犬乳腺癌的病理组织学分析

侯相山 （山东省东营职业学院生物与生态工程学院 257091）

犬乳腺癌的病理组织学分析

侯相山 （山东省东营职业学院生物与生态工程学院 257091）

通过对病犬肿瘤的病理组织学检查来确定肿瘤的性质、癌巢结构、肿瘤细胞的形态(异型性)，恶性程度等。探讨用犬来作为研究乳腺肿瘤的模型对以后研究新的治疗方案的意义。利用苏木素-伊红(HE)染色与过碘酸Schiff氏液(PAS)染色，在光学显微镜下进行观察。发现该病犬患有乳腺癌(碰撞癌)、硬癌。根据病理切片和相关资料分析此病犬肿瘤为腺癌、鳞状上皮癌、鳞化腺癌、软骨瘤等所组成的混合瘤，且其恶性程度较高，与人类及其它哺乳动物乳腺肿瘤有较大的差异。

乳腺癌 混合瘤 犬

乳腺癌是兽医临床上犬常发的恶性肿瘤，母犬乳腺瘤发病率约占全部肿瘤性疾病25%～42%，这种疾病在公犬很少发病(低于3%)[1]。乳腺恶性肿瘤(癌)是犬死亡的重要原因，犬乳腺肿瘤形态多种多样，在不同个体的肿瘤之间或同一个体肿瘤标本的形态学特征相差很大，即使在同一切片标本上，也可同时表现为乳头状、管状和髓样癌，肌上皮增生和软骨形成等[2-3]。根据不同的统计数据，母犬一生当中发生这种肿瘤的几率从2%～20%不等，而发生良性乳腺肿瘤的几率则会高出2～5倍。最近有两个大样本统计的有关发病率的报告发表，一个报告是对英国的病例进行统计，其报道的发病率为每年每10万只犬中有205只会发生乳腺肿瘤，第二个报告则对瑞典有保险的8万只母犬进行了母犬进行了统计，发现每年每1万只犬中有111只会发生乳腺肿瘤。良性和恶性乳腺肿瘤在犬的某个特定种群中的发病率和犬的预期寿命有关，而且如果犬在年轻的时候进行过子宫卵巢摘除手术，发病率能够大大降低。如果犬曾经使用过孕激素防止发情，则乳腺肿瘤的发生几率会进一步升高。

最近几十年对人类乳腺肿瘤的研究和报道比较多，但仍有许多问题没有解决，尽管已经在裸鼠上建立人类的伴侣动物犬分享着人类生活得很多方面，如在与人相同的环境中，接触的致癌物了人乳腺肿瘤的模型，但是犬是一类患自发性乳腺肿瘤几率较高的动物(啮齿类动物除外)，并且作为质与人类也极其相近，经研究已表明，犬恶性乳腺癌的发病率比女性还要高[4-5]。随着医学的发展，对犬常见肿瘤的形态学、组织学和临床特征已有相当的了解，根据病史，临床症状组织学检查，可确诊常见表在性肿瘤，有条件时配合X线检查，超声检查，免疫诊断和放射性同位素标记，则更利于诊断，但许多肿瘤特别是恶性肿瘤则常在手术切除后经组织学检查后才得以确诊[6]。对犬的肿瘤往往采取手术切除方法进行治疗，有时也采取冷冻疗法和放射线疗法。

此次观察与研究分析，是对2000年5月24日黑龙江省双鸭山市兴达畜禽疾病研究所送检的一条杂种犬的乳腺肿瘤组织做病理学观察与回顾性病理学分析。根据提供的犬乳腺肿瘤组织进行了病理组织学与组织化学检查，在HE、PAS染色，借助显微镜观察发现，该病犬乳腺癌组织中同时存在腺癌、鳞状上皮癌、鳞化腺癌、软骨瘤等。肿瘤组织异型性大，肿瘤细胞形态也呈现多样性，细胞核分裂相多见，多种癌与瘤变组织构成的混合瘤，恶化程度极高。此种病例在兽医临床中报道较少，对肿瘤病理学学、比较病理学、兽医临床病理学研究有很大的临床参考价值。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 肿瘤组织 三块犬乳腺肿瘤组织由双鸭山市兴达畜禽疾病研究所提供，病犬，雌性，5岁半。

