血清CysC和U-mAlb/Cr及Hcy在狼疮性微小肾损伤早期诊断中的价值

傅林金,金容香,袁海琼

(景德镇市第三人民医院检验科,江西景德镇333001)

血清CysC和U-mAlb/Cr及Hcy在狼疮性微小肾损伤早期诊断中的价值

傅林金,金容香,袁海琼

(景德镇市第三人民医院检验科,江西景德镇333001)

目的探讨血清胱抑素C(CysC)、尿微量白蛋白/肌酐比值(U-mAlb/Cr)以及同型半胱氨酸(Hcy)的检测在系统性红斑狼疮微小肾损伤诊断中的价值.方法随机选取我院健康体检者100例作为对照组;狼疮性肾炎患者70例,根据内生肌酐清除率(Ccr)所在范围按试剂说明书将患者肾功能状态的不同分为4个小组.A组(30例):Ccr>70ml/min;B组(20例):Ccr在51~70ml/min,肾功能轻度损伤;C组(12例):Ccr在31~50ml/min,肾功能中度损害;D组(8例):Ccr<30mL/min,肾功能重度损害.血清CysC的检测采用颗粒增强透射免疫比浊法;Hcy检测采用循环酶法,U-mAlb检测采用免疫比浊法,尿素氮(BUN)的检测采用酶偶联速率法:血清(尿)肌酐的检测采用碱性苦味酸法.结果A组CysC、U-mAlb/Cr比值和Hcy的异常率分别为33.3%、30.0%、26.7%,A组、B组、C组及D组4组依次三者异常率逐步升高,血清CysC+U-mAlb/Cr+Hcy联合检测在A组30例病人中,有15例升高,异常率为50%.CysC、U-mAlb/Cr比值和HcyROC曲线下面积分别为0.935、0.928、0.906;BUN和CrROC曲线下面积分别为0.695和0.679,前三者和后两者检测分别比较,P<0.05,差异均有统计学意义.结论CysC、U-mAlb/Cr比值和Hcy的检测,结合其他检查和临床表现,能检出早期狼疮肾炎微小肾损伤的病例,是反应早期狼疮肾炎肾功能微小肾损害的敏感性指标,在狼疮肾炎早期诊断中具有一定的应用价值.

血清胱抑素C;尿微量白蛋白/肌酐比值;同型半胱氨酸;狼疮性肾炎

1 材料与方法

1.1 一般资料2012年1月年-2013年8月我院门诊及住院狼疮性肾炎系统性红斑狼疮(SLE)患者70例,男32例,女38例,年龄23~66岁,平均年龄38岁.100例对照组为我院健康体检者,男35例,女65例,年龄21~69岁,平均年龄41岁.所有入选人员均排除高血压、糖尿病及其他自身免疫性疾病.根据内生肌酐清除率(Ccr)所在范围按试剂说明书将患者肾功能状态的不同分为4个小组.A组(30例):Ccr>70ml/min;B组(20例):Ccr在51~70ml/ min,肾功能轻度损伤;C组(12例):Ccr在31~50ml/ min,肾功能中度损害;D组(8例):Ccr<30mL/min,肾功能重度损害.血清(尿)肌酐的测定采用碱性苦味酸法.通过测定血和尿肌酐含量计算每分钟或24h有多少毫升或升血浆中的肌酐通过肾被清除,此值为内生肌酐清除率(Ccr)测定.Ccr与个体的大小有关,可用体表面积来矫正.Ccr(L/24h)=尿中肌酐÷血中肌酐X24h尿量(L),Ccr(ml/min)=Ccr(L/24h)X 1000÷1440,矫正后Ccr(ml/min)=矫正前CcrX1.73÷体表面积(m2).

1.2 方法血清CysC的测定采用颗粒增强透射免疫比浊法;同型半胱氨酸检测采用循环酶法,尿素氮的测定采用酶偶联速率法,血清(尿)肌酐的测定采用碱性苦味酸法,通过美国贝克曼DxC600全自动生化分析仪检测.尿微量白蛋白采用免疫比浊法,通过美国贝克曼IMMAGE800全自动免疫分析仪自动检出.所有原装美国进口试剂均由江西江东公司提供.

1.3 诊断敏感性和准确性分析以各指标的正常参考值上限即血清CysC为1.5mg/L、U-mAlb/Cr为20mg/g、Hcy为15μmol/L、BUN为7.14mmol/L和Cr为133μmol/L为诊断阈值,高于此值为异常.采用ROC曲线分析对各指标用于SLE肾功能损害诊断的准确性进行评估.

