年版《中华人民共和国药典》的麦白霉素及其制剂均已增加了组分及有关物质检查。但由于其标准中没有规定色谱柱种类,在系统适应性实验中也没有规定各组分峰的分离度,使得有些生产厂家在质量控制的时候,选用峰形或分离效果不好的色谱柱进行实验,使得组分结果虚高,在生产过程中降低主药的投料,从而影响药品的质量。为此笔者才考察了不同色谱柱对麦白霉素片组分及有关物质的测定情况,结果显示色谱柱1,2,5,6,8对麦白霉素各组分均能较好的分离且峰形较好,所测5个厂家麦白霉素片各组分和有关物质的结果基本一致,适用于麦白霉素片的质量控制。

图3 3种色谱柱分析所得的对照品色谱图a.色谱柱6;b.色谱柱7;c.色谱柱8

表6 色谱柱6组分及有关物质测定结果 %

表7 色谱柱7组分及有关物质测定结果 %

表8 色谱柱8组分及有关物质测定结果 %

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:303.

［2］杨亚莉,李娅萍,文玉辉,等.麦白霉素的组分分析与质量控制[J].药物分析杂志,2008,28(3):341-344.

DOI 10.3870/yydb.2014.01.030

R978;R927.2

A

1004-0781(2014)01-0102-04

2013-01-15

2013-05-23

吴群(1979-),女,重庆人,主管药师,学士,研究方向:抗菌药物质量标准。电话：023-86072730,E-mail：920817428@qq.com。