‘野酿2号’两性花毛葡萄品种综合育苗技术

赵明　牟海飞　吕朝安　王趣有　林茜　邹瑜　吴代东　林贵美　韦绍龙

摘要：为解决毛葡萄利用传统硬枝扦插及嫁接的繁殖方法成活率低的问题，项目组通过不断的实践和改进，利用组培快繁结合苗圃育苗技术形成了完整的‘野酿2号两性花毛葡萄种苗繁育体系，本研究从组培苗培育、组培沙床假植一嫩枝沙床扦插假植一生根苗营养杯假植三步假植育苗法、假植施肥、假植病虫害防治管理4个方面阐述了‘野酿2号两性花毛葡萄育苗的综合技术，利用本技术，可在短期内大量生产、供应优质健康种苗，提高毛葡萄生产的经济效益。

关键词：野酿2号；两性花毛葡萄；育苗

中图分类号：S663.1

文献标志码：A

论文编号：2013-0837

0 引言

广西具有独特的喀斯特地貌地质特点，以及典型的气候环境，蕴藏着丰富的野生葡萄资源。毛葡萄是其中蕴藏量最大的一个种，主要分布于桂中、桂西、桂北等岩溶石山地区。野生毛葡萄鲜果具有出汁率高、含酸量高、含糖量低、果皮厚、单宁多、色素浓、香气独特等特点，含多种维生素、矿物质、及丰富的氨基酸，还含有花色素双糖苷、超氧化歧化酶（SOD）及白藜芦醇（RES），利用野生毛葡萄浆果加工酿造出的葡萄酒，有益于预防心脏血管疾病、调节人体免疫系统、降低疾病发生率，深受消费者喜爱，市场供不应求。近年来，野生毛葡萄酒的认识度以及知名度不断提高，原料需求量也逐年增加，推动了毛葡萄从野生转为人工种植，广西多地利用石山坡地建立了毛葡萄原料生产基地。优良的毛葡萄品种及健康的种苗来源成为当前人工种植亟待解决的主要问题，项目组经过多年努力成功选育出了‘野酿2号两性花野生毛葡萄品种，该品种的选育成功使野生毛葡萄进入了真正意义上的人工驯化栽培阶段，对毛葡萄产业的健康发展意义重大，该品种白花授粉不受天气因素影响，果实品质佳，是稳产高产的保证，生产上正逐步取代原来推广种植的‘野酿1号单性花品种。果农利用种子、扦插、嫁接等传统的繁殖方法进行育苗，出现较多问题，主要有：种苗遗传性状不稳定、雌雄性状分离、产量及品质性状与该品种的优良特性不一致、成活率极低不能满足生产需要等。虽然进行了组培育苗技术的相关研究，但因玻璃化以及效率、成本等问题，仍没能在生产上应用。针对毛葡萄育苗对技术要求较高的问题，迫切需要相关的育苗技术，为生产提供技术支撑。项目组通过不断的实践和改进，利用组培快繁结合苗圃育苗技术形成了一套完整的种苗繁育体系，利用该技术繁育的种苗遗传性状稳定，产量及品质均保持该品种的优良特性、种苗根系发达、定植成活率高，定植后生长迅速病害少，综合育苗技术的实施受季节、气候等外界因素的影响较小，可以在短期内大量生产、供应优质健康种苗。现将‘野酿2号两性花毛葡萄综合育苗技术总结如下。

1 组培苗培育

1.1外植体处理

冬剪时，选择‘野酿2号两性花毛葡萄一年生成熟枝条，采回备用，枝条要求：品种绝无混杂、芽眼饱满度高、病虫害未见发生、枝条成熟良好、髓部相对较小、枝条木质化程度高、健康健壮的枝条。将直径大于0.6cm的枝条，剪成带有2-3个芽的插穗，上部离芽1cm左右平剪，下部靠芽剪成斜茬，用生根剂浸根后扦插到沙床上（扦插沙床下部是疏松红壤，上部是约10cm厚中沙）。扦插后插条萌发长出嫩芽，选择5～10cm长的嫩芽剪下，除去全部叶片，在自来水下轻轻冲洗干净，剪成长度为3cm左右的大茎段，然后进行消毒，消毒时先用75%的酒精消毒1min，然后用0.1%的升汞液消毒5min，最后用无菌水把消毒液漂洗干净后，剪成约0.5-1.0cm长带一个腋芽的外植体。

