大肠癌组织中膜联蛋白A1的表达及其病理意义

王保庆,张世强,陈卫花,陈冬波,薛青萍

(徐州医学院第二附属医院肿瘤内科,江苏徐州 221006)

膜联蛋白A1(Annexin A1)是钙磷脂结合蛋白Anx超家族的成员之一，在信号传导、DNA复制、细胞周期调控、细胞转化、细胞凋亡、钙离子通道的形成等众多的生理过程中发挥重要作用[1-3]。众多的研究己经证实了Annexin A1与多种肿瘤的发生关系密切，其表达在多个系统的肿瘤中明显异常，直接或间接参与肿瘤的发生[4-7]。在体外实验中，Annexin A1对肿瘤细胞系亦有不同的影响，Annexin A1抑制喉癌Hep-2细胞的生长而促进结直肠癌细胞的生长和转移[8-9]，本研究通过免疫组织化学检测大肠癌组织、癌旁组织及腺瘤性息肉组织(管状绒毛状腺瘤)中Annexin A1的表达，探讨其在大肠癌发生、发展过程中的临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2009～2013年本院病理科存档大肠癌组织蜡块的患者48例，其中男26例，女22例，年龄29～72岁，中位年龄56岁；癌旁组织(均与大肠癌标本是同一患者，但其中12例大肠癌标本无癌旁组织)36例，其中男24例，女12例；腺瘤性息肉组织15例，其中，男8例，女7例。所有病例术前均未进行放射治疗和化学治疗。标本分为大肠癌组、癌旁组织组及腺瘤性息肉组织组。

1.2方法

1.2.1主要试剂 Annexin鼠抗人单克隆抗体购自美国Abcam公司，免疫组织化学EnVisionTM染色试剂盒购自上海基因公司。

1.2.2实验方法 免疫组织化学技术采用EnVision二步法。免疫组织化学过程：组织切片经脱蜡、水化后，用柠檬酸缓冲液(pH=6.0)微波热修复抗原5 min，30 g/L A2O2封闭内源性的过氧化物酶，山羊血清封闭非特异性反应。PBS替代一抗作阴性对照。参照文献对染色结果进行判断。以大于或等于5%细胞质染色为阳性。

1.3统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行数据分析，应用χ2检验分析Annexin A1表达与大肠癌临床病理因素的相互关系，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1Annexin A1在大肠癌组织、癌旁组织及腺瘤性息肉组织的表达 Annexin A1免疫组织化学阳性产物主要定位于细胞膜和细胞质，部分患者可见胞核着色(图1)。48例患者大肠癌组织中，Annexin A1阳性表达31例(64.6%)；36例患者癌旁组织中，Annexin A1阳性表达14例(38.8%)；15例患者腺瘤性息肉组织中，Annexin A1阳性表达6例(40.0%)；大肠癌组织中，Annexin A1的阳性表达率高于癌旁组织、腺瘤性息肉组织(P<0.05)。而Annexin A1阳性表达的癌旁组织、腺瘤性息肉组织均呈轻至重度不典型增生，且两组间差异无统计学意义(P>0.05)。

图1 Annexin A1蛋白在大肠癌组织中的表达(免疫组织化学×400)

2.2Annexin A1的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系 Annexin A1的表达与大肠癌的病理类型、肿瘤最大径、有无淋巴结转移和周围组织侵犯有关，其中高分化腺癌、肿瘤最大径小于5 cm、淋巴结未转移及未侵犯周围组织器官的患者Annexin A1的阳性表达率均明显低于中或低分化腺癌、肿瘤最大径大于或等于5 cm、有淋巴结转移及伴周围组织器官侵犯的患者(P<0.05)；Annexin A1的表达与大肠癌患者的性别差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 Annexin A1的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系(n)

3 讨 论

大肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，具有高复发和高转移的特点。其5年总体生存率在60%左右，近年来发病率逐步上升，严重危害人民生活健康。目前对于大肠癌的发病及其转移尚无有效的防治手段，其发病机制和防治依然是这一领域中的研究热点。

Annexin家族是一类钙依赖的磷脂结合蛋白，细胞中含量较高，参与细胞多种重要生理功能。Annexin A1是Anx家族的成员之一，是多种受体和酶的底物，如EGF受体、蛋白激酶C、酪氨酸蛋白激酶等[2]。Annexin A1参与了包括细胞信号传导、炎性反应、DNA修复和细胞凋亡等多种细胞生理病理过程[10]。肿瘤的发生和发展是一个多因素作用、多基因参与、经过多阶段形成的、极其复杂的生物学现象，信号传导异常是肿瘤形成过程中的频发事件，而Annexin A1在胞内信号传导中发挥重要作用，故其在肿瘤形成及发展中的作用日益受到人们的关注。

本研究利用免疫组织化学对癌旁组织、腺瘤性息肉组织及大肠癌组织中Annexin A1的表达水平进行检测，探讨其在大肠癌发生、发展机制中的可能作用。研究结果显示，大肠癌组织中Annexin A1的阳性表达率明显高于癌旁组织、腺瘤性息肉组织；Annexin A1阳性表达的良性病变的黏膜上皮呈不同程度的不典型增生。高分化腺癌、肿瘤最大径小于5 cm、无淋巴结转移及未侵犯周围组织器官患者的Annexin A1阳性表达率均明显低于中或低分化腺癌、肿瘤最大径大于或等于5 cm、有淋巴结转移及伴周围组织器官侵犯患者。上述结果提示，大肠癌变过程中Annexin A1表达水平明显上调，且其表达水平与大肠癌的发展、转移及侵袭能力密切相关，阳性表达者进展快，易发生转移，侵袭能力强，说明Annexin A1表达水平可能是反映大肠癌发生、发展及临床生物学行为的重要标志物。同时检测大肠良性病变组织中Annexin A1的表达水平可能对预防和早期发现大肠癌有重要临床价值，但仍有待积累更多的病例进行更深入的研究。

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