KPL-1保健酒制备及功能分析

薛正楷，郑文武，张宿义

(1.泸州职业技术学院 生物与医学工程研究所，四川 泸州 646005；2.泸州医学院附属医院 医学实验中心，四川 泸州 646100；3.泸州医学院附属医院 心内科，四川 泸州 646100；4.泸州老窖股份有限公司，四川 泸州 646000)



KPL-1保健酒制备及功能分析

薛正楷1,2，郑文武3，张宿义4

(1.泸州职业技术学院 生物与医学工程研究所，四川 泸州 646005；2.泸州医学院附属医院 医学实验中心，四川 泸州 646100；3.泸州医学院附属医院 心内科，四川 泸州 646100；4.泸州老窖股份有限公司，四川 泸州 646000)

目的：根据中医关于疲劳形成的五脏失调、精气血耗损观点，遵从中医以疏肝解郁、养血安神、补益脾肾为主的调补疗法原则，研制一款抗疲劳中药保健酒。方法：选用人参、鹿茸、熟地、何首乌、淫羊藿、阿胶、枸杞等中药配伍组方,并以白酒作为溶媒，采用现代提取工艺，制备抗疲劳保健酒KPL-1(抗疲劳1号)，并进行感官检测、理化检测和动物实验。结果：经检测，KPL-1的酒体感官特征及理化特征符合GB/T27588-201l和GB 2757-2012标准；动物生长分析显示实验组体重显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01)，但体长实验结果比较差异无统计学意义(P>0.05)；力竭实验显示，实验组游泳时间显著高于对照组(P<0.01)。结论：研究表明KLP-1保健酒具有较强的抗疲劳和减肥作用。

调补疗法；保健酒；功能分析

保健酒在生产管理规范中属于露酒，根据GB/T27588-2011对露酒的定义，保健酒是指以蒸馏酒、发酵酒或食用酒精为酒基,加入可食用、药食两用(符合相关规定)的辅料或食品添加剂，进行调配、混合及再加工制成的饮料酒[1]。保健酒已改变原酒基风格，其功效较为广泛，具有抗氧化、抗疲劳、降血压、增强免疫、壮阳提性等功效，深为历代医家推崇[2-5]。根据现代西方医学的疲劳形成理论及中医的五脏失调、精气血耗损观点，遵从中医以疏肝解郁、养血安神、补益脾肾为主的调补立法原则，本研究选用人参、鹿茸、熟地、何首乌、淫羊藿、阿胶、枸杞等中药配伍组方，并以白酒作为溶媒，采用现代工艺，以期开发出一款具有抗疲劳功能的新型保健酒。

1 实验部分

1.1 材料与试剂

1.1.1 药材及基酒 人参、马鹿茸、阿胶、制何首乌、枸杞子、甘草、淫羊霍、金银花、熟地、蜂蜜，均购自泸州圣杰大药房；食用酒精(95.6%(V/V)，20℃)，购自四川北方绿园生物科技有限公司。

1.1.2 试剂 阳性对照38度参茸酒，购自四川泸州福源酒行；硅藻土，购自沈阳伊莱普克斯贸易有限公司。

1.1.3 动物 昆明小鼠，SPF级，体重18～22g，由泸州医学院实验动物中心提供，动物许可证号SYXK-(川)2013-065。

1.1.4 器具 药筛(成都企航仪器有限公司)；分光光度计(UV-1100，上海美普达)；恒温水浴锅(浙江金坛市晨阳电子仪表厂)；台式离心机(四川蜀科仪器有限公司)；涡旋混匀器(浙江金坛市白塔新宝仪器厂)；微量移液器(大龙兴创实验仪器(北京)有限公司)；中药粉碎机(济南亿健医疗设备有限公司)；微孔滤膜(0.45μm)。