1.2培养基

基本培养基均为MS培养基，略作修改，即启动培养基：MS+BA 0.5-2.0mg/L+KT 0-1.0mg/L+NAA 0.01-0.05mg/L，微型扦插培养基：1/2MS+BA 0.05mg/L+IAA 1.0mg/L+活性炭0.05-0.1mg/L（添加适量活性炭的培养基，玻璃化和愈伤组织发生率明显降低），培养基均加入白糖3%、琼脂0.4%-0.45%，pH值5.8-6.0。

1.3培养条件及生产操作

培养温度：25-30℃，光照强度：2000-3000lx，每天光照时间：12h，培养容器有：250mL广口瓶、600mL三角瓶，12×14cm²的聚丙烯塑料袋（假植移栽前阶段使用）。培养基在温度121℃、压力1.1kg/cm²条件下灭菌20-25min。

按上述方法将外植体处理后，接种到启动培养基上培养，当外植体上有正常嫩芽长出时，将嫩芽从外植体上切下，切成带一个叶片（即腋芽）的单芽小茎段，扦插到无菌的微型扦插培养基上，经过40-50天培养，小植株长出3-5条完整根系，4-6片叶，即可转瓶，再重复上述过程进行扩繁操作。

1.4假植前炼苗

选择适当的时间进行炼苗，使其定植后迅速适应露地的不良环境条件，缩短缓苗时间，能够提高组培苗假植的成活率。毛葡萄组培生根袋苗在室内培养40天，室内光照强度设置为2000-3000lx，而后转到大棚进行炼苗，大棚用遮阳网将光照强度调节为5000-10000lx，假植前必须进行自然散射光炼苗7-10天，且不可时间过长，大棚一般要加盖一层遮光率70%的遮光网，若中午气温高于35℃时要盖两层遮光网，保持温度在28-32℃间为宜。炼苗后组培苗表现为植株韧性强、叶片绿、厚、硬，茎和根不易折断，不易失水。

炼苗后将生根苗上透明的培养基以及可能形成的愈伤组织清理干净，具体做法为：剪开组培生根袋（聚丙烯塑料袋），盆内装入清水，把带有培养基的生根苗倒入盆内，用手轻轻地抓住组培苗茎的中下部，洗净根上的透明培养基，尽可能少用手接触小苗根部，避免伤及根部。再进行消毒处理，方法为：放入800-1000倍的50%多菌灵溶液中浸泡5-10s或0.1%高锰酸钾溶液浸泡3-5s，取出待种。

2 三步假植育苗法

2.1组培苗沙床假植

2.1.1苗床准备 选择通风透光性好、接近水源、便于排水、交通方便、平整的地块作育苗地，搭建拱架结构育苗棚，宽度5-6m，长30m左右，棚顶至地面高2.2-2.5m左右，棚缘高1.2m左右，棚内留出一条50cm宽的操作道，育苗棚两头各留一道可开关的门以便进出，大棚应抗风，不积水。育苗前清除大棚内杂草，平整棚内地面，然后喷1次800倍75%百菌清和600倍80%敌敌畏混合液，关闭棚门闷棚7-10天，待用。

苗床要求起畦，畦面高于地面3.5-5.0cm，规格1.5m×2.5m，以体积百分比80%红泥+20%沙捣碎拌匀后作沙培假植的基质，将洗净消毒的组培生根苗直接假植在苗床基质上，假植前一天将苗床淋湿，使苗土松软，假植时采用开小沟的方法，株距5cm、行距10cm，注意苗不能种得太深，以根刚好全部入土为宜，以防止茎干因水分的原因而腐烂。

