HPLC法检测设备表面盐酸普拉克索残留量

杭州朱养心药业有限公司（310011）郭艳超 李阅东 唐建飞 朱琴 任行锋 徐凯

帕金森病是一种常见的中枢神经系统变性疾病，常见于老年人。普拉克索（pramipexole）是1997年经FDA批准上市的新型抗帕金森病的新药，能有效激动多巴胺D2，亚群受体（D2、D3、D4），并对D3亚型受体有最高的亲和力，也是第一个作用于D3受体的药物[1]。盐酸普拉克索能够有效的改善早期及晚期帕金森病的运动症状，延缓和减轻左旋多巴相关运动并发症的发生和程度，并能缓解帕金森伴发的抑郁症状[2][3]。本研究根据《药品GMP指南》中的内容[4]对设备表面盐酸普拉克索残留的检测方法进行了考察。

1 仪器与试剂

仪器：Agilent1200/1260液相色谱仪及工作站，BT125D分析天平（塞多利斯科学仪器有限公司），KQ500E超声清洗器（中国昆山市超声仪器有限公司）；盐酸普拉克索对照品（自标，批号120201）。

试剂及试样：甲醇为色谱纯，水为纯化水，盐酸普拉克索片（公司自制）。

2 方法

2.1 色谱条件及系统适用性 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-醋酸-醋酸铵缓冲液（pH4.8，10∶90）为流动相；检测波长为264nm，进样量20μl，理论塔板数按盐酸普拉克索峰计应不低于2000。2.2 溶液制备 精密称取盐酸普拉克索对照品适量，用纯化水溶解并稀释成一定浓度溶液，摇匀，即得对照品溶液；取合适浓度的对照品溶液适量，均匀滴加涂布在面积为25cm2的不锈钢板上，制得25μg/25cm2的不锈钢板（模拟生产设备进行取样）；待溶液干后，用棉签擦拭，之后将棉签浸在5ml水中超声，取浸出液即得。

3 结果

3.1 系统适用性 精密量取浓度为5.0μg /ml对照品溶液20μl注入液相色谱仪，连续进样5次，记录色谱图，5次峰面积的RSD%为0.47%（＜2.0%），系统具有良好的适用性。

3.2 准确度试验 精密称取对照品和处方量的空白辅料，用纯化水稀释成含盐酸普拉克索分别为2.5、5.0、7.5μg/ml的回收率溶液，每个浓度3份。三个浓度平均回收率分别为100.0%、98.4%、98.9%，RSD%为0.9%。

3.3 专属性 取空白溶剂、空白辅料溶液和5.0μg/ml的供试液和对照品溶液进行测定。空白溶剂和空白辅料在主峰位置均无保留，样品溶液与对照品溶液主峰保留时间一致。结果表明，空白溶剂及空白辅料对盐酸普拉克索主峰无干扰，该方法专属性强。

3.4 检测限 将对照品溶液（5μg/ml）进行系列稀释，取稀释溶液20μl注入液相色谱仪。将信号与空白溶剂的信号进行比较，记录信噪比为3∶1时的浓度。信噪比为2.8∶1时，检测限为0.012μg/ml。

3.5 线性 取对照品适量，用纯化水配成浓度分别为2.5、4.0、5.0、6.0、7.5μg/ml的溶液，精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作图，得回归方程为：y＝29.294x-0.6641，R2＝0.9999。结果表明，盐酸普拉克索浓度在2.5～7.5μg/ml范围内，线性关系良好。

3.6 溶液稳定性 分别在0、2、4、8、12、24h测定浓度为5.0μg/ml对照品溶液和样品溶液峰面积，分别计算RSD。RSD分别为0.9%和0.6%，说明两种溶液在24小时内的稳定性良好。

3.7 取样回收率 按“2.2”项下的方法，配制成浓度为5.0μg/ml的对照溶液和供试溶液。取样回收率为90.0%。说明设备表面的大部分残留都能被擦拭下来。

4 结论

通过上述验证，说明该检测方法准确度高、专属性强、灵敏度高、线性及耐用性均良好，能够真实可靠地检测出设备表面残留的情况，为清洁提供有力的数据支持。