BACTEC 9050全自动血培养仪临床应用评价

2014-03-23 18:32王茸王丽萍
当代医学 2014年4期
关键词:涂片革兰全自动

王茸 王丽萍

计算机技术的不断发展和广泛应用,提高了血培养水平的阳性率和检出效率。BACTEC9050全自动血培养仪具有培养和监测的双重性,排除了人为的干预,还减少了污染的机会,随时可以发现阳性结果,为菌血症、败血症患者的诊断和治疗提供了可靠的科学依据[1],有利于快速检出血中病原菌[2]。

1 材料与方法

1.1 一般资料 865份标本均为静脉血5~10ml,均为无菌采集于2010年1月-2012年12月来解放军第四六三医院就诊的患者,所有标本均注入BACTEC9050相应配套需氧及厌氧瓶后送往实验室进行检验。

1.2 仪器与试剂 使用的仪器为BACTEC9050和珠海迪尔生物有限公司生产的微生物鉴定系统,使用的试剂为标准菌株ATCC25922、ATCC25923 、ATCC27853、ATCC29212、ATCC90028。

1.3 方法

1.3.1 培养监测方法 细菌培养监测严格遵照BACTEC9050的操作程序进行。

1.3.2 阳性阴性鉴定方法 细菌鉴定按照传统的操作规程实施,对一些细菌可以采用手工方法。阳性的标本从仪器中取出后立即转种血琼脂和巧克力琼脂平板,在35.0℃的条件下培养箱培养过夜,并革兰染色涂片镜检,分离出细菌立即鉴定。当仪器指示阳性,通过培养没有细菌生长同时革兰染色涂片没有发现微生物的情况,则判定为假阳性。阴性的判定方法和条件为:在培养瓶中监测5d,在第5天盲种血平板孵育过夜和涂片镜检两项结果都是阴性。假阴性的判定方法和条件为:第5天盲种血平板孵育过夜以及涂片镜检发现细菌生长,鉴定后发出阳性报告,这一类为仪器漏检的阳性标本。

2 结果

2.1 阳性率 本研究共检测865份标本,共分离出103株菌,阳性率为11.9%。

2.2 阳性检出时间 本研究阳性检出时间为2~144小时,最短者为大肠埃希菌,最长者为非发酵菌,其中83株(70.87%)为24小时内检出,32株(31.06%)为24~48小时检出,6株(5.82%)为48小时以后检出。

2.3 检出微生物的种类 葡萄球菌38株(36.89%),肠杆菌科细菌45株(43.69%),链球菌属10株(9.71%),非发酵菌5株(4.85%),真菌 3株(2.91%),微球菌 2株(1.94%)。

2.4 假阴性率 在865份标本检测为阴性者中,盲传后分离出白色念株菌1株,近平滑念株菌1株,假阳性率为0.23%。

2.5 假阳性率 865份标本中共有762份检测为阴性,这其中有8份样本机器显示阳性但转种后都没有发现细菌生长,假阳性率为0.92%。

3 讨论

败血症是非常严重的全身性感染,病死率极高,但有时并无特殊的临床表现,故血液细菌培养阳性对败血症和菌血症患者非常重要[3]。

从以上内容可以看出,血培养以革兰阳性菌为主,占51.45%,阴性菌占48.55%,革兰阳性菌多为葡萄球菌,在葡萄球菌中又多为凝固酶阴性的葡萄球菌。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是革兰阴性杆菌的主要菌种。同时,真菌检出率出现上升的势头,血培养阳性的人群多为住院患者,且多为免疫功能低下和外科大手术的患者。国内的相关研究结果显示,BACTEC9050血培养仪具有检出率高和检出时间快[4-5]以及操作简便和出错率低的优点。判断血液培养方法优劣的重要指标还包括假阴性率和假阳性率。本研究的阴性血培养标本中,经盲分离出了2株真菌,提示BACTEC9050仪器的真菌培养存在一定不足。在怀疑真菌感染情况下应适当增加培养时间。在本研究中,还出现了8份假阳性结果,对患者具有较大危害,一是在真菌感染的情况下,真菌对糖的代谢能力比普通细菌要低,因此导致代谢过程中产生CO2的能力较低,进而产生了假阴性结果;二是在非发酵菌感染的情况下,只能氧化葡萄糖产酸而不能发酵葡萄糖,导致产酸产气量较发酵菌低和CO2产量很低,最终导致了假阴性。三是可能与培养瓶放入仪器前置室温或普通孵育箱中过久有关[6]。虽然BACTEC9050仪器较传统的血培养优越,但在监测系统上仍需要进一步完善。

[1]乔宁,喻华.BacT/Aler240全自动血培养仪临床应用评[J].实用医院临床杂志,2009,6(1):61-62.

[2]Mermel LA,Maki DG.Detection of bacteremia in adults:consequences of culturing an inadequate volume of blood[J].Ann Intern Med,1993,119:270-272.

[3]张凤华,王大利.双向瓶1589份血培养结果分析[J].中国微生态学杂志,2004,16(1):48

[4]濮跃晨,鲁怀伟,李华,等.全自动血培养系统检测730份需氧血培养结果分析[J].上海医学检验杂志,2000,15(3):168.

[5]张景艳,郑宏图,钟学良.BD BACTEC 9050全自动血培养仪临床分析及评价[J].当代医学,2011,17(11):150-151.

[6]陶传敏,温晓波,邝玉,等.BacT/AIert240全自动血培养仪的临床应用及评价[J].西部医学,2002,17(3):366-368.

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