单宁酸对家兔养分利用率和氮代谢的影响

■陈赛娟 庞树坤 刘亚娟 周松涛 巩耀进 陈宝江 谷子林2，

（1.河北农业大学山区研究所，河北保定 071001；2.河北省山区农业工程技术研究中心，河北保定 071001；3.河北省涿州市动物卫生监督所，河北涿州 072750；4.河北农业大学动物科技学院，河北保定 071001）

单宁(Tannin)是一些植物的次生代谢产物，大致可分为两种，缩合单宁和水解单宁。单宁酸(Tannic acid)又称鞣酸，属于水解类单宁，具有很强的生物和药理活性[1]。过去单宁一直被认为是饲料的抗营养因子，对动物有很强的抗营养吸收作用，但近年来研究发现，对营养物质吸收有阻碍作用的是缩合单宁，而饲料中含有适量的水解单宁能够促进动物生长，提高营养物质利用率，提高动物抗应激能力和免疫力。氮污染是威胁全球生物多样性的三大主要原因之一，氮污染的危害已经越来越被人们重视。养殖场的废液中存在大量的氮，未经处理排出后，对周围环境造成严重污染。通过饲粮调控提高进食氮的利用率，减少氮向环境的排放[2-3]，是当前的研究热点。Ashisak等[4]报道在小鲤鱼饲料中添加单宁，可以使小鲤鱼血液中白细胞、血浆蛋白、白蛋白和球蛋白含量升高，血红蛋白的含量降低。杨镒峰等[5]研究表明，给育成前期雄性梅花鹿饲喂添加2%单宁的日粮，其体重和体高平均日增长显著提高，血清尿素氮浓度显著下降。Schiavone等[6]研究发现，肉仔鸡日粮中加入栗树单宁（一种可水解单宁）后，试验的前两周，0.2%栗树单宁可以明显提高肉仔鸡的日增重和日采食量，减少了饲料中氮的损失。张晓庆等[7]报道在绵羊饲粮中添加3.40 g/kg的红豆草单宁，能显著降低尿氮排出量，提高氮存留率，对饲粮蛋白质起到良好的保护效果。Cantos等[8]也报道地中海地区的伊比利亚猪每天采食超过20 g的存在于霍尔姆橡树果中的五倍子酸(一种可水解单宁)，但是机体没有任何中毒迹象。单宁酸作为安全新型饲料添加剂已经在欧盟获得批准。本课题组前期研究已发现，在獭兔日粮中添加单宁酸可以提高生长獭兔的日增重、降低料重比，但这一结果是否是由单宁酸提高了营养物质的消化率引起的，在家兔日粮中添加单宁酸是否能减少氮的排放量，提高氮的利用率，有待进一步研究。本研究拟通过消化代谢试验测定不同单宁酸水平日粮对家兔营养物质消化率和氮平衡指标的影响，探索单宁酸在家兔上的应用前景。

1 材料与方法

1.1 试验设计

选择60日龄左右体重相近的健康獭兔30只，随机分为5组，每组6个重复。分别饲喂基础饲粮和试验饲粮，Ⅰ组为对照组，饲喂基础日粮，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组，在饲喂基础日粮的基础上分别添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的单宁酸，采用全收粪尿法进行消化代谢试验，预饲期和正饲期各7 d。

1.2 试验饲粮

消化试验基础饲粮组成及营养水平参考谷子林[9]推荐的我国獭兔饲料营养标准进行设计，基础饲粮组成及营养水平见表1。试验用单宁酸由广东佛山施华特贸易有限公司提供。

表1 基础日粮配方及营养水平(风干基础)

1.3 试验方法

采用全收粪、尿法进行消化代谢试验。每只试验兔于代谢笼内单独饲养，每天饲喂2次，自由采食和饮水，自然通风和光照，准确称量与记录每天的投料量和剩料量。预试期观测每只兔的采食量，正试期记录和称量每只兔每天的实际采食量。以重复为单位每天10：00收集全部新鲜粪便和尿液称重，按日排尿量的20%左右取尿样，置于塑料瓶中，加酸，冷藏，备测尿N；收集粪便后，清除粪球上的兔毛，平均分为2份，一份用10%盐酸溶液固定挥发性氮，用于测定粗蛋白质，另一份不添加10%盐酸溶液，用于分析其他常规营养成分。试验结束，将收集的粪便充分混匀后置入烘箱中65～70℃烘干，取出后在空气中回潮24 h后称重，测定初水分后，将风干样品粉碎取部分样品装入样品瓶中密封保存备测。

试验结束时，所有兔子于晨饲前耳缘静脉采血约5 ml，倾斜静置至析出血清，3 000 r/min离心10 min，收集血清，-20℃保存待测。

1.4 测定指标和方法

总能（GE）：氧弹式热量测定仪测定法；粗蛋白质（CP）：凯氏定氮法；粗纤维（CF）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、酸性洗涤木质素（ADL）：范式纤维洗涤法测定；钙（Ca）：高锰酸钾滴定法（仲裁法）测定；磷（P）：钼黄比色法测定；干物质（DM）：先测出样品的水分含量，进一步计算出DM含量；粗脂肪（EE）：索氏抽提法；粗灰分（Ash）：常规法测定；具体测定方法详见杨胜[10]主编的《饲料分析及饲料质量检测技术》。

