芪芝甘草饮对蛋鸡禽流感疫苗免疫效果的影响

刘琳琳 王 会 （山东省枣庄市畜牧兽医局 277800）

芪芝甘草饮对蛋鸡禽流感疫苗免疫效果的影响

刘琳琳 王 会 （山东省枣庄市畜牧兽医局 277800）

为了解芪芝甘草饮对蛋鸡免疫机能的影响。将400只蛋雏鸡随机分为2组，每组200只，A组为对照组；B组为芪芝甘草饮组，在饮水中加入300mg/kg的芪芝甘草饮，在每次接种H5N1禽流感双价苗前后连续饮用7d。之后定期随机采血检测禽流感免疫抗体、淋巴细胞转化能力、血清IgG含量，并测其脾脏指数、法氏囊指数。结果显示，与对照组相比试验组的各项指标均差异显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)，表明自主研制的中草药制剂芪芝甘草饮对蛋鸡机体细胞免疫和体液免疫有显著增强作用。

芪芝甘草饮 蛋鸡 免疫增强

近年来，大量的研究证实，许多中草药及其复方制剂都具有增强畜禽的免疫力，提高抗病能力，进而促进生长、提高生产性能，改善畜产品品质的作用。而且它们作用广泛、毒副作用小、无抗药性、无药物残留，没有化学药物及抗生素的多种弊端，在畜禽养殖业上的应用日趋广泛。本试验以蛋鸡为研究对象，探讨自主研制的中草药制剂芪芝甘草饮对蛋鸡免疫机能的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料 电子天平(瑞士梅特勒-托利多)、离心机(上海安亭科学仪器厂)、恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)、微量振荡器(广州仪科实验技术有限公司)、微量移液器等(美国THERMO热电)。

1.2 中草药配方 芪芝甘草饮含有党参、当归、柴胡、甘草、黄芪多糖和云芝多糖等多种有增强免疫作用的中草药。

1.3 试验动物及分组 1日龄健康非免疫蛋鸡400只(购自枣庄市孟庄镇某鸡场)随机分成2组，每组200只。A组为对照组，B组为芪芝甘草饮试验组，即饮水中加入终浓度为300mg/kg的芪芝甘草饮，在每次免疫前后加入饮水中连续饮用7d。2组均饲喂相同日粮，采用舍内笼养，自由采食、自由饮水。分别于20、50、110日龄3次免疫H5N1禽流感双价苗。

1.4 检测指标 在实验开始后定期采血检测禽流感免疫抗体、淋巴细胞转化能力、血清IgG含量，并宰杀后，称其脾脏、法氏囊重量。

1.5 数据统计 试验数据采用SPSS 19.0中的单因素方法进行统计分析，用Dun-can法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 禽流感免疫抗体的跟踪检测 经统计，禽流感H5N1 Re-4株抗体滴度在35d以前，试验组与对照组之间无明显差异(P＞0.05)；自42d开始抗体水平出现与对照组不同程度的差异；85d以后均差异极显著(P＜0.01)。可见芪芝甘草饮能显著提高蛋鸡禽流感免疫抗体水平(图1)。

图1 禽流感Re-4免疫抗体变化折线图

2.2 血清中IgG含量 所有动物都有IgG、IgM、IgA[1]，其中IgG能调理、凝集和沉淀抗原，在体液免疫中最为重要。由表1可知，芪芝甘草饮能高效提高血清IgG含量。试验组血清IgG含量在14d和21d时与对照组相比均差异不显著(P＞0.05)；在28d～42d极显著高于对照组(P＜0.01)。

表1 血清中IgG的比较 (mg/ml)

2.3 外周血淋巴细胞转化能力 由表2可见，淋巴细胞转化能力在第14d和21d时，试验组与对照组之间无明显差异(P＞0.05)；第28d时试验组与对照组差异显著(P＜0.05)；而到第35d和42d时2组之间差异极显著(P＜0.01)。说明芪芝甘草饮能增强淋巴细胞的增殖分化能力。

