10%烯啶虫胺水剂和60%烯啶虫胺可湿性粉剂对家蚕的急性食下毒性测定

唐小兰 陈伟国 孙海燕

(1海宁市周王庙镇农技水利服务中心， 浙江海宁 314407； 2海宁市蚕桑技术服务站， 浙江海宁 314400)

烯啶虫胺(nitenpyram)是一种新烟碱类杀虫剂，具有内吸和渗透作用，低毒、高效、无交互抗性、对作物无药害等特点，是国内新推广的一种替代高毒有机磷农药的新品种[1]；主要用于防治刺吸式口器害虫，如蚜虫、稻飞虱、白粉虱、梨木虱、叶蝉、蓟马的危害，其适用的作物为水稻、棉花、蔬菜、果树和茶叶等，既可用于茎叶处理，也可以进行土壤处理。近年来，烯啶虫胺防治水稻飞虱[2-4]、大棚蔬菜烟粉虱[5]、甘蓝蚜虫[6]均有较好的效果。从2012年开始烯啶虫胺列入浙江省农业厅推荐的主要农作物(水稻)病虫害防治药剂品种，为明确在粮桑混栽区使用烯啶虫胺对养蚕生产的安全性，我们于2013年秋季开展了相关试验。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试农药：10%烯啶虫胺水剂(AS)，农药登记证号是LS20090884，浙江世佳科技有限公司生产；60%烯啶虫胺可湿性粉剂(WP)，农药登记证号是PD20130674，江苏丰山集团有限公司生产；80%敌敌畏乳油(EC)，农药登记证号是PD85105-2，江苏省南通江山农药化工股份有限公司生产；均为市售农药制剂。

家蚕品种：白玉×秋丰，浙江省海宁市新兴蚕种制造有限公司生产。

1.2 试验方法

1.2.1 烯啶虫胺对家蚕的急性食下毒性试验 经预备试验，分别将10%烯啶虫胺AS和60%烯啶虫胺WP稀释成7个等比级差浓度的药液，取适龄桑叶浸入各浓度的药液中1 min，取出后自然晾干，将药液处理后的桑叶置于保鲜盒内，各处理区分别饲喂20头3龄起蚕，在(26.5±1) ℃、相对湿度75%～85%的人工气候箱内饲养， 重复3次，以清水处理为空白对照。24 h后改饲新鲜无毒桑叶，继续饲养至4龄饷食，每天调查中毒死亡率。采用DPS(10.15版)统计软件对药液质量浓度对数与幼虫死亡率概率值进行线性回归分析[7]，求出致死中浓度(LC50)和95%置信限。

1.2.2 10%烯啶虫胺AS对家蚕的熏蒸毒性试验 以10%烯啶虫胺AS推荐浓度为中心，设100倍液、500倍液、2 500倍液、5 000倍液和10 000倍液5个稀释浓度，各取1 mL均匀地涂于培养皿内，把培养皿放入容积为60 L(高60 cm、直径36 cm)的聚乙烯塑料桶底部，在距桶底40 cm高处的培养皿内放入30头2龄起蚕，以无毒桑叶饲喂；设80%敌敌畏EC 500倍液、4 000倍液和16 000倍液为农药对照区，另设清水为空白对照区，塑料桶用双层盖密封后放置于(30±1) ℃的恒温室内，熏蒸24 h后取出，更换新鲜无毒桑叶，每24 h调查中毒死亡率，饲养至3龄起蚕，重复3次。

1.2.3 60%烯啶虫胺WP在桑树上的内吸毒性试验 将60%烯啶虫胺WP稀释成2 500倍液(240 mg/L)、5 000倍液(120 mg/L)和10 000倍液(60 mg/L)3个浓度。处理方法分为局部桑叶喷雾和根灌。

桑树喷雾方法：将桑枝条上半部用透明塑料袋隔离，下半部桑叶分别用3种浓度的60%烯啶虫胺WP稀释药液正反面喷湿，待药液干后撤除隔离的塑料袋。

桑树根灌方法：分别取3种浓度稀释药液浇于盆栽桑根部的周围泥土，注意不污染桑叶，每盆药液量为500 mL。盆栽桑泥土质量为10 kg，折合每盆泥土中烯啶虫胺有效成分：2 500倍液处理为120 mg、5 000倍液处理为60 mg、10 000倍液处理为30 mg。再设60%烯啶虫胺WP 10 000倍稀释药液100 mL根灌处理，即每盆泥土中烯啶虫胺有效成分6 mg，与根灌500 mL的比较根灌不同药液的内吸毒性差异。