1.2 方法

参考闫永亮等实验方法[3-5]，见图1。

图1 KPL-1保健酒制备工艺

操作要点：原料处理：去除原料的霉变、虫蛀成分，用温水漂洗两次至干净为止，60℃烘烤5h，取出摊凉；阿胶、制何首乌、枸杞子、甘草、淫羊霍、金银花采用中药粉粹机粉粹处理，熟地采用串料方法粉碎，鹿茸、人参研磨成细粉，所有粉碎药物过40目筛备用[5]。浸提：按质量比1∶10，粉粹药物加入65%(V/V)食用酒精，室温下浸提，每24h搅拌1次，28天过滤得药渣和浸提液；按质量比1∶5，药渣于80℃热水浴浸提5h，过滤，并将两次浸提药液混合。澄清：滤液加入0.5%硅藻土，搅拌，除去滤液中悬浮颗粒及无效大分子物质。调配：澄清液用蒸馏水将酒精含量降至38%(V/V)，加入冰糖调味，调配结束酒液于-15℃静置24h。精滤：静置液采用0.45μm滤膜精滤，精滤液进行理化、感官、卫生检测，合格液经0.0001%臭氧灭菌进行罐装，即得成品。

1.3 成品酒标准检测

KPL-1保健酒的感官、理化和卫生检测，均按露酒国家标准GB/T27588-201l和GB 2757-2012执行，理化检测由中国酒类及加工食品质量监督检验中心泸州实验室进行。

1.3.1 分组及给药 小鼠在实验室驯化1周后，随机分为空白对照组(蒸馏水)、阴性对照组(38度食用酒精)、阳性对照组(38度参茸酒)、实验组(38度食用酒精浸提物溶液)，每组均分高、中、低三个剂量组[6]。每组各10只动物，灌胃时间为30天。

1.3.2 体长测定 待小鼠伸直后，起自小鼠两耳连线中点，终至体尾相接处，测得结果即为体长。

1.3.3 游泳试验 连续灌胃30天,末次灌胃30min。于小鼠根部加5%体重的铅皮，室温下放入水深30cm的游泳箱中,每次放入5 只小鼠，记录负重小鼠开始游泳到力竭死亡的时间。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 感官特征

实验制备的保健酒符合国标GB/T27588-201l感官检测标准，本品具有特别淡雅药香，酒度适中，不浓不烈，符合大众消费习惯。具体见表1。

表1 KPL-1感官评定结果

2.2 理化指标

研制的保健酒均符合GB/T27588-201l和GB 2757-2012要求，实验表明试验工艺具备生产合格保健酒的理化条件。详见表2。

表2 KPL-1理化检测结果

指标数值总酸(以乙酸计)0．52±0．02总糖(以葡萄糖计)55±12．36总酯(以乙酸乙酯计)0．85±0．26干浸出物0．62±0．03甲醇0．38±0．01氰化物(以HCN计)0．00365±0．00027

2.3 对小鼠体重生长的影响

各组小鼠组间和组内初始体重比较差异均无统计学意义(P=0.541、0.557>0.05)。经30天灌胃实验,高剂量组中KPL-1灌胃组与空白对照组差异有统计学意义(P=0.01<0.05),说明该保健酒可显著抑制小鼠体重增长；中剂量组中，KPL-1灌胃组与空白对照组比较差异有统计学意义(P=0.00<0.01)，与阳性对照组和阴性对照组比较差异无统计学意义(P=0.085、0.053>0.05)；低剂量组中，KPL-1灌胃组与阳性对照组、阴性对照组、空白对照组比较均无统计学意义(P=0.813、0.557、0.514>0.05)。与对照组比较，高、中剂量实验组均具有抑制小白鼠体重增长的作用(P<0.05)，低剂量实验组对体重增长无明显影响(P>0.05)。详见表3。

表3 小鼠体重增长结果比较 ±s，g)

2.4 对小鼠体长生长的影响

结果表明：各组小鼠初始体长比较差异均无统计学意义(P>0.05)；经灌胃，各组小鼠最终体长比较差异均无统计学意义(P>0.05)。详见表4。

表4 小鼠体长增长结果比较

组别剂量动物数(只)初始体长最终体长高剂量106．12±0．218．35±0．49实验组中剂量106．25±0．098．48±0．35低剂量106．04±0．358．55±0．4高剂量106．16±0．238．35±0．43阳性对照组中剂量105．95±0．248．19±0．22低剂量106．07±0．818．49±0．4高剂量106．11±0．418．41±0．29阴性对照组中剂量106．05±0．118．43±0．40低剂量106．07±0．338．46±0．42高剂量106．15±0．088．48±0．41空白对照组中剂量106．10±0．248．31±0．13低剂量106．15±0．228．27±0．27