1.1.2 染色材料 10%的福尔马林、石蜡、甲醛、饱和碳酸锂、伊红、苏木素、蒸馏水、70%酒精、75%酒精、80%酒精、85%酒精、90%酒精、95%酒精、无水乙醇、二甲苯、中性树胶。过碘酸(HIO4.2H2O)、醋酸钠、碱性品红、盐酸、偏重硫酸钠、Schiff氏液、纯酒精、蒸馏水。莱卡切片机、恒温箱、干燥箱、湿盒、Leitz光学显微镜。

1.2 试验方法

1.2.1 HE染色 病理组织切片的制备与HE染色按龚志锦、詹容洲主编《病理组织制片和染色技术》所叙方法进行[7]。

1.2.2 PAS染色 将切片放入0.5%～1%高碘酸氧化20min，schiff氏液避光染色1h，0.5%偏重亚硫酸钠浸洗，Harris苏木精染色15min，自来水冲洗1～2min，1%盐酸酒精分化1min，1%氨水返蓝5min,自来水冲洗15min，待干。脱水、透明和封固同HE染色法。

2 结果

2.1 临床检查与处理

该犬为杂种犬，雌性，5岁半，肩高0.5m，体重35kg，毛色灰黑。据畜主叙述，从发现至就诊已半个月。该患犬腹下最后一对乳房皮下触诊有马铃薯状瘤样物。即左侧乳头皮下，有长约14.5cm，横径约8.5cm瘤样物，表皮紧绷，瘤体凸凹不平，近地面有直径1.5cm擦伤，瘤样物触诊坚硬，右侧乳头皮下有直径为3cm 扣状瘤样物，表面不平、坚硬。该瘤样物生长极快，其余未见异常。畜主要求给犬进行手术，对肿物做病理学检查。

经手术钝性剥离瘤样物，切面可见明显包膜。左侧长14cm，横径8cm大型瘤样物一个，蚕豆状瘤样物2个，米粒大硬结(怀疑是肿瘤)6个，全部摘除。右侧有3cm直径瘤样物一个，米粒大瘤2个，全部摘除，摘除的瘤样物，灰白色，击之有声，坚硬如石，刀切有痕，切角有浅粉色大理石花纹。临床摘除后，创处皮肤袋状松弛，并有渗出，顺创梭形切除皮肤，结节缝合，引流。由于畜主未带其复诊，故预后不详。

2.2 组织学观察

2.2.1 HE染色组织学观察 常规HE染色观察，乳腺瘤样物中乳腺正常结构完全被破坏。其中有大小不同形态各异的癌灶。有的癌巢呈块状、菊花状、腺管状、筛状、团块状、小梁状排列，无包膜。有的癌巢呈类似胶样物质结构的癌细胞团存在，周围绕以大量结缔纤维，有的有成片粉红色细胞角化灶。间质纤维结缔组织广泛增生，有平滑肌纤维存在。肿瘤细胞在各个时期呈现不同形态，圆形、椭圆形、梭形、三角形、腺管管腔上皮细胞由单层变为复层，向管腔内突起生长，越往管腔中心，肿瘤细胞越大，胞浆越丰富，核越大，核分裂相多见，有的肿瘤细胞核发生颗粒变性和空泡变性。间质纤维细胞变大，胞浆丰富，核变大，肌纤维细胞呈椭圆形，有的发生颗粒变性，核内有两核仁或多核仁现象，可见核分裂相，癌巢周围未见炎性细胞浸润。有髓样癌灶，癌灶内的癌细胞密集，纤维很少，并有大量淋巴样细胞。

