徐锋,郭俊英
(福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院检验科,福建 福州350014)
为适应尿液沉渣分析仪标准化的要求,UF-1000i全自动尿沉渣分析仪综合流式细胞原理、电阻抗法及荧光染色技术,定量检测尿液中的有形成分。任何仪器都存在一定的检测误差且尿中有形成分复杂,势必对红细胞和白细胞检测产生影响。但我们发现结晶、酵母样菌、上皮细胞、黏液丝均导致仪器检出错误[1],须结合镜检。为此,笔者随机抽取1258例尿标本,比较UF-1000i和手工镜检结果,探讨红细胞和白细胞检测的影响因素。现报告如下。
1.1 标本来源 随机收集1258例住院患者尿标本。
1.2 仪器和试剂 UF-1000i全自动尿沉渣分析仪,配套试剂及质控物,均购自日本Sysmex株式会社。日本Olympus显微镜和一次性专用尿沉渣计数板。
1.3 检测方法 用一次性塑料尿杯收集新鲜晨尿分成两管,每管10ml,一管用于UF-1000i尿沉渣分析仪检测,另一管以1500r/min离心5min,弃上清液,留 0.2ml,混匀后,取20μl滴入尿沉渣计数板,先用低倍镜观察全片,再用高倍镜计数有形成分。所有标本均在2h内检测完毕。正常参考值:UF-1000i:红细胞<25.0 个/μl、白细胞<25.0 个/μl;显微镜镜检:红细胞<3个/HP,白细胞<5个/HP。
1.4 统计学方法 用SPSS16.0统计软件包进行统计分析。两种方法检测阳性率比较采用χ2检验,P<0.05时差异有统计学意义。
2.1 UF-1000i和手工镜检检测红细胞和白细胞结果比较 以镜检为标准,1258例样本中UF-1000i检测红细胞阳性率、真阳性率、假阳性率分别为24.8%、57.6%、42.4%;白细胞阳性率、真阳性率、假阳性率分别为17.4%、74.8%、25.2%;手工镜检红细胞、白细胞阳性率分别为15.0%、13.3%,两种方法检测红细胞和白细胞阳性率经χ2检验,差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。
表1 UF-1000i和手工镜检检测红细胞和白细胞结果比较
2.2 UF-1000i检测红细胞和白细胞假阳性结果影响因素分析 红细胞假阳性增高:草酸钙结晶占60.6%、非晶型盐类占23.4%、酵母样菌占16.0%;白细胞假阳性增高:肾小管上皮细胞占87.3%,细菌占12.7%,见表2。
表2 UF-1000i检测红细胞和白细胞假阳性结果影响因素
2.3 UF-1000i检测红细胞和白细胞假阴性结果影响因素分析 红细胞假阴性增高:小红细胞占66.7%、影细胞占33.3%;白细胞假阴性增高:尿潴留时间过长占75.0%、黄疸占25.0%,见表3。
表3 UF-1000i检测红细胞和白细胞假阴性结果影响因素
尿液有形成分检查是尿液分析中不可缺少的重要内容,UF-1000i尿沉渣分析仪因其无离心、简单快速、重复性好、提供定量结果等优点,在临床广泛应用[2]。但由于仪器本身的局限,如不能识别病理结晶、病理管型的具体类别及肿瘤细胞,当尿中有大量结晶、酵母样菌、黏液丝等颗粒,常干扰检测结果[3]。本研究表明,UF-1000i检测尿红细胞和白细胞存在假阳性或假阴性,主要的原因是尿中有形成分的干扰。
引起UF-1000i检测尿红细胞假阳性的因素是尿中有大量的结晶(主要是草酸钙结晶)、非晶型盐类、酵母样菌。因红细胞形态、大小、染色与结晶(尤其是草酸钙结晶)、非晶型盐类相似,在散点图上有交叉分布,因此红细胞计数呈假阳性增高[4]。酵母样菌影响红细胞的原因可能由于其在散点图上分布介于RBC和WBC之间,虽然大部分情况下仪器可以区分酵母样菌与红细胞,但仍有和红细胞重叠的情况,导致仪器分析错误[5]。引起UF-1000i检测尿红细胞假阴性的因素是红细胞高度异形性,如小红细胞和影细胞等。
引起UF-1000i检测尿白细胞假阳性的原因主要为肾小管上皮细胞、细菌。因为白细胞的散射光、荧光强度及电阻抗信号,部分与肾小管上皮细胞重叠,而且白细胞大小、染色敏感度与肾小管上皮细胞相似,因此导致白细胞假阳性结果的增多[6]。由于染料对细菌膜的渗透性低,染色后荧光强度和前向散射光强度也较低,当尿中的细菌达到一定量时,相互聚集成团,其大小与白细胞相近,导致仪器误认为白细胞。本研究仅有4例白细胞检测假阴性,其中3例是尿液在膀胱潴留时间过长导致白细胞破坏,1例为黄疸标本,可能是由于胆红素的颜色干扰白细胞的检测[7]。
本文仪器法假阳性是相对于镜检法的阴性而言,而镜检法的结果相对于真实结果是存在假阴性的可能,只是非常少见,如尿中红细胞和白细胞完全溶解时,镜检是看不到的,此时镜检法的阴性即为相对于真实结果的假阴性。当红细胞和白细胞完全溶解时,UF-1000i是否能检测到尿中两者存在,对此问题有待进一步研究。
引起UF-1000i与手工镜检不符的原因主要是方法学差异。UF-1000i检测未离心标本,检测量为800μl,且线性范围宽,而手工镜检为离心标本,镜检量小于200μl,以及检验人员主观经验等都导致白细胞计数偏低。因此,出现UF-1000i检测阳性而手工镜检阴性的情况。
综上所述,UF-1000i尿沉渣分析仪是目前用于测定尿液有形成分的先进仪器,由于检测结果假阳性或假阴性的客观存在,因此,必须结合手工镜检,以确保尿液红细胞、白细胞检测结果的可靠。
[1]李炎鑫,钟亚玲.UF-100尿沉渣分析仪不能取代镜检[J].临床检验杂志,2005,23(2):156.
[2]王鸿利.实验诊断学[M].北京:人民卫生出版社,2004:115-117.
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[4]张倩春,李亚鹏.UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿中红细胞形态的临床意义[J].临床医学,2009,29(7):75-77.
[5]李一龙.UF-100尿沉渣仪红细胞测定质量探讨及对策[J].检验与临床,2009,47(31):89-90.
[6]陈小剑,陈文亥,金胜鑫,等.UF-100全自动尿沉渣仪白细胞检测影响因素探讨[J].江西医学检验,2004,22(6):519-520.
[7]秦桂娥,靳岩.UF-100尿沉渣分析仪影响因素探讨[J].国际检验医学杂志,2006,27(10):935-937.