调查南昌地区无偿献血人群中Rh血型抗原分布

刘福昌，王小红，许春玲，谢琪，黄辉，李榕

(南昌市血站输血研究室，江西南昌330025)

调查南昌地区无偿献血人群中Rh血型抗原分布

刘福昌，王小红，许春玲，谢琪，黄辉，李榕

(南昌市血站输血研究室，江西南昌330025)

目的了解南昌地区无偿献血人群中Rh血型抗原分布情况及其基因频率的分布规律。方法采用血型血清学方法检测献血者Rh血型，并采用血型群体遗传学研究方法，选择汉族RhD(+)献血者355例和RhD(-)献血者660例进行Rh血型表型及基因频率检测研究。结果2000年1月至2013年1月无偿献血者197 438例，确认RhD(-)692例，占0.3505%；其中187 397例为汉族献血者，确认RhD(-)660例，占0.3522%，基因频率：d为0.0593，D为0.9407；RhD(+)中单倍型基因频率分别为cDe(0.0879)、CDe(0.6586)、cDE(0.2283)和CDE(0.0252)，表型频率以CCDee(43.38%)为最高，抗原频率分别为C88.73%、c53.24%、E41.97%、e91.27%；RhD(-)中单倍型基因频率分别为cde(0.7528)、Cde(0.2157)、cdE(0.0286)和CdE(0.0029)，表型频率以ccdee(56.67%)为最高，抗原频率分别为C 39.94%、c91.82%、E6.21%、e为99.70%。结论调查南昌地区Rh血型抗原分布的特点，为建立Rh血型献血者资料库做好准备，进而为特殊输血患者个性化输血治疗提供检索依据。

Rh血型；表型；抗原频率；基因频率；无偿献血者

血型作为一种遗传性状，对于人类学和遗传学的研究具有重要的意义，ABO血型和Rh血型另一方面对于人类临床输血的意义非凡，ABO和Rh血型虽已广泛为临床所关注，但是由于Rh血型抗原在不同地区的分布具有一定的差异性，因此，有必要了解和掌握本地区Rh血型抗原分布规律，建立本地区献血者Rh抗原档案，才能科学地管理献血者，更好地保证临床输血安全、及时和有效。我们对南昌地区无偿献血者Rh血型抗原进行了调查分析，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 调查对象2000年1月1日年至2013年1月1日南昌地区无偿献血者，年龄为18～55周岁，以身份证号作为惟一性建立献血档案，采用唐山现代血站管理软件Modern 5.0检索排除重复献血者，检索出献血者共计197 438例，其中187 397例为汉族献血者，并从中随机抽取汉族RhD(+)献血者355例进行了Rh其他因子的分型检测，同时对660例RhD(-)献血者进行了Rh其他因子的分型检测。

1.2 试剂抗球蛋白试剂，IgM抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e和IgG抗-D(上海血液生物医药有限责任公司)；凝聚胺试剂(安徽天一生物)；(IgM+IgG)混合抗-D(加拿大Dominion、德国Biotest、法国Diagast、美国Immucor和英国Millipore)；以上试剂为国家药品生物检定所批检合格且均在有效期内使用。

1.3 仪器GENESIS RSP150/8帝肯高智能加样系统(TECAN)，AK03A型数字血型分析仪(深圳市爱康电子有限公司)，KA-2200型血清学离心机(日本久保田公司)，HH-W420三用恒温水箱(江苏省金坛市佳美仪器有限公司)。

1.4 方法Rh血型鉴定采用血型血清学方法。先由采血点采用纸板法进行RhD初筛，再由检验科采用微板法进行RhD复检，用帝肯高智能加样系统处理血样本及试剂到96孔U型微量反应板上，由AK03A型数字血型分析仪判读结果；对于RhD初筛复检阴性的标本，由本站输血研究室采用不同厂家3批抗-D试剂抗球蛋白方法进一步进行Rh阴性确认试验，以排除弱D或不完全D。采用试管法进行Rh其他因子的测定。

1.5 统计学处理采用SPSS17.0软件分析；基因频率计算方法、期望值和Hardy-Weinberg吻合度检验采用文献[1，2]。依据(期望值-观察值)2/期望值公式求χ2值，将每一种表型χ2值相加得χ2值的总和，自由度(df)=表型数-基因数=表型9种-基因单倍型4种=5，用自由度查表，根据总χ2值，判断其吻合程度。P＞0.05为期望值与观察值差异无统计学意义，Hardy-Weinberg吻合度良好。

2 结果

2.1 Rh阴性率及基因频率南昌地区无偿献血者共计197 438例，确认RhD(-)692例，占0.3505%；其中187 397例为汉族献血者，确认汉族RhD(-) 660例，占0.3522%；基因频率：d为0.0593，D为0.9407。

2.2 Rh阳性和Rh阴性人群中单倍型基因频率RhD(+)献血人群中的单倍型基因频率分别为cDe (0.0879)、CDe(0.6586)、cDE(0.2283)和CDE(0.0252)；RhD(-)献血人群中的单倍型基因频率分别为cde (0.7528)、Cde(0.2157)、cdE(0.0286)和CdE(0.0029)。见表1。