图1 狗乳腺癌癌灶呈块状、菊花状、腺管状、筛状 HE 10×

图2 癌灶呈类似软骨样结构。有包膜。纤维组织增生HE 33×

图3 部分癌巢中心部分呈粉红色细胞角化灶HE 10×

图4 肿瘤细胞呈圆形、椭圆形、梭形、三角形HE 25×

图5 狗乳腺癌成片粉红色细胞角化灶 HE 10×

图6 狗乳腺癌肿瘤细胞呈圆形、椭圆形、梭形、三角形 HE 25×

图7 疑似髓样癌

图8 软骨瘤大量结缔组织

图9 软骨瘤

图10 软骨瘤

图11 鳞化腺癌, 共壁现象

图12 低分化腺癌的髓样癌，癌细胞紧密排列，多边形，胞浆咯嗜碱性，核仁明显，排列成片状。间质结缔组织少，其内大量淋巴细胞浸润。

图13 鳞化腺癌，边缘癌细胞已鳞状化生。

图14 癌巢小而少，间质结缔组织多的硬癌

2.2.2 PAS染色组织学检查 PAS染色组织学检查呈阴性，其组织形态类似骨样组织物质，淡染，可见肿瘤细胞核呈桔黄色。间质组织中纤维极其丰富明显。

图15 狗乳腺癌 PAS 33×

图16 狗乳腺癌 PAS 132×

3 讨论与结论

（1）病料组织块中腺管上皮细胞发生癌变，形成腺癌。部分腺癌中发生角化，出现角化珠，这是上皮组织鳞状癌的特征[8]。部分软骨瘤被周围的腺癌包围形成较复杂的结构，并且其癌细胞及细胞核异型性极强，核分裂相多见。还有的形成纤维肉瘤，部分发生骨化。癌巢中有高分化鳞化腺癌。有的癌细胞或癌细胞片块密集，纤维很少，常有大量淋巴细胞浸润，疑似髓样癌。PAS染色组织学检查呈阴性，这就排除了粘液瘤的可能。（2）乳腺肿瘤是母犬最常见的一类疾病，美国的一项调查发现，犬乳腺肿瘤占所有犬肿瘤发生率的52%，且41%～53%乳腺肿瘤为恶性的，科学家认为，研究这些肿瘤与种属之间有很大的相关性，也有学者认为各种环境因素和遗传因素影响犬乳腺肿瘤的发生[9]。而这些对人类肿瘤的研究都能够有所启发。而本文此病犬的肿瘤充分体现了犬乳腺肿瘤的特点，其恶性程度极高，且结构复杂，是多种癌变混合在一起的肿瘤结构。相对与人类的乳腺肿瘤有较大的差异。据很多资料表明，犬恶性肿瘤大多为混合瘤[10]，而人类的乳腺肿瘤的类型虽然很多，但很少见类似犬肿瘤这种混合性极强的现象。因此是什么原因导致犬乳腺肿瘤如此高的恶性程度，还有如此多样化的癌巢结构，都有待将来的进一步研究。（3）该犬患有乳腺癌，且该癌巢为乳腺腺癌、高度分化鳞化腺癌与鳞状上皮癌、软骨瘤所混合在一起的混合癌(碰撞癌)、硬癌。

本研究将会对治疗人类乳腺肿瘤提供理论依据，对战胜人类恶性肿瘤提供独特的帮助，所以将来用犬来作为研究乳腺肿瘤的模型对以后研究人类乳腺肿瘤新的治疗方案有重要意义。

[1] Dorn C R, Taylor D O N, Schneider R, et al. Survey of animal neoplasms in alamcda and contra costa counties,california: II. Cancer morbidity in dogs and cats from Alameda country[J]. Natl Cancer Inst, 1968, 40:307 18.

[2] Thomas Carlye Jones, Ronald Duncan Hunt. Veterinary Pathology[M]. 5ed.Philadelphia: Lea&Febiger, 1983: 1550-1560.

[3] D E Bostock. Canine and feline mammary neoplasms[J]. Br Vet J，1986, 142: 506-515.

[4] Brooks H L.Mandava N. Pizzi W F Inflammatory breast carcinoma; a community hospital experience, 1998, 453-467.

[5] Levine P H.Steinhorn S C.Ries L G Inflammatory breast cancer-the experience of the Surveilance, Epidemiology, and End Results, 1985, 1453-1463.

[6] 赵德明. 兽医病理学[M]. 北京: 中国农业出版社, 2005-3, 141.

[7] 龚志锦, 詹容洲. 病理组织制片和染色技术[M]. 上海: 上海科技技术出版社, 1994.

[8] 天津市人民医院, 肿瘤病理诊断图谱[M]. 天津: 天津人民出版社, 2003.

[9] 姚静, 芮荣, 侯加法. 犬猫乳腺肿瘤的诊断与治疗[J]. 畜牧与兽医, 2004, 36(1): 36-37.

[10] Mulligan, R. M. AmJ Vet Res, 1975, 36(9): 1391-1396.

S858.292

A

1007-1733(2014)06-0007-03

2014–02–25）