MMP—9、TIMP—1对冠心病患者斑块稳定性的诊断价值探讨

李璇 王海曙 林宪如 王守东 吴娜

【摘 要】目的：探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9、基质金属蛋白酶抑制因子（TIMP）-1在诊断不稳定性冠脉病变中的价值。方法：采用夹心酶联免疫法测定42例急性冠脉综合征（ACS）患者和29例稳定性心绞痛（SAP）患者血清MMP-9、TIMP-1水平进行对比分析，对ACS中的不稳定性心绞痛（UAP）亚组及SAP组患者血清MMP-9及TIMP-1水平与冠脉病变Califf危险积分作相关分析，计算MMP-9及TIMP-1设定值诊断急性冠脉综合征的敏感性及特异性。结果： ACS组患者MMP-9较SAP组明显增高（P<0.01），而TIMP-1则较SAP组显著降低（P<0.01）；UAP组和SAP组患者血清MMP-9与冠脉病变积分均呈明显正相关（P<0.01），两组患者血清TIMP-1与冠脉病变积分均呈明显负相关（P<0.01）；若以MMP-9>500ng/ml或TIMP-1<200ng/ml作为诊断ACS的指标，则诊断的敏感性均为85.7%，特异性均为82.8%。结论：MMP-9、TIMP-1与急性冠脉综合征有关，可作为鉴别冠心病患者斑块是否稳定的诊断指标之一。

【关键词】基质金属蛋白酶-9；基质金属蛋白酶抑制因子-1；急性冠脉综合征；稳定性心绞痛；不稳定斑块

【中图分类号】R541.4 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）02-0560-02

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组锌离子依赖性的蛋白水解酶家族，是细胞外基质降解及重构的重要介质。初步研究表明，MMPs与动脉粥样斑块的稳定性有关[1，2]。本文探讨MMP-9及基质金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）与急性冠脉综合征患者冠脉病变的关系。

1 材料与方法

1.1 研究对象：包括急性冠脉综合征（ACS）组和稳定性心绞痛（SAP）组，所有病例均符合2000年AHA/ACC急性冠脉综合征指南的诊断标准[3]。

1.1.1 ACS组：选择收住我院心内科的ACS患者42例，男性27例，女性15例，年龄33～78岁，平均年龄63.7±12.1岁。其中不稳定性心绞痛（UAP）亚组患者21例，男性13例，女性8例，年龄33～75岁，平均年龄62.1±12.6歲。

1.1.2SAP组：为同期收住我科的SAP患者，计29例，男性18例，女性11例，年龄36～76岁，平均年龄61.3±13.3岁。

1.2 实验方法

1.2.1标本采集 所有患者入院后次日清晨（24小时内）抽取外周静脉血4ml，注入标有基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制因子-1 （TIMP-1）的试管中，30分钟内送标本至实验室，以1000x g离心15分钟，抽取血浆置-20℃低温冰箱统一编号保存，血标本收集成批后同一测定MMP-9及TIMP-1的水平。

1.2.2标本测定：MMP-9、TIMP-1测定：均采用夹心酶联免疫法测定，测定步骤为：⑴预先分别于两测定管内加入MMP-9、TIMP-1测定稀释液100μl；⑵分别于两测定管内加MMP-9、 TIMP-1样品血清和标准品各100μl，在振板上室温下孵育2小时；⑶分别用400μl缓冲液冲4遍；⑷分别加MMP-9 HRP多抗、TIMP-1抗体对照品200μl，在振板上室温孵育1小时；⑸400μl缓冲液冲4遍；⑹分别加显色剂200μl，在benchtop上室温孵育30分钟（避光）；⑺分别加终止液50μl，30分钟内，450nm读数。

1.3统计学分析

使用SPSS11.0软件，各组数据以x±s表示，用t检验；相关分析采用直线相关，P<0.05为差异有显著性，P<0.01为差异有极显著性。

2 结果

2.1 ACS组与SAP患者吸烟率、糖尿病患病率、高血压患病率及各项血脂指标比较差别均无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2血清MMP-9及TIMP-1水平与冠心病类型的关系：见表2。由表中可见，ACS组MMP-9较SAP组明显增高（P<0.01），而TIMP-1则较SAP组显著降低（P<0.01）。

MMP-9是明胶酶中的一种，是MMPs中最常见的酶之一。实验证明，粥样斑块中的巨噬细胞可分泌多种MMPs，如MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-12、MMP-13等[5， 6]。不仅如此，巨噬细胞还分泌多种细胞因子，如IL-1β、TNF–α，以自分泌和旁分泌形式作用于内皮细胞、血管平滑肌细胞。循环中的单核细胞与内皮细胞粘附，在血管壁中迁移、吞噬脂质衍化为巨噬泡沫细胞的过程中可分泌大量的MMPs。病理研究显示人冠状动脉粥样斑块MMP-1、MMP-2、MMP-3及MMP-9表达均有增加[5]。TIMP-1是一种糖基化蛋白，主要与MMP-1、MMP-9结合形成1：1化学复合物[7]，从而阻断纤维帽的降解。本研究采用美国R&D Systems公司的MMP-9、TIMP-1试剂盒及夹心酶联免疫法作为测定标准，发现ACS组与SAP组不但MMP-9、TIMP-1水平明显不同，且两组重叠极少、有分开趋势，因而认为，确定某一MMP-9及TIMP-1界限值作为区分ACS与SAP病变是可行的。本研究中，选择MMP-9>500ng/ml或TIMP-1<200ng/ml作为诊断冠脉病变不稳定性的指标，则诊断的敏感性均为85.7%，特异性均为82.8%。由于这两项指标的诊断敏感性和特异性均较高，我们认为，可将其作为临床诊断不稳定性斑块的指标，以增加临床对不稳定性斑块的检出率。

参考文献：

[1] Hojo Y， Ikeda U， Ueno S， et al. Expression of matrix metalloproteinases in patients with acute myocardial infaction. Jpn Circ J， 2001， 65： 71-75

[2] Jiang X， Zeng HS， Guo Y， et al. The expression of matrix metalloproteinases-9， transforming growth factor-β1 and transforming growth factor-β receptor Ⅰ in human atherosclerotic plaque and their relationship with plaque stability. Chinese Medical Journal， 2004， 117（12）： 1825-1829

[3] Gibbons RJ， Abrams J， Chatterjee K， et al. ACC/AHA 2002 Guideline Update for the Management of patients With chronic Stable Angina. Circulation， 2003， 107： 149-158.

[4] Califf HR， Phillips HR， Hindman MC. Prognostic value of a coronary artery jeopardy score. J Am Coll Cardiol， 1985， 5： 1055～1063.

[5] Galis ZS ， Sukhova GK， Lark MW， et al. Increased expression of matrix metalloproteinase and matrix degrading activity in vulnerable regions of human atherosc lerotic plaques. J Clin Invest 1994， 94（6）： 2493-2503

[6] Crisby M， Nordin-Frednksson G， Shah PK， et al. Pravastatin treatment increases collagen content and decreasea lipid content， inflammation， metalloproteinases， and cell death in human carotid plaquea： implications of plaque stabilization. Circulation， 2001， 103： 926-933

[7] Visse R， Hideaki N. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases structure， function， and biochrmistry. CircRes， 2003， 92： 827-831