桑树喷药和根灌处理后次日起每间隔1 d采叶养蚕，分别采摘3个农药浓度的枝条下部喷药、上部不喷药和根灌3种不同类型的桑叶，共9个组合处理，以新鲜无毒桑叶为对照，每处理30头3龄起蚕，重复3次，饲养至4龄饷食，逐日调查记载各小区死亡蚕头数，直至不再出现中毒症状为止。

1.2.4 10%烯啶虫胺AS对家蚕的残毒期试验 将10%烯啶虫胺AS稀释成417倍液(240 mg/L)、834倍液(120 mg/L)、1 668倍液(60 mg/L)3个浓度药液，分别喷于10年生农桑14号桑树。喷药后次日起每间隔1 d采摘各处理区的桑叶饲喂3龄起蚕，以新鲜无毒桑叶为对照，每区各饲喂20头蚕，重复3次，逐日调查记载各小区死亡蚕头数，直至不再出现中毒症状为止。

1.2.5 烯啶虫胺对家蚕的中毒症状观察 将60%烯啶虫胺WP稀释成5 000倍液(120 mg/L)，取成熟桑叶在药液中浸渍1 min，取出后自然晾干，分别饲喂3龄起蚕和5龄第3天蚕，观察记录中毒症状。

2 结果与分析

2.1 烯啶虫胺对家蚕的急性食下毒性

从表1数据可以看出，10%烯啶虫胺AS和60%烯啶虫胺WP对3龄起蚕添毒24 h的LC50分别为14.411 5 mg/L和12.937 4 mg/L，表明2种供试烯啶虫胺制剂对家蚕的急性食下毒性基本接近。

表1烯啶虫胺对3龄家蚕的急性食下毒性

农药品种毒力回归方程相关系数(r)LC50(mg/L)95%置信限(mg/L)10%烯啶虫胺ASY=0 2513+4 0983X0 992414 411513 3791～15 518060%烯啶虫胺WPY=0 8475+3 7348X0 998112 937411 5305～14 3822

2.2 10%烯啶虫胺AS对家蚕的熏蒸毒性

10%烯啶虫胺AS 100倍液、500倍液、2 500倍液、5 000倍液和10 000倍液5个稀释浓度熏蒸处理2龄起蚕后，饲养至3龄起蚕均无中毒症状和死亡，试验区发育进度与清水对照区无差异，表明10%烯啶虫胺AS在常规使用浓度下无熏蒸毒性。而对照农药80%敌敌畏EC 500倍液、4 000倍液和16 000倍液3个稀释浓度熏蒸处理2龄起蚕后，24 h内全部死亡，表明该农药的熏蒸毒性强。

2.3 60%烯啶虫胺WP的内吸传导毒性

从表2可以看出，60%烯啶虫胺WP 3个稀释浓度直接喷药处理桑树枝条下部桑叶后间隔不同天数后采叶饲喂3龄起蚕，60%烯啶虫胺WP 10 000倍液药后13 d无中毒蚕死亡，5 000倍液、2 500倍液分别为药后17 d、19 d无中毒蚕死亡；枝条上部未直接喷药处理的桑叶饲喂3龄起蚕，间隔1 d、3 d、5 d后采叶喂蚕均无中毒症状，表明60%烯啶虫胺WP通过桑叶内吸传导作用不明显。

表260%烯啶虫胺WP在桑树上不同使用方法、药后不同天数对家蚕的毒性及桑树的内吸毒性

处理方法稀释倍数喷药后不同天数的家蚕死亡率(%)1d3d5d7d9d11d13d15d17d19d21d23d25d喷药桑叶∗250010010010010096 6763 3343 3336 676 670500010010010096 6723 3323 3310 006 67001000010053 3350 0043 3313 336 670000不喷药桑叶※2500000500000010000000根灌500mL250010010010010010010010010093 3386 6756 6726 670500010010010010010010010083 3373 3366 6720 0020 0001000033 3310010010010073 3333 3316 6700000根灌100mL10000000对照0000000000000

