血清甲胎蛋白异质体3测定在原发性肝癌早期筛查中作用

周云龙，廖志军，邓国孙，丁 罡

原发性肝癌是一种恶性程度高、早期浸润和转移性强的肿瘤，为全球第5大常见恶性肿瘤，我国肝癌的死亡率居恶性肿瘤死亡率的第2位，占全世界肝癌死亡人数的45%。早期肝癌患者接受根治性治疗，5年生存率高达70%。然而，70%左右的肝癌患者就诊时已是中晚期，只能接受姑息性治疗，严重影响其预后［1］。中晚期原发性肝癌病程发展快、预后差、死亡率高，因此，及时准确的诊断和治疗是提高生存率的关键。

本研究通过用化学发光方法检测血清分离前AFP和分离后AFP-L3，计算AFP-L3在AFP中的含量比例，评价甲胎蛋白异质体在原发性肝病早期筛查中的作用。

1 对象与方法

1.1 对象 采用回顾性分析在上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院于2010年1月至2013年6月诊断原发性肝癌患者共58例，随机抽取同期在本院诊断的慢性肝病患者58例作为对照。原发性肝癌58例，男45例，女13例;年龄36～84岁，平均61.2岁;慢性肝病患者58例，男42例，女16例;年龄25～79岁，平均59.2岁。所有原发性肝癌患者均经细胞学或病理学诊断确诊;慢性肝病患者均经临床、B超或CT检查确诊。

1.2 方法 清晨空腹抽取静脉血3～4 ml，以3 000 r/min离心10 min，分离血清置 -20℃冰箱贮存待检。AFP-L3检测试剂由北京热景生物技术有限公司提供。按照试剂说明书的要求，在柱内预先装有耦联了小扁豆凝集素的琼脂糖微量离心柱，加入待检稀释血清，可特异性地结合AFP-L3，经离心清洗洗去不结合的甲胎蛋白，然后加入洗脱液，经过离心后收集洗脱液中含有的AFP-L3，用化学发光法检测分离前血清中甲胎蛋白和洗脱液中AFP-L3的含量，计算AFP-L3占AFP总量的百分比［2］。

1.3 统计学处理 采用SPSS 21软件进行统计学分析，计量资料用均数±标准差(±s)表示，采用F检验，多因素非条件logistic回归分析，2组间的比较采用U检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

原发性肝癌组及慢性肝病组患者AFP-L3测定结果见表1。

表1 2组患者血清AFP-L3检测结果比较

3 讨论

全世界每年约有25万人新诊断为原发性肝癌。原发性肝癌发病之初较为隐匿，无特异临床症状，早期诊断困难，大多数患者往往是中晚期就诊后发现，失去良好的治疗时机，近年随着影像医学的发展，一部分小肝癌患者得以及时发现，患者5年存活率有了一定的提高。因此，早期发现、定期检测肝硬化转为肝癌的预测指标尤为重要。近年来肝癌的发病率呈明显上升趋势，治疗肝癌的关键是强调早期发现、早期诊断、早期治疗。如何早期发现原发性肝癌患者，是提高患者的5年存活率的关键［6］。

目前的早期诊断筛查主要依据是B超检查及甲胎蛋白测定的价值已经得到了广泛的认可，以甲胎蛋白＞400 μg/L为判断原发性肝癌的标准，虽特异度较高，但敏感度较低。大约只有32.9%的原发性肝癌患者甲胎蛋白水平高于上述标准。同时在病毒性肝炎和慢性肝脏疾病中，甲胎蛋白亦可见不同程度的升高，有假阳性(如病毒性肝炎、肝硬化等)和20% ～30%的假阴性，从而造成诊断的漏诊或误诊。

随着医学科技的进步，近年研究发现，甲胎蛋白并非单一成分，其存在多种异质体，根据与小扁豆凝集素(LCA)亲合强弱程度不同将甲胎蛋白分为甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)、甲胎蛋白异质体2(AFPL2)、甲胎蛋白异质体 3(AFP-L3)［2］;良性肝病时肝细胞坏死后再生性甲胎蛋白与恶性肝癌细胞产生的甲胎蛋白在糖链结构上有差异，其中肝癌组织产生的特异性甲胎蛋白为甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)，甲胎蛋白异质体 (AFP)主要存在于原发性肝癌患者血清中，对原发性肝癌的诊断具有很高的特异性［3-5］。

近年国内外研究表明，AFP-L3是肝癌高度特异性指标，比单纯检查AFP能显著提高准确率，可以不受 AFP≥400 ng标准的限制［7］。有文献报道［8］，AFP-L3阳性预测肝癌发生的正确率高达94%，本研究也再次证实，如果检测AFP-L3为阴性，就基本可以排除。本研究以AFP-L3(%)＞10%为阳性判断界限，原发性肝癌血清检测的敏感性为敏感度94.9%、特异度96.49%、阳性预测值96.5%、阳性似然比27.03。因此，笔者认为检测血清中AFP-L3对筛查原发性肝癌患者具有一定的帮助;同时，在影像学检查尚未发现肝癌的特征性占位性病变时，检测AFP-L3可以作为预测早期肝癌筛查的指标，值得推广。

［1］丁惠国.重视原发性肝癌的规范化筛查与监测［J］.北京医学，2013，35(6):409-411.

［2］曹立，孙华宝，敖琴芳，等.ROC曲线评价甲胎蛋白异质体对原发性肝癌的诊断价值［J］.实验与检验医学，2010，28(5):465-467.

［3］韩风，邱大鹏，陈伟瑜，等.AFP-L3含量测定在肝癌诊治中的意义［J］. 山东医药，2010，50(24):5.

［4］Yamamoto K，Imamura H，Matsuyama Y，et al.AFP，AFP-L3，DCP，and GP73 as markers for monitoring treatment response and recurrence and as surrogate markers of clinicopathologicalvariables of HCC［J］.J Gastroenterol，2010，45(12):1272-1282.

［5］孔祥亘，韩绍磊，郑昭敏，等.高尔基体蛋白73联合甲胎蛋白异质体在原发性肝癌诊断中的价值［J］.山东大学学报:医学版，2011，49(4):110.

［6］贾志凌，王莉，刘畅，等.甲胎蛋白异质体对肝癌诊断的临床意义［J］.中国肿瘤，2010，19(10):686-688.

［7］王利健，骆剑明，吴荣辉，等.甲胎蛋白异质体在原发性肝癌中的诊断价值［J］.中国卫生检验杂志，2012，22(11):2673-2677.

［8］龚玉华，王捷婷，高玉凤，等.甲胎蛋白异质体测定对原发性肝癌诊断的作用［J］.中国医药指南，2010，36(2):180-181.