1.4 统计学处理全部数据来源于本科室生化免疫报告分析系统,采用SPSS16.0统计分析软件进行数据分析,计量数据以均数±标准差表示,组内各指标检测结果经正态性检验和方差齐性检验, P<0.05,差异有统计学意义.文中异常率采用卡方检验比较,P<0.05,差异有统计学意义.组间两两比较采用单因素方差分析,P<0.05,差异有统计学意义;不同指标间相关性分析采用Pearson相关分析,P<0.01,相关系数有高度显著性,即两变量存在相关关系.

2 结果

2.1 各组血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy、BUN及Cr的测定比较结果见表1.

表1 各组间血清CysC、U-mAlb/Cr)、Hcy、BUN及Cr水平比较

表1 各组间血清CysC、U-mAlb/Cr)、Hcy、BUN及Cr水平比较

注:A:P<0.05,与对照组比较;B:P<0.05,与A组比较;C:P<0.05,与B组比较;D:P<0.05,与C组比较.

组别例数血清CysC(mg/L)U-mAlb/Cr(mg/g)Hcy(μmol/L)BUN(mmol/L)Cr(μmol/L)对照组A组B组C组D组100 30 20 12 8 0.82±0.33 1.49±0.35A1.72±0.83B2.56±1.25C4.98±1.82D12.67±6.23 26.39±11.82 43.57±26.64B136.98±31.76C223.26±55.06D11.16±2.83 14.25±4.96 19.33±8.66B23.69±11.63C30.38±13.36D5.69±0.95 5.69±0.96 7.53±1.26B12.82±8.35C18.62±13.98D72.59±10.16 71.36±10.23 119.67±35.93B142.96±72.35C493.83±112.52D

2.2 血清CysC+U-mAlb/Cr+Hcy联合检测在A组30例病人中,有15例升高,异常率为50%,与血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy分别在A中组中异常率为33.3%、30%和26.7%比较,P<0.05.其他各组各指标异常率见表2.

表2 血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy、BUN及Cr异常率%[n(%)]

2.3 ROC曲线分析血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy ROC曲线下面积分别为0.935、0.928、0.906;BUN和Cr的ROC曲线下面积分别为0.695和0.679,前三者和后两者检测分别比较,P<0.05,差异均有统计学意义.ROC曲线见图1,其中系列1为血清CysC,系列2为U-mAlb/Cr,系列3为HCY,系列4为BUN,系列5为Cr.

图1 Roc曲线

2.4 各组间相关性分析血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy与BUN的检测结果(相关系数r分别为0.82、0.86、0.79,P<0.01)均呈正相关;血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy与Cr的检测结果(相关系数r分别为0.91、0.95、0.88,P<0.01)均呈正相关.Ccr分别与血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy、BUN、Cr的检测结果(相关系数r分别为-0.83、-0.85、-0.79、-0.71、-0.75, P<0.01)均呈负相关.

3 讨论

系统性红斑狼疮(SLE)患者约有35%~90%累及肾脏,狼疮性肾炎(LN)是继发性肾脏疾病中最常见的疾病,特别是在女性继发性肾小球疾病中占较重要地位.LN表现为高发病率和高病死率,其5年生存率比较低[1].早期发现SLE的肾脏微小改变并使用大剂量激素治疗,可逆转肾脏的病理进程并延长患者的生存率.因此,对LN的早期检测和诊断尤为重要[1].目前,临床常用的反映肾小球功能的指标是血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr).BUN首先被作为肾功能的评价指标,但它不符合内源性肾小球滤过率(GFR)标志物的要求,当GFR减少到正常值的40%以前,BUN水平升高缓慢,并且与外源性(来源于蛋白质摄入)及内源性(来源于感染、肾上腺皮质激素的应用、胃肠出血等)的尿素负荷大小有关,更重要的是肾小管对BUN有明显的被动重吸收作用.肌酐基本符合内源性GFR标志物的要求,目前国内外用血清肌酐(Cr)作为临床常规评估肾小球滤过功能受损的指标.但只有当GFR下降1/3~1/2时,Cr才有明显变化,而且受性别、饮食、肌肉量等因素的影响,所以BUN和肌酐只能反映中、重度的肾功能损害.

血清胱抑素C(CysC)来反映GFR,较Cr能更早期、特异地反映肾功能的改变[2].血清胱抑素c (CysC)是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白或γ-后球蛋白,广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种相对分子质量低,碱性非糖基化蛋白质,相对分子质量为13.3X103,由122个氨基酸残基组成,可由机体所有有核细胞产生,产生率恒定.其等电点高(pI=9.3),在血液环境中带正电荷,故不受肾小球滤过膜的孔径屏障和电荷屏障的影响,可自由通过肾小球滤过膜而被清除,是一种反映GFR变化的内源性标志物,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被完全代谢分解,不返回血液.因此,其在血液中的水平由肾小球滤过决定,而不依赖任何外来因素,如性别、年龄、饮食的影响,是一种反映GFR变化的理想同源性标志物[1].