2.3 355例RhD(+)和660例RhD(-)献血者中C、c、E和e抗原分布情况见表2。

2.4 弱D和不完全D检出情况检出弱D和不完全D共10例，其分型为Ccee(5例)＞ccEe(3例)＞CCee(1例)=ccee(1例)。

3 讨论

Rh血型系统其抗原组合表型多种多样，免疫性抗体常常引起溶血性输血反应、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血的发生。本调查南昌地区RhD(-)占0.3522%，与刘福昌等[3]2004年报道RhD(-)0.397%略有差异，但仍符合中国汉族人群Rh阴性为0.2%～0.5%的范围；d基因频率为0.0593，D基因频率为0.9407，可推测本地区基因型DD占调查人数的88.49%，Dd占调查人数的11.16%。从表1可以得知，RhD(+)中表型频率CCDee(43.38%)为最高，CcDEE和ccDee表型较少，未检出CCDEE表型；单倍型频率以CDe (0.6586)为最高，其他单倍型基因频率分别为cDe (0.0879)、cDE(0.2283)和CDE(0.0252)；与张坤莲等[4]报道沈阳地区献血者Rh抗原表型分布结果相符，体现出本地区汉族人群Rh阳性血型的分布特点。RhD(-)中表型频率ccdee(56.67%)为最高, ccdEE和CCdEe表型较少，未检出CcdEE和CCdEE表型；单倍型频率以cde(0.7528)为最高，其他单倍型基因频率分别为Cde(0.2157)、cdE(0.0286)和CdE(0.0029)。研究表明本地区RhD(-)献血人群中的单倍型基因频率与陆琼等[5]报道上海、山东地区Rh阴性献血者单倍型基因频率相比较无差异，体现出我国汉族人群Rh阴性血型分布特点，为进一步探讨Rh阴性血型在汉族人群遗传学意义提供了一定的数据参考。表1中P＜0.05，显示Rh阳性和Rh阴性无偿献血人群中期望值与观察值差异均有统计学意义，Hardy-Weinberg吻合度不是十分好，分析其原因可能是由于外来务工人员、大学生等的流动性加大流入本地区，迁移的结果使不同人群通婚使基因流动，本地区掺入外来基因，导致原来群体的基因频率有所改变[6]。

表1 355例Rh(+)和660例Rh(-)献血者表型分布

表2 献血者中C、c、E和e抗原分布

由表2可知，RhD(+)中C和e抗原频率较高，分别为88.73%和91.27%，c和E抗原频率分别为53.24%和41.97%；而RhD(-)中c和e抗原频率较高，分为91.82%和99.70%，C和E抗原频率分别为39.94%和6.21%；表明本地区中C、c、E和e抗原在RhD(+)和RhD(-)中的分布存在较大的差异。本调查显示南昌地区RhD(+)献血者中抗原频率与宋宁等[7]报道四川地区汉族供血者相似，但与英国献血者的抗原频率C(68%)、c(81%)、E(29%)和e (98%)不同[8]，表明C、c、E和e抗原分布在不同民族中存在较大的差异。本地区中C、c、E和e抗原的阳性率均低于D抗原阳性率，产生抗体的几率高于抗-D，因此，对于曾经有多次输血史和(或)妊娠史的患者输血前检查时要注意不规则抗体的筛查，对于需长期输血的患者尽可能为患者提供Rh血型C、c、E和e抗原相合的血液，避免不良输血反应的发生。

本研究D阴性中虽排除了弱D和不完全D，但未进行Del型的检测，将在今后进一步研究；另一方面Rh血型系统抗原的检测方法采用的是血清学方法，该方法分型较为简捷，但受抗血清来源等因素的限制，有可能存在定型误判。近年来随着分子生物学检测技术的不断完善，若能进一步采用基因分型予以确认，使Rh血型检测结果更加准确可靠。

本地区以汉族人群为主，今后将加大样本调查，进一步加强Rh抗原表型分布及单倍型基因频率的研究，为本地区科学地管理献血者提供参考依据，尤其为建立Rh血型献血者资料库做好准备，进而为特殊输血患者个性化输血治疗提供检索依据，将更好地为临床输血、优生学及本地区汉族人群Rh血型遗传背景积累资料等研究服务。

[1]赵桐茂.人类血型遗传学[M].北京:科学出版社,1987:231-234,351-357.

[2]王广结,王钢,郝露萍,等.如何估计Rh血型期望值和Hardy-Weinberg吻合度[J].陕西医学检验,1994,9(3):147-148.

[3]刘福昌,张清平,潘继红,等.南昌地区人群ABO、Rh血型分布调查[J].江西医学院学报,2004,44(3):88-89.

[4]张坤莲,王慧,李剑平.沈阳地区献血者Rh抗原表型分布调查[J].中国输血杂志,2008,21(12):963-964.

[5]陆琼,刘曦,王健莲,等.血清学方法检测上海地区Rh阴性献血者Rh血型表现型分布[J].临床输血与检验,2008,10(1):73-74.

[6]刘福昌,邹丽敏,姜珍一,等.南昌地区献血者中ABO血型分布及与Rh血型相关性[J].实验与检验医学,2014,32(2):212-213.

[7]宋宁,郑世荣,姚志强,等.四川地区无关供血者Rh血型系统基因分型及结果分析[J].中国输血杂志,2009,22(3):211-213.

[8]李勇,马学严.实用血液免疫学血型理论和实验技术[M].科学出版社,2006:195-196.

R193.3，R457.1+1

A

1674-1129(2014)05-0630-04

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.064

2014-03-24；

2014-05-25)