＊—为同1株桑树枝条下半部喷洒3种浓度稀释药液的桑叶，※—为同1株桑树枝条上半部未喷洒药液的桑叶。

用60%烯啶虫胺WP 2 500倍和5 000倍稀释药液500 mL根灌盆栽桑树，药后25 d饲喂3龄起蚕无中毒死亡，比在桑叶上直接喷洒相同浓度处理的残毒期明显延长，表明烯啶虫胺在土壤中比较稳定，而且通过桑根内吸向上传导至桑叶的作用较强；60%烯啶虫胺WP 10 000倍液根灌处理后1 d对3龄起蚕的死亡率为33.33%，药后3 d的死亡率上升到100%，可能是药物质量浓度较低，桑根内吸后传导至桑叶的药物量有一个累积过程，60%烯啶虫胺WP 10 000倍液药后17 d对3龄起蚕无中毒死亡。我们还对60%烯啶虫胺WP 10 000倍稀释药液根灌500 mL与根灌100 mL进行了比较，根灌100 mL的间隔1 d、3 d、5 d后采叶喂蚕均无中毒症状，说明根灌的药液量对内吸传导毒性的强弱影响很大。

2.4 10%烯啶虫胺AS对家蚕的残毒期

由表3可以看出，10%烯啶虫胺AS 1 668倍液(60 mg/L)喷于桑叶后饲喂3龄起蚕，5 d后蚕无中毒反应；10%烯啶虫胺AS 834倍液(120 mg/L)和417倍液(240 mg/L)在喷药后11 d对3龄起蚕无毒性作用。可以认为10%烯啶虫胺AS在桑叶上的残毒期较短，但对照表2数据，在同等质量浓度下，60%烯啶虫胺WP 3种稀释浓度药液喷于桑叶后的残毒期明显延长，10 000倍液(60 mg/L)、5 000倍液(120 mg/L)、2 500倍液(240 mg/L)分别在喷药后9 d、17 d和21 d对3龄起蚕才无毒性作用，表明不同剂型的烯啶虫胺在桑叶上的毒性降解存在较大的差异。

表310%烯啶虫胺AS喷药后不同天数的桑叶对家蚕的残毒期

稀释倍数喷药后不同天数的家蚕死亡率(%)1d3d5d7d9d11d41710010010043 3333 33083470 0060 0056 6733 3320 000166836 676 670000对照000000

2.5 家蚕的中毒症状

60%烯啶虫胺WP 5 000倍药液浸渍桑叶后饲喂3龄起蚕和5龄3 d的蚕，观察家蚕中毒症状；添毒20 min左右，3龄起蚕有拒食现象，随着家蚕中毒的加重，蚕头胸抬起、略有摇摆，胸部膨大，吐少量褐色污液，继而头胸向腹部钩起，尾部上翘向背部弯曲，蚕体呈“S”形，1 h左右有少量的蚕死亡，可见烯啶虫胺对小蚕的毒性表现很快；饲喂5龄3 d家蚕的，中毒的蚕头胸摇摆和爬动幅度较大，吐液量较多，2 h左右蚕体略有缩短，并有麻痹症状，至蚕死亡时间2 d左右。

3 讨论

3.1 烯啶虫胺对家蚕的急性毒性等级评价

本试验测定了烯啶虫胺2种制剂对3龄起蚕的急性食下毒性，10%烯啶虫胺AS和60%烯啶虫胺WP的LC50分别为14.411 5 mg/L和12.937 4 mg/L，按照对家蚕常用急性毒性分级方法属于高毒[8]；崔新倩等[9]测定的10%烯啶虫胺EC，对家蚕2龄幼虫96 h的LC50为0.445 mg/L，对家蚕的急性毒性为剧毒。两者结果的差异可能与试验方法的不同有关。

烯啶虫胺在水稻、蔬菜等作物上的使用浓度大致的有效成分是25～100 mg/L[2-6]，与对3龄起蚕的LC50值之比为2～8，参照毒性比评价法可认为烯啶虫胺对家蚕有较高的风险[10]，即烯啶虫胺供试浓度药液直接喷洒桑叶，会导致家蚕中毒死亡。