2.1.2光温水调控 充足的水分是植株生长的必要条件，假植成活率受水分的影响，合理的控制水分至关重要，假植后首先必须淋足定根水，大棚盖好遮阳网，棚内温度控制在30℃左右。畦面加盖小拱棚保湿，以5.0cm宽、2.0m长毛竹片作为拱棚的骨架，毛竹片两头削尖便于插入土中，每个拱棚由3-4条竹片支撑，骨架上覆盖0.05mm厚的聚乙烯薄膜，覆膜后边缘压土，假植后5天内，要经常淋水喷雾，晴天每天淋水1-2次或喷雾3-4次，阴天2-3天淋水1次，让植株叶片时刻保持水分，让小拱棚内空气湿度保持90%以上，使叶片保持弹性而不萎蔫。假植后10天，小苗逐渐长出新根，老根恢复活力，组培苗成活，逐步打开小拱棚薄膜，使空气湿度降低至60%-70%，假植后15-20天，不需人工控制湿度。秋、冬季节，温度稍低，假植育苗过程需要45～60天；夏季高温时，假植育苗过程可缩短为30-40天。假植时间应适宜，时间过短，毛葡萄假植苗不够强壮，抗逆性差，移入营养杯后易感染病害（软腐病）导致死苗；假植时间太长，毛葡萄假植苗根过长，上杯时不易种植影响成活率。

毛葡萄组培苗假植前期需弱光，假植后期可逐渐转强光，使苗逐渐适应自然光。春、秋、冬季用70%的遮阳网遮阴，夏季用90%的遮阳网遮阴。保持最适宜生长的温度，温度过低或过高都不利于其生长，对假植成活率影响较大，冬季需采用薄膜升温和保温，夏季采用遮阳网遮荫降温。大棚还需盖薄膜挡雨，但要注意经常保持棚内空气流通，以防霜霉病和软腐病等病害的发生。

2.2嫩枝沙床扦插假植

2.2.1插穗采集 嫩枝扦插3-11月均可以进行，组培苗在大棚沙床上长有7-9片叶（含组培时的老叶）后即可采插穗。采穗后原小植株要保留2-3片叶，并马上喷洒杀菌剂防腐。过15-20天后（气温低的季节时间长些），剪过的植株又萌出2-4个新枝，即可进行第二次剪取插穗，如此循环操作，一般在第五轮之后即停止不再修剪扦插。节间相对短的嫩枝才可作为插穗使用，不徒长，无卷须，不成蔓状，无木质化，否则不适宜作插穗。采下的嫩枝剪成2-3个节位、带2-3片新叶（每叶片剪去一半）的插穗，泡入清水中备用，然后扦插到沙床上。

2.2.2扦插沙床条件 沙床规格长2.5m、宽1.2m，面上铺中沙3cm左右，下部垫6-7cm厚的松土。扦插时插穗插入深度以1/3为宜，扦插后立即淋足水分，直接在插穗顶部盖上0.1mm厚的聚乙烯薄膜（我们称之为面膜）保持湿度，四周密封，根据苗床墒情，每隔3天掀开面膜淋透水一次，天气晴朗时要注意补充水分，保持土壤湿度在60%-70%为宜，以免因缺水影响插条发芽及生根，但在下午16h以后不宜浇水，以免夜间湿度过大，引起插条生菌，影响成活。并及时清除苗床上的杂草。4-5天后，在面膜上开3-4个/m²约筷子大小的小孔，7-8天后，下午16h到次日10h前揭开面膜，白天盖回，10天后则可全天揭开面膜。插穗一般6-7天开始发根，8-11天基本全部长根，在温度低的春、秋季节则要10-20天后才生根，根数以3-4条居多，粗壮的嫩枝则可长5-6条根。保持最适宜生长的温度（30℃左右），冬季采用薄膜覆盖升温和保温。插条生根能力受光照时间长短与强弱的影响很大，强烈的光照，温度过高、蒸发量过大，可导致插穗凋萎，影响成活。因此，扦插初期必须及时采用遮阳网遮阳，降低温度、减少蒸发，新根产生后，插条可以自主吸收水分后，再逐渐加大光照量。