2.5 对小鼠负重游泳时间的影响

经KPL-1灌胃后，实验组小鼠负重游泳时间与阳性对照组差异无统计学意义(P>0.05)，说明两者抗疲劳功效差异不显著，但实验组小鼠平均游泳时间长于阳性对照组；实验组小鼠平均负重游泳时间显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。详见表5。

表5 各组小鼠负重游泳时间比较 ±s，min)

3 讨论

随着生活和工作节奏的日益加快及心理、社会压力的不断加重，由于缺乏规律饮食、长期睡眠不足等因素引发的非健康状态及疾病复杂而多样，疲劳即其中之一。据WHO调查，全球疲劳状态发生率达35% 以上，中年男性人群疲劳状态达60%，我国广东地区公务员发生率高达78.49%,疲劳成为了一个全球性的公共问题[7-8]。

中医对疲劳的认识始于两千多年前，以《黄帝内经》为开端，其《素问·举痛论》云：“劳则气来重”，《素问·调经证》亦云：“有所劳倦，形乏衰少”。历代医家均将“疲劳”作为致病因素之一，并认为其病理机制涉及五脏六腑，以脾、肝、肾为主，首推脾，如《素问·示从容论篇》云：“肝虚、肾虚、脾虚，皆令人体重烦冤”，《素问·本病论篇》云：“饮食劳倦即伤脾”。金元时期李东垣系统性地论述了劳倦内伤，明代孙志宏的《简明医彀·内伤》记载：“无胃气纳受，脾主运动，脾虚谷气不真，脾愈无所禀唉。脾运冗肢，已无禀气有虚亏则明可倦怠而嗜卧也。”中医理论认为脏腑机能失调、精气血阴阳亏耗损，是形成多种慢性衰弱征象疾病性疲劳的主要病因[9]。西方对疲劳的研究始于1880年，现代西方医学将疲劳定义为：机体生理过程不能持续其机能在特定水平上或不能维持预定的运动强度，其产生机制涉及机体生理和心理状态的综合性变化，与细胞内有害代谢产物的积累、能源物质的消耗及细胞的生理生化反应异常有关，进而导致机体发生内分泌紊乱、免疫力下降、肝脾损伤、性功能减退等，若不能及时纠正，最终将导致慢性疲劳综合征[10-12]。

目前，西医主要采用抗疲劳药物治疗，多为大脑皮层兴奋药，包括咖啡因(caffeine)、苯丙胺(Amphetamine)、哌甲酯(Methylphenidate)、甲氯芬酯(Meclofenoxate)、乙酰胺(Acetamide)、莫达非尼(Modafil)、尼可丁(Nicotine)及其类似物、激素及其类似物等；其中哌甲酯、苯丙胺、莫达非尼为最常用的中枢神经兴奋剂，主要抗疲劳机理为刺激大脑、消除睡意，可使服用者保持较长时间的连续工作状态，但该类药物多具有成瘾性，且副作用较大，长期使用会加重肝肾损伤，还会导致精神疾病[13-18]。多数中药具有抗疲劳的药理作用，其中包括西洋参、红景天、淫羊藿、人参等[19-26]，抗疲劳中药多以滋补气血为主，副作用相对较小。我国利用中药与酒结合制备保健酒工艺具有悠久的历史，据考证远在殷商时期，古代先民将郁金香草加入黑黍中酿制成药酒(保健酒)，可用于祭祀、占卦、驱恶防腐等，直至清代药酒结合达到高峰，药酒专著及品种繁多，尤其以滋补保健酒居多[27]。中药浸制保健型养生酒是民间最常用的生产工艺，以酒为药媒，且使用成本较低，易于接受，具有抗疲劳、提高免疫功能等多种功效。目前国内已开发的保健酒品牌主要包括劲酒、椰岛鹿龟酒、五粮酒黄金酒、张裕三鞭酒、宁夏红、致中和等[28-30]，其中参茸酒是以道地名贵药材为原料开发的一款中档保健酒，精选人参、鹿茸等名贵药材，具有抗疲劳、免疫调节等功效，酒助药性，药添酒香，既享饮酒之乐，又与健康随行。