3.2 烯啶虫胺对家蚕的综合毒性评价

不同剂型的烯啶虫胺在桑叶上的残毒期差异较大，10%烯啶虫胺AS 834倍液(120 mg/L)喷药后11 d对家蚕3龄起蚕无毒，60%烯啶虫胺WP 5 000倍液(120 mg/L)喷药后17 d对家蚕3龄起蚕安全；在本试验浓度下烯啶虫胺对家蚕的安全间隔期短于毒死蜱和残杀威等桑园专用农药[11-12]，也短于多数大田常用杀虫剂的残毒期[13-15]。

利用烯啶虫胺的内吸作用，王萍等[16]用50%烯啶虫胺可溶粒剂根灌防治黄瓜蚜虫，持效期较长，每株用药量为2 000倍稀释液200～560 mL，与本试验每株盆栽桑用药量500 mL接近；本试验表明，烯啶虫胺可通过桑根从土壤中吸收向上传导至桑叶，饲喂家蚕后导致中毒死亡，但当稀释10 000倍、灌注药液量减少到每株100 mL时，对家蚕无毒性作用，而局部桑叶喷药也未表现出叶部内吸传导作用；由此可见，当桑树土壤或桑叶的持药量少以及药液供试浓度较低时，未直接受药的桑叶毒性低于家蚕的反应剂量。

综上所述，供试的2种烯啶虫胺制剂对家蚕的急性食下毒性较高，在桑叶上的残毒期中等偏短，无熏蒸作用，但可通过桑根内吸向上传导到桑叶。综合评价，烯啶虫胺对家蚕的安全风险中等偏小，应避免在喷药时飘移到附近的桑叶上，或通过水体进入桑园土壤。

[1] 李敏,成四喜,李海屏,等.新烟碱类杀虫剂烯啶虫胺述评[J].农药研究与应用,2012,16(2):1-5.

[2] 束兆林,孙庭东,张芳,等.烯啶虫胺对水稻褐飞虱田间控制效果[J].江西农业学报,2010,22(9):89-90.

[3] 许小龙,徐广春,徐德进,等.烯啶虫胺对水稻的安全性评价及对褐飞虱的生物活性[J].江西农业学报,2011,23(4):72-74.

[4] 王增平,朱炜亮,刘鑫,等.不同药剂防治水稻灰飞虱和稻蓟马试验[J].大麦与谷类科学,2010,(4):44-46.

[5] 李月红,姚淑英,陈桂华,等.烯啶虫胺、吡蚜酮及啶虫脒防治烟粉虱田间药效试验[J].浙江农业科学,2008,(2):202-203.

[6] 费春华,俞建明,陆致平.10%烯啶虫胺水剂防治甘蓝蚜虫药效试验[J].上海蔬菜,2009,(4):76.

[7] 唐启义,冯明光.DPS数据处理系统[M].北京:科学出版社,2007：327-330.

[8] 王利静,胡玲玲,胡翠琼,等.杀虫剂对家蚕的毒性与安全性评价研究[J].安徽农业科学,2008,36(29):12 776-12 777.

[9] 崔新倩,张骞,姜辉,等.新烟碱类杀虫剂对家蚕的急性毒性评价与中毒症状观察[J].蚕业科学,2012,38(2):288-291.

[10] 马惠,王开运,刘亮,等.农药对家蚕的毒性及安全性评价研究进展[J].农药科学与管理,2005,26(5):15-17.

[11] 吴福安,余茂德,程嘉翎,等.桑园治虫新药40%“乐桑”乳油对家蚕的残毒期测定[J].蚕业科学,2005,31(4):471-473.

[12] 陈伟国,钱银川,孙海燕,等.不同季节8%残杀威可湿性粉剂对家蚕的残毒期[J].蚕桑通报,2009,40(4):17-19.

[13] 陈国祥,陈伟国,钱银川.大田常用农药对家蚕的残毒试验[J].浙江农业科学,2010,(3):660-662.

[14] 陈伟国,孙海燕,董瑞华.氰氟虫腙对家蚕的毒性[J].蚕桑通报,2012,43(1):20-21.

[15] 沈忠明,陈伟国,孙海燕.农药啶虫脒对家蚕的毒性试验[J].蚕桑通报,2013,44(2):34-36.

[16] 王萍,周福才,陈学好,等.烯啶虫胺灌根对大棚黄瓜蚜虫的控制效果[J].江苏农业科学,2009,(6):168-169.