表2 淋巴细胞OD570转化试验的比较

表3 免疫器官指数的比较(x±S) (mg/g)

表3 免疫器官指数的比较(x±S) (mg/g)

项目 日龄 A组 B组14 1.36±0.12 1.48±0.09脾脏21 1.55±0.09 1.64±0.14 28 1.71±0.08a 1.86±0.08b35 1.87±0.05A 2.09±0.08B42 1.99±0.11A 2.22±0.14B14 2.52±0.07 2.45±0.09法氏囊(mg/g) 21 2.96±0.11 2.94±0.07 28 3.19±0.09a 3.42±0.13b35 3.34±0.07A 3.58±0.09B42 3.42±0.08A 3.70±0.09B

2.4 免疫器官指数 由表3可见，脾脏指数与法氏囊指数在14d和21d，试验组和对照组差异不显著(P＞0.05)；在28d时差异显著(P＜0.05)；在35d和42d时差异极显著(P＜0.01)。因此，芪芝甘草饮对蛋鸡脾脏及法氏囊均有显著促生长作用。

3 讨论

（1）对禽流感抗体跟踪检测结果显示，到250日龄时，对照组抗体水平已降至3.6log2，低于免疫保护的最低限4log2，说明超出疫苗免疫保护期，而此时试验组的抗体滴度仍在6log2左右，仍可为鸡群提供有效免疫保护。由此可以合理推测，―芪芝甘草饮”一定程度上可以延长疫苗的免疫保护期。（2）免疫器官指数是反映免疫器官的发育程度，间接指示机体的免疫状态[2]的指标。试验结果表明，饮用―芪芝甘草饮”后，28日龄的脾脏指数，法氏囊指数两组差异显著(P＜0.05)；在35d和42d时差异极显著(P＜0.01)。说明―芪芝甘草饮”可以促进蛋鸡免疫器官的发育。同时，脾脏和法氏囊都是B淋巴细胞增殖分化的主要基地，脏器指数的增加，促使B淋巴细胞的数量增加，致使抗体水平明显提高。因此，淋巴细胞转化率及抗体水平的提高，均与芪芝甘草饮具有促进法氏囊及脾脏的生长发育具有密切关系。另有研究认为，中草药提高动物生长性能的作用可能也与其能够促进免疫器官发育有密切关系[3]。（3）淋巴细胞转化率是评价机体细胞免疫功能的一个重要指标，转化率高低反映机体的细胞免疫水平[4]。试验结果表明，淋巴细胞转化能力在第14d和21d时，2组之间无明显差异(P＞0.05)，第28d时差异显著(P＜0.05)；而到第35d和42d时两组之间差异极显著(P＜0.01)。说明―芪芝甘草饮”可显著刺激外周血淋巴细胞增殖，从而增强蛋鸡细胞免疫功能。（4）芪芝甘草饮是一种纯中药绿色汤剂，短期使用可高效提高蛋鸡的免疫机能，而且加入饮水中饮用方便。另外，由于中草药源自天然，毒副作用小、无抗药性，防治疾病的同时，又可避免药物残留，还能生产出安全、绿色的禽蛋产品，这对动物疫病防控乃至整个畜牧业发展都是一举多得并具有深远的意义的。

[1] 杜念兴. 兽医免疫学(第2版)[M]. 北京: 中国农业出版社. 1998.

[2] 王书全, 王晓玉. 左旋咪唑对鸡新城疫La Sota疫苗免疫效果的影响[J]. 中国家禽, 2010, 32(19): 31-33.

[3] Kujimura K.Protective effect of astragali radix.by intraperitoneal injection against Japanese encephalitis virus infection in mice[J]. BioPharmBull, 1996, 19(6): 805-810.

[4] 常凯, 马凤龙, 单虎. 重组鸡α-干扰素对鸡免疫功能的影响[J]. 中国农业通报, 2009, 25(14): 15-17.

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