4 结论

根据现代西方医学对疲劳形成理论及中医的五脏失调、精气血耗损观点，遵从中医以疏肝解郁、养血安神、补益脾肾为主的调补立法原则，选用人参、鹿茸、熟地、何首乌、淫羊藿、阿胶、枸杞等中药配伍组方，并以白酒作为溶媒。其中人参可加速自由基的清除，节省糖原利用，增加糖原储存，减少乳酸堆积及增强乳酸脱氢酶(LDH) 活性，及时为肌肉活动提供能量，具有较好的抗疲劳作用；淫羊藿含有黄酮类、多糖、挥发油、木脂素、微量元素、生物碱等多种活性化学成分，具有提高免疫系统、增加骨代谢、改善心脑血管系统、抗氧化、抗肿瘤、性激素分泌等药理作用，还可抗疲劳、提高运动能力；鹿茸含有多种有机化合物，主要有氨基酸、脂肪酸、含N类化合物，此外还含有多糖及多种对人体有益的微量元素,可用于治疗心血管、神经、生殖、肿瘤、免疫、衰老等疾病，具有壮元阳、补气血、益精髓、强筋骨、治虚劳赢瘦、精神倦乏、眩晕、耳聋、目暗、腰膝酸痛等功效，可较好地解除疲劳[31]。

实验研究表明，采用优化工艺可制得KPL-1保健酒成品，各项感官和理化指标均达标；KPL-1高、中剂量实验组小鼠体重与阴性对照组、空白对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01)，表明KPL-1保健酒具有抑制体重增长的特性；各组小鼠最终体长比较差异均无统计学意义(P>0.05)，表明该保健酒具有减肥功效；实验组小鼠负重游泳时间显著高于阴性对照组、空白对照组(P<0.01)，表明该保健酒具有抗疲劳功能。综上所述，运用中西医现代理论成功开发制得具有减肥和抗疲劳功能的KPL-1保健酒，其减肥和抗疲劳机理有待进一步研究。

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(责任编辑：李岚春)

The Development of Anti-fatigue Healthcare Wine Based on the TCM Theory

Xue Zhengkai1,2,Zheng Wenwu3，Zhang Suyi4

(1.Institute of Biomedical Engineering of Luzhou Vocational and Technical College,Luzhou,Sichuan 646005,China;2.Medical Experimental Center of Affiliated Hospital of Luzhou Medical College,Luzhou,Sichuan 646100,China；3.The Affiliated Hospital of Luzhou Medical College，Luzhou,Sichuan 646100,China;4.Luzhou Laojiao Co. Ltd., Luzhou 646000,China)

Objective:The wine KPL-1(No 1 anti-fatigue) was prepared based on the views of the five internal organs disorders , Qi and blood loss in traditional Chinese medicine(TCM),To develop a Traditional Chinese medicine healthcare wine with anti-fatigue function.Methods: To comply with the medical principles in TCM , those are Soothing the liver and alleviating mental depression, nourishing blood for tranquillization, invigorating spleen and kidney by tonifying therapy, formulating prescription with the combination of ginseng, deer horn, radix rehmanniae, radix poly multiflori, shorthorned epimedium herb, gelatin, barbary wolfberryfruit.And Chinese white liquor was utilized as a solvent to prepare the anti-fatigue health wine KPL-1 by the use of modern extraction technology.The prepared health wine KPL-1 was tested in sensory, physical and chemical properties. Results:The sensory, physical and chemical properties of KPL-1 health wine met the demands of GB/T27588-201l and GB 2757-2012；the assay of growth on Kunming mice demonstrated that the significant difference existed among the experimental group, the empty control group and the alcohol control group(P<0.01), but the difference of body length of the groups was not significant(P>0.05) ；the exhaustive experiments showed that the swimming time in the experimental group was significantly higher than those of the empty control group and the alcohol control group (P<0.01). Conclusion:The Traditional Chinese medicine healthcare wine with anti-fatigue function was prepared successfully.

Anti-Fatigue; Health Wine; Preparation; Function Analysis

2014-07-05

四川省教育厅理工重点项目(14ZA0334)；泸州市科技局科技苗子项目(2013-R-51(5/18))

薛正楷，博士，四川省泸州职业技术学院副教授，研究方向为功能食品的设计与开发。E-mail：zk.xue988@163.com。

R28

A

1673-2197(2014)20-0019-04