高效液相色谱法同时测定多种杀虫剂的有效成分

屈天尧，马莉莉，王德海，吴晓波

（云南省农药检定所云南昆明 650034）

高效液相色谱法同时测定多种杀虫剂的有效成分

屈天尧，马莉莉，王德海，吴晓波

（云南省农药检定所云南昆明 650034）

建立了用高效液相色谱法测定农药市场上常见的8种杀虫剂及2种禁限用农药有效成分的分析方法。采用C18柱（150L×4.6mm），以乙腈－水为流动相，紫外检测器检测，外标法定量。结果表明，样品的加标回收率为90.0%～102.0%，相对标准偏差为0.01%～1.47%。该方法简单、快速、结果准确，可作为单剂、复配制剂同时测定其有效成分的方法。

高效液相色谱；杀虫剂；有效成分

高效液相色谱是农药分析定性、定量的有效手段，尤其对热不稳定性、强极性农药及其代谢物的分析有较广泛的使用，如用高效液相色谱法测定吡虫啉［1］、阿维菌素［2］等。近年来，在农药质量监管过程中，农药产品中非法添加其他农药但难以发现的情况时有发生，而目前多种农药的分离分析方法报道较少［3－9］。

针对上述问题，作者对蔬菜、粮食生产中常用的8种杀虫剂以及2种禁限用农药的分析方法进行了研究，采用HPLC一次进样同时分析这几种农药的有效成分，并对方法精密度和准确度进行了验证。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

岛津LC－20A高效液相色谱仪；色谱柱：C18柱，150 L×4.6 mm（Agilent）；HS－20500D型超声波清洗器；艾科普超纯水机；AB104－S电子天平（梅特勒－托利多）。

农药标准品：毒死蜱、抗蚜威、吡虫啉、久效磷、啶虫脒、敌敌畏、辛硫磷、灭多威、溴氰菊酯、克百威，质量分数≥98.0%，国家农药质量监督检验中心提供。

甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），超纯水（1812MΩ·cm）。

1.2 色谱条件

色谱柱ODS－C18柱；柱温，35℃；进样量10 μL。流动相乙腈和水，流速0.8 mL／min；梯度洗脱程序见表1。

表1 梯度洗脱程序Table 1 The program of gradient elution

1.3 溶液配制

标准溶液的配制：分别准确称取农药标准品0.125 g（精确到0.000 1 g），于25 mL容量瓶中，甲醇定容，配制成5 mg／mL的标准储备液；各取2.5 mL的标准储备液于25 mL容量瓶中，甲醇定容，各农药的质量浓度均为0.5 mg／mL。

样品溶液的配制：准确称取一定量（精确到0.1 mg）的待测试样于50 mL容量瓶中，甲醇定容，超声波振荡5 min，摇匀备用。

1.4 测定步骤

在1.2色谱条件下，待仪器基线稳定后，连续进数针标准溶液，当相邻两针相对响应值≤1.5%时，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的进样顺序进行测定。

1.5 计算公式

将测得的2针试样溶液及标准溶液中抗蚜威等10种农药的峰面积分别进行平均，试样中待测物的质量分数w按下式计算：

式中：A1为标样溶液中目标农药峰面积的平均值；A2为试样溶液中目标农药峰面积的平均值；m1为标样的质量，g；m2为试样的质量，g；w0为标样中目标农药的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的优化

2.1.1 流动相的选择

实验考察了采用梯度洗脱，甲醇－水和乙腈－水为流动相时10种农药的分离效果，发现以乙腈－水为流动相时，10种农药有较好的分离，确定了1.2的梯度洗脱条件。

2.1.2 流速的影响

采用上述优化的梯度洗脱条件分别考察了不同流动相流速对10种农药分离度的影响（固定柱温为35℃），发现流速为0.6 mL／min时，各色谱峰出峰时间延长，色谱峰变宽，不利于色谱定性；随着流速的增加，分离度增大，流速为0.8 mL／min时分离情况良好，但继续增大流速，流速为1.0 mL／min时，克百威、抗蚜威分离度的分离度达不到要求，综合考虑分离效果和流动相的用量，选择流动相流速为0.8 mL／min。

