高效液相色谱法测定甲硝唑片的溶出度

北京市大兴区药品检验所（102600）苗立红

甲硝唑片临床用于各种厌氧菌感染，还可用于阿米巴病，阴道滴虫等。为《中国药典》（2010版）二部收载的品种，其溶出度采用的是紫外分光光度法，而本文采用高效液相色谱法，结果准确，操作简便。

1 仪器与试药

岛津LC—20AT高效液相色谱仪；赛多利斯精密天平CP225D；智能药物溶出仪（D-800LS）。甲硝唑对照品（中国食品药品检定研究院批号100191-200606）；甲硝唑片（批号121051）规格0.2g；甲醇为色谱纯；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（20：80）为流动相，检测波长为320nm；进样量10μl；柱温30℃；流速1.0ml/min；理论塔板数按甲硝唑峰面积计算不低于2000。

2.2 溶液的配制

2.2.1 对照品溶液的配制 精密称取甲硝唑对照品12.20mg，置50ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为甲硝唑片溶出度的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的配制 按《中国药典》（2010版）二部，以盐酸溶液（9→1000）900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取续滤液作为供试品溶液（0.45μm微孔滤膜），照2.1色谱条件测定，按外标法以峰面积计算每片溶出量，限度为标示量的80%。

2.3 线性关系考察 精密称取甲硝唑对照品25.00mg，置50ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密量取1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10.0ml置10ml的容量瓶中，加流动项至刻度，配成系列对照品溶液，按上述色谱条件进样测定峰面积为1607368、3215838、4723407、8036345、16064689。以峰面积Y对浓度X绘制标准曲线，得回归方程Y=32172347X-26664，R=0.9999。结果表明，甲硝唑浓度在0.05～0.5mg/ml范围内，线性良好。

2.4 精密度试验 取对照品溶液10μl，连续进样五针（n=5）记录色谱图，其峰面积为7770765、7763699、7765574、7768326、7774289，平均峰面积为7768531测定RSD为0.05%。本方法精密度良好。

2.5 稳定性试验 取对照品溶液分别于0、2、4、6、12、24h进样1次，测定其峰面积为7776759、7780012、7775574、7788366、7780899、7781126，平均峰面积为7780456，RSD为0.1%.( n=6)，甲硝唑在24h内稳定性良好。

2.6 加样回收试验 取已知含量的甲硝唑片样品3份，分别加入900ml溶出介质，超声使其溶解，滤过（0.45μm微孔滤膜），另取对照品适量加入，取续滤液10μl，注入色谱仪，记录色谱峰图，按外标法计算回收率，得回收率为99.24%，RSD为0.26%。结果表明本方法回收率良好。

2.7 不同方法测定 取样品三批次，按供试品溶液制备方法进行操作，在2.1色谱条件下测定，按外标法以峰面积计算甲硝唑片溶出量，分别为91.56%、93.00%、90.26%。采用《中国药典》（2010年版）二部收载的紫外分光光度法，分别为93.60%、91.10%、92.00%。

3 讨论

本文采用的高效液相色谱法测定甲硝唑片的溶出度，专属性强，准确度高。在320nm的波长处可有效避免杂质干扰，主峰吸收也很强。还可与甲硝唑片的含量测定在同一色谱条件下同时测定，简单易行，线性良好。与药典方法比较无明显差异，可很好地用于该品种的质量控制。