2.3沙床苗营养杯假植

2.3.1营养杯及基质 营养杯采用无纺布材料的有底营养袋，直径为8cm，高为12cm。以红泥50%、泥炭49%、腐熟农家肥1%（体积百分比）捣碎混匀配制营养土。营养袋装满土后紧靠排列在苗床上，移栽前3天用1000倍50%多菌灵对营养袋土进行消毒，移栽前1天应把营养袋土浇透水，沙培苗床淋湿水。

2.3.2沙床苗营养杯假植 沙培苗的规格：新生5张以上健康叶片，15cm以上株茎高度，0.5cm以上株茎粗度，叶片、主干青绿、不徒长，无病虫害，无变异。春季是假植的最佳时间，也可在秋季进行假植。按苗大小分开移栽，选择生长一致的苗移栽到同一苗床，手持2cm宽竹片在营养杯上挖小坑，坑深3cm，小心放入幼苗，避免幼根折伤，而后埋土，稍稍压实，栽苗深度埋及小苗基部，不露根，栽苗后浇足定根水，盖上遮阳网遮荫，早晚封闭大棚，中午高温时段应打开棚门通风透气1～3h。

2.3.3出圃前炼苗 出圃种植前7天应进行适当干旱炼苗和强光照锻炼。具体方法是将淋水次数和数量适当减少，同时逐步打开大棚的四周，使空气自然流通，降低温棚温度，最后将顶上的遮阳网撤去，使其适应外界环境，可以出圃大田种植。

3 假植施肥

3.1组培沙床苗的施肥

组培袋苗相对较弱，马上接触肥料容易引起肥害，严重时会导致烧苗，待假植成活稳定后，根据生长情况7-10天施肥一次，淋施0.1%复合肥（15-15-15）溶液。

3.2扦插沙床苗的施肥

扦插成活后淋施0.1%复合肥（15-15-15）+0.1%磷酸二氢钾，15天施1次，等长出2-3张新叶后，淋施0.15%复合肥（15-15-15）+0.125%磷酸二氢钾，每月施1次。

3.3营养杯假植苗的施肥

假植成活后，根据幼苗的叶色、长势进行施肥，淋施0.2%复合肥（15-15-15）+0.15%磷酸二氢钾或0.15%硝酸钾，每月施1-2次。

4 假植病虫害防治

视病虫发生实际情况，有针对性的选用药剂，以防为主，综合防治。霜霉病防治：采用200倍波尔多液喷3-4次预防，发病后采用60%雷多米尔600-800倍液或60%代森锰锌700-800倍液喷洒；软腐病防治：在小苗假植成活后每隔15天喷1次药，共3-5次，可喷50%托布津可湿性粉剂500倍液、75%百菌清可湿性粉剂500-800倍液；立枯病防治：发病初期开始施药，施药间隔7-10天，可用75%百菌清可湿性粉剂600倍液、或5%井岗霉素水剂1500倍液、或20%甲基立枯磷乳油1200倍液，进行喷雾。根线虫防治：地虫灵或益舒宝拌入基质中，若在假植后发生，则用2%地虫灵600-1000倍液灌根，隔天1次，连灌2次。菜青虫、叶蝉、地老虎危害小苗嫩叶及茎干时，可用40%乐果800倍液杀死、防止虫害扩散。

5 结论与讨论

广西野生毛葡萄发展面积逐年扩大，优质健康种苗的需求量随之不断增加，多年反复试验证明，生产上野生毛葡萄采取硬枝扦插方法进行种苗扩繁，成活率极低。本研究形成了完整的‘野酿2号两性花毛葡萄综合育苗技术体系，该技术可以被生产者和推广部门直接运用，减少育苗操作过程的时间，提高苗木成活率。本套技术的两个关键点：降低玻璃化和愈伤组织发生率的有效方法是在培养基（微型扦插）中添加0.01-0.1mg/L活性炭，腋芽萌芽率可达95%以上。接种材料的基部不膨大，根系直接从基部长出，组培苗质量和成苗率明显提高；以“组培苗沙床假植一嫩枝沙床扦插假植-生根苗营养杯假植”为基础的三步假植育苗法，具有成活率高、操作简便、成本低、速度快和扩繁系数大等优点，对组培苗假植苗和嫩枝扦插假植苗实行多轮的嫩枝扦插，迅速扩繁种苗数达10倍以上。