尿微量白蛋白(U-mAlb)分子量为60KD,正常情况下不能通过肾小球滤过率膜,尿中很少,当肾小球损伤时,肾小球对蛋白质滤过屏障分子筛作用被破坏,肾小球滤过膜上负电荷减少,肾小球电荷屏障、机械屏障受损,使尿微量白蛋白滤出,提示U-mAlb是肾小球早期损伤敏感的指标[3].由于肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,在正常情况下或肾脏疾病初期肌酐排出量基本保持恒定,U-mAlb和尿Cr排出量影响因素相同,在人体中U-mAlb/Cr比值保持相对恒定,U-mAlb/Cr比值能更准确发现早期肾损害[4].早期肾损伤,肾小球微血管发生病变,由于mAlb非常敏感,升高明显,而Cr的敏感性较差,升高不明显,U-mAlb/Cr比值会升高,随着肾脏损害程度加重,mAlb升高更加明显,U-mAlb/Cr比值会进一步加大.

Hcy是蛋氨酸生成半胱氨酸过程中的中间代谢产物,损伤内皮细胞是其重要机制,Hcy能损伤血管内皮细胞并引起结构类似于血管平滑肌的系膜细胞的增生,促进肾小球电荷屏障、机械屏障受损以及囊内压升高,使白蛋白漏出增加,血液Hcy浓度升高可作为肾损害的标志物[5].肾脏在Hcy的代谢中起重要作用,人体每日产生Hcy15~20μmol/ L,仅有1.5μmol/L或更少的Hcy释放入血,经肾脏可清除血浆中2/3的Hcy,肾脏损害时,Hcy排泄、代谢障碍,导致高Hcy血症[6].

本文研究结果显示,A组血清CysC、U-mAlb/ Cr、Hcy异常率分别为33.3%、30.0%、26.7%,BUN和Cr异常率都是0.0%,即当BUN和Cr还在正常值范围时,血清CysC U-mAlb/Cr、Hcy分别有33.3%、30.0%、26.7%的患者发生了变化(超过正常范围),说明在没有采用血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy测定肾功能之前,分别会有约33.3%、30.0%、26.7%的患者发生漏诊.错过患者治疗的最佳时机,是造成LN病情恶化的主要原因.血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy联合检测的临床应用在很大程度上可以解决这个问题.U-mAlb/Cr、Hcy检测的ROC曲线下面积分别为0.935、0.928、0.906;BUN和Cr检测的ROC曲线下面积分别为0.695和0.679,前三者和后两者检测分别比较,P<0.05,差异均有统计学意义.显示CysC、U-mAlb/Cr、Hcy对狼疮性肾炎(LN)早期诊断有很高的敏感性和特异性.血清CysC+U-mAlb/Cr+Hcy联合检测在A组30例病人中,有15例升高,异常率为50%,血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy在A中组异常率分别为33.3%、30%和26.7%,P<0.05,差异均有统计学意义.显示三者联合检测比各自单独检测诊断早期LN更敏感.并且随着Ccr逐渐降低,血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy逐渐升高,因此,这三者的联合检测可以作为诊断早期LN及LN病情进展和治疗效果动态监测的重要指标.

总之,血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy的联合检测有助于准确、快速地发现早期狼疮性肾炎患者肾功能微小损伤,血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy的联合检测在临床普及应用,对狼疮性肾炎患者早期诊断具有重要价值.

[1]宋志伟,王丹,袁景芳,等.血清胱抑素C检测在狼疮性微小肾损伤早期诊断中的价值[J].国际检验医学杂志,2013,34(15):1339-1340.

[2]陈莺.改良MDRD公式、血清肌酐、肌酐清除率、血清胱抑素C、及尿微量白蛋白在慢性肾病早期诊断的应用[J].国际检验医学杂志,2009,30(5):434-435.

[3]郝建军.胱抑素C、尿微量白蛋白、脂蛋白(a)在糖尿病早期肾损害诊断中的应用价值评估[J].实验与检验医学,2011,29(2):172

[4]杨忠臣.联合检测血清胱抑素C、糖化血红蛋白和尿微量白蛋白/肌酐在2型糖尿病早期肾损伤诊断价值[J].实验与检验医学, 2013,31(3):262.

[5]卢敏,胡志坚,江永青,等.2型糖尿病HbA1c、Hcy、CysC与肾脏微血管病变的关系[J].实验与检验医学,2010,28(1):52,62.

[6]血清Hcy水平与慢性肾功能不全分期的关系[J].国际检验医学杂志,2013,34(17):2210.

R446.11+2,R593.24+2

A

1674-1129(2014)03-0312-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.03.030

2013-11-19;

2014-02-25)