2.1.3 检测波长的选择

分别对10种农药标准溶液在190～370 nm波长范围内进行扫描，得到各农药的紫外－可见吸收光谱图，综合考虑相邻谱峰的分离情况、基线稳定性和背景干扰情况等，确定了1.2的检测波长的切换程序。

采用上述色谱条件对标准样品进行分离，谱图见图1。

2.2 精密度实验

将试样按照优化的色谱操作条件，平行测定5次，结果表明，测定结果及标准偏差、精密度良好，符合农药分析的要求。实验结果见表2。

2.3 准确度实验

2.3.1 加标回收实验

各取50 mg已知含量的农药单剂试样，分别添加0.5 mg的农药标样，测定其回收率，结果显示几种农药的添加回收率都在90.0%～102.0%之间，符合农药分析的要求。加标回收实验结果见表3。

图1 标准样品色谱图Figure 1 Chromatograms of standard samples

表2 精密度实验结果Table 2 The result of the precision

2.3.2 样品分析

收集含上述各组分的农药制剂样品10份，用产品包装上明示的标准检验方法检验，并与本方法检验结果作一对照，结果表明，方法的检测结果是可靠的，与标准方法检测结果十分接近，完全满足了分析的要求。对照实验结果见表4。

表3 加标回收实验结果Table 3 Spiked recovery experiments results

表4 对照检测实验结果Table 4 The comparison of the quantitative result

3 结论

实际样品分析表明，本方法可同时测定毒死蜱等多种农药，样品的加标回收率为90.0%～102.0%，相对标准偏差为0.01%～1.47%，该方法简单、快速、结果准确，可作为测定单剂、复配制剂同时测定其有效成分的方法。

［1］ 中化化工标准化研究所.农药标准汇编（产品卷）HG3671－2000［S］.北京：中国标准出版社，2006

［2］ 中化化工标准化研究所.农药标准汇编（产品卷）GB19336－2003［S］.北京：中国标准出版社，2006

［3］ 李英，周艳明，牛森.蔬菜、水果中氨基甲酸酯类农药多残留分析方法的研究［J］.现代科学仪器，2005 （6）：68－70.

［4］ 黄惠玲，张薇君.毛细管气相色谱法测定12种农药的有效成分［J］.色谱，2001，19（4）：347－349

［5］ 毕富春，吴国旭.20%马拉硫磷·辛硫磷乳油液相色谱分析方法研究［J］.农药科学与管理，2007 （7）：8－11.

［6］ 邓丛蕊，刘思全，杨秀利.液相色谱法同时测定辛硫磷和氯氰菊酯［J］.光谱实验室，2003（1）：59－61.

［7］ 林波，李东芹.高效液相色谱法检测26%辛·高效氯氟氰菊酯乳油含量［J］.化工技术与开发，2005 （3）：40－41.

［8］ 徐广通，郑树学，许崇娟.灭多威及其合成中间体的高效液相色谱分析测试研究［J］.山东化工，1995（4）：38－40.

［9］ 周琴，吴永凤.吡虫啉的高效液相色谱法分析［J］.广东化工，2004（1）：28－29.

Simultaneous Determination of Some Pesticides by HPLC

QU Tian－yao，MA Li－li，WANG De－hai，WU Xiao－bo

（Agrichemical Examination Section of Yunnan，Kunming 650034，China）

The method for the determination of the active ingredients of 10 pesticides by HPLC has been developed with UV detector.Using C18 column for the purification.Taking water－acetonitrile as flowing phase and the pesticides were quantified by external standard calibration curve method.The result indicates the average recoveries were 90.0%－102.0%，while the relative standard deviations were within the range of 0.01%－1.47%.The method is simple，practical and accurate for the determination of the active ingredients of individual pesticide.

HPLC；pesticides quality；active ingredients

TQ45

A

1004-275X（2014）04-0034-03

12.3969／j.issn.1004-275X.2014.04.009

收稿：2014-04-11

屈天尧（1980－）男，云南迪庆人，农艺师，主要从事农药市场监管和农药质量分析

*通信联系人：马莉莉（1979－）女，云南丽江人，农艺师，主要从事农药质量分析和农药市场监管，E－mail：ynmalili＠126.com。