糖尿病患者血清中游离脂肪酸的水平分析

周壮海

【摘要】 目的：探讨型糖尿病（ T2DM）患者血清游离脂肪酸（NEFA）和脂蛋白（a）（Lp（a））的水平变化及其与糖尿病的关系。方法：对50例T2DM患者和50例健康体检者进行血清NEFA、TG及Lp（a）的检测并进行比较。结果：T2 DM患者血清NEFA、TG及Lp（a）的水平明显高于正常对照组（P<0.01）。结论：T2 DM患者血清NEFA及Lp（a）水平测定可作为糖尿病病情控制良好与否及监测并发症的参考指标。

【关键词】 糖尿病；游离脂肪酸；健康人群

【中图分类号】R722.12

【文献标识码】B

【文章编号】1671- 0061（2014） 12 - 00048 - 02

随着人们生活水平的提高和生活方式的改变，糖尿病的发病率越来越高。糖尿病是人类最常见的代谢性疾病，不仅表现为高血糖，脂代谢异常也是其常见表现。血清中游离脂肪酸（ FFA）的增加不仅参与了胰岛素抵抗的发生，同时也有损害胰岛B细胞分泌胰岛素的功能和导致胰岛细胞凋亡的作用，与型糖尿病发病密切相关。本文通过比较健康人与型糖尿病患者血清游离脂肪酸（ NEFA）和脂蛋白（a）（Lp（a））的水平变化及其与糖尿病的关系。

本文对50例T2DM患者血清NEFA及Lp（a）水平进行回顾性分析并与健康人进行比较，探讨其与T2DM的关系。

1.资料与方法

1.1.一般资料根据2007年版《中国2型糖尿病防治指南》的诊断标准，选择2013年12月至2014年6月在我院住院的50例T2DM患者，其中男38例，女12例，年龄35-76岁，平均（61. 12±10.65）岁；同时选择50例健康体检者作为正常对照组，年龄38～75岁，平均（58.78 ±9.75）岁，排除高血压、冠心病、糖尿病、肝肾疾病及血液病等。

1.2.仪器、试剂与方法NEFA测定采用酶法，试剂由积水医疗株式会社提供。TG测定采用比色法，试剂由德国罗氏诊断有限公司提供。Lp（a）测定采用免疫比浊法，试剂由上海北加生化试剂有限公司提供。仪器为日立7600全自动生化分析仪。标本采集：被检者空腹12 h后于次日晨采集静脉血2 ml，分离血清待检。

1.3.分析方法（1）、仪器与试剂1100型HPLC仪配四元梯度泵（Agilent公司），荧光检测器，100位自动进样器，Elipse XDB - C8色谱柱，AETS（自制），DMF（减压蒸馏后使用），四种脂肪酸标准样品（上海试剂厂），乙腈为光谱纯，其余试剂均为分析纯，水为去离子水（2）、色谱条件色谱柱：EclipseXDB - C8色谱柱（4.6mm*150mm，5um）流动相：A：20%乙腈水溶液B：100%的乙腈流速：1.Oml/min柱温：30℃。激发波长：404nm，发射波长：440nm梯度洗脱：15%B20min线性梯度到25%B，50min线性梯度到100%B，之后再运行15min。（3）、血清预处理及分析取样本血清100μl，加入盛有lOmg无水K2 C03催化剂的2ml安培瓶中，再依次加入180μIN-N二甲基甲酰胺（DMF），120μl荧光衍生化试剂吖啶酮。

1.4.分析方法验证。分别取空白血清6份各100μl按照“血清预处理”项方法操作，不加内标，进样10μl分析，得色谱图A；取空白血清100μl，分别加入十四酸、油酸、亚油酸标准溶液100μl（125μmnol？L-1）、内标正十七酸100μl（125 μmol？L-l），依同法操作，得色谱图B；取样本血清100μl，加入内标正十七酸100μl（125μmol？L-1），依同法操作，得色谱图C。比较A、B、C色谱图中各FFA和内标物的出峰时间，计算RSD，确定有无杂质的干扰。取高、中、低3个浓度（分别为20、100、300μnol？L-1）的正十四酸溶液，每个浓度连续进样5次，连续进样3个分析批，获得测定结果的平均值和批间RSD，验证相关数据是否符合要求。取高、中、低3个浓度的正十四酸标准溶液；在一45℃下分别放置ld、2d、4d、8d，重复测定三次以上。与新配置的标准正十四酸在相同条件下的测定值比较。

1.5.统计学方法运用SPSS 13.O统计软件。检测数据均以均数±标准差（ +s）表示，两样本均数比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

T2DM患者和正常对照组血清NEFA、TG及Lp（a）的检测结果：T2 DM患者血清NEFA、TG及Lp（a）的水平明显高于正常对照组（P

3.讨论

NEFA是血清中未与甘油、胆固醇等酯化的脂肪酸，在血清中长链的脂肪酸与白蛋白结合而成可溶状态，短链脂肪酸具有较大的水溶性，可以以解离的形式存在，或以阴离子的形式存在。其来源主要由贮存于脂肪组织中的TG被分解释放人血。正常情况下血清中NEFA含量极少，仅占总脂肪酸的5%一10%，主要与血清蛋白结合转运到全身组织利用。NEFA有很强的细胞毒性，可损害细胞膜、线粒体和溶酶体膜等，引起细胞内微器损害，而且能增强细胞因子毒性，在许多疾病的病理生理中起重要作用。高浓度的NEFA可以通过多种途径影响胰岛素的作用及葡萄糖代谢，与胰岛素抵抗的发生有着密切的关系。NEFA通过抑制葡萄糖氧化、抑制糖原合成，促进糖异生，影响胰岛素的分泌和信号转导、影响细胞的凋亡等造成IR。

目前已有充分证据表明：血清中酯类水平的升高（主要是NEFA和TG）是导致IR的重要原因。本研究结果显示，T2DM患者血清NEFA水平明显升高，与正常对照组比较有显著性差异（P<0.Ol）。说明T2DM患者存在脂代谢紊乱。还有研究表明，在T2DM中，血脂各项指标差异不明显，NEFA和葡萄糖的变化相一致，在反应机体脂代谢异常情况方面NEFA的变化要比甘油三酯和胆固醇的变化更敏感，因而可以把NEFA作为除葡萄糖之外另一个反映糖尿病的敏感指标，定期检测NE-FA水平，了解血脂水平，对T2DM的治疗有重要意义，可作为糖尿病病情控制良好与否的参考指标。

本文结果显示糖尿病患者血清Lp（a）水平明显高于正常对照组。Lp（a）是一种由肝脏合成的独立的脂蛋白，与其他脂蛋白无相关性，肾脏是主要代谢场所，在血清中的浓度主要由遗传决定，几乎不受饮食、年龄、性别等因素影响，在个体中相对稳定，男女间无显著差异。Lp（a）的升高被认为是动脉粥样硬化的一个相对独立的危险因子，与动脉粥样硬化的展有密切关系。而微血管病变是糖尿病患者严重的并发症，Lp（a）的升高会促进血栓形成，加重肾小球基底膜的损害，促进肾小球硬化，加重肾损害甚至形成恶性循环，因此有效控制Lp（a）的水平对延缓糖尿病并发症的发生、发展有重要意义。

综上所述，糖尿病患者会有明显的脂代谢异常，其在糖尿病并发症的发生、发展中有重要作用，NEFA水平可作为糖尿病病情控制良好与否的参考指标，Lp（a）的水平可作为监测糖尿病并发症的参考指标，定期检测其水平对糖尿病的早期诊断和防治具有现实的指导意义和临床应用价值。

参考文献

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