饲粮中营养物质的表观消化率(%)=(食入营养物质量-对应粪中营养物质量)/食入营养物质量×100；

可消化氮量(g/d)=氮采食量(NI)-粪氮量(FN)；

沉积氮量(RN)=氮采食量(NI)-粪氮量(FN)-尿氮量(UN)；

氮总利用率(%)=沉积氮量/氮采食量×100；

氮净利用率(%)=沉积氮量/可消化氮量×100。

血清样品在河北大学附属医院检验科生化室使用全自动生化分析仪（奥林巴斯Au-600，日本）进行尿素氮和总蛋白含量的测定。

1.5 数据处理

用SPSS 13.0软件对试验数据进行方差分析，结果用Mean±SD表示，差异显著时用Duncan法做多重比较。

2 结果与分析

2.1 单宁酸对家兔养分利用率的影响(见表2)

表2 家兔日粮中主要营养物质的表观消化率(%)

由表2可见，饲喂添加单宁酸的日粮组家兔，对DM、CP、Ash、GE、Ca、P、CF和NDF的表观消化率均高于对照组，其中，添加0.05%和0.15%单宁酸组的Ca的表观消化率显著高于对照组(P＜0.05)。其他营养物质的表观消化率在试验组和对照组间差异均未达到显著水平。试验组家兔对DM的表观消化率比对照组提高了9.48%～11.81%，对CP的表观消化率比对照组提高了4.27%～7.03%。

2.2 单宁酸对家兔氮代谢的影响(见表3)

由表3可知，饲喂添加单宁酸的日粮组家兔氮采食量均高于对照组家兔，而粪氮排出量和尿氮排出量并未高于对照组家兔，因此所有试验组家兔的可消化氮量和沉积氮量均高于对照组家兔，但差异不显著(P＞0.05)。试验组家兔的氮总利用率和氮净利用率均高于对照组，且随着日粮中单宁酸添加量的增加，氮总利用率和氮净利用率也呈增高趋势。其中，添加0.10%和0.15%单宁酸组的氮总利用率显著高于对照组(P＜0.05)，添加0.20%单宁酸组的氮总利用率极显著高于对照组(P＜0.01)；添加0.20%单宁酸组的氮净利用率显著高于对照组(P＜0.05)。

表3 单宁酸对家兔氮平衡的影响

2.3 单宁酸对家兔血清生化指标的影响(见表4)

由表4可知，饲喂添加单宁酸的日粮组家兔血清总蛋白含量均高于对照组家兔，其中，添加0.10%和0.20%单宁酸组的血清总蛋白含量显著高于添加0.05%单宁酸组和对照组(P＜0.05)，添加0.15%单宁酸组的血清总蛋白含量极显著高于添加0.05%单宁酸组和对照组(P＜0.01)。试验组家兔血清尿素氮含量均极显著低于对照组(P＜0.01)。

表4 单宁酸对家兔血清生化指标的影响

3 讨论

3.1 单宁酸对家兔养分利用率的影响

杨镒峰等[5]将单宁应用于育成期雄性梅花鹿的试验结果表明，添加单宁试验组梅花鹿对DM、CP和Ca的消化率或吸收率均高于空白对照组；孙展英[11]研究发现，在断奶仔猪日粮中添加单宁酸，能明显提高CP和EE的表观消化率。本研究结果表明，饲喂添加单宁酸的日粮组家兔，对DM、CP、Ash、GE、Ca、P、CF和NDF的表观消化率均高于空白对照组，与上述文献报道一致。但Dalle等[12]和刘华伟[13]的研究结果与上述结果不符，二者报道日粮中添加CT对日粮中干物质、粗蛋白、粗脂肪和粗纤维的消化率无显著性影响。

3.2 单宁酸对家兔氮代谢的影响

动物日粮中的含氮物质绝大部分是蛋白质，非蛋白质的含氮物质含量很少，可以忽略不记。蛋白质在体内分解代谢所产生的含氮物质，主要由尿、粪排出，通过测定每日日粮中的含氮量（摄入氮），以及尿和粪便中的含氮量（排出氮）就可以了解氮平衡的状态，从而估计蛋白质在体内的代谢量和动物的生长、营养等情况。

氮是畜禽排泄物中造成环境污染的主要物质，畜禽排泄物中氮的含量与日粮中的氮含量以及氮的消化率和沉积率有关。血清TP含量在一定水平上代表日粮中蛋白质的营养水平及动物对蛋白质的消化吸收程度。汪益峰等[14]研究表明，随着银鲫对蛋白质的合成代谢作用增强，血清总蛋白的含量也提高；程忠刚等[15]报道当仔猪体内蛋白质的合成作用增强、氮的沉积增强时，血清中TP含量增加。血清中BUN可以较准确地反映动物体内蛋白质代谢状况，在一定的范围内血清尿素氮含量越低则表明氮的利用效率越高[16]。赵国先等[17]研究发现，BUN是蛋白质、氨基酸代谢的终产物，与体内氮沉积率、蛋白质或氨基酸利用率有显著负相关。在本试验中，家兔日粮中添加单宁酸，减少了氮的排放量，提高了氮的沉积量，且提高了血清总蛋白含量，降低了血清尿素氮含量。随着日粮中单宁酸添加量的增加，氮总利用率和净利用率均呈增高趋势，这与前人的报道一致。

4 结论

在家兔日粮中添加单宁酸可以提高家兔对主要营养物质的表观消化率、血清总蛋白含量、氮总利用率和氮净利用率，降低血清尿素氮含量，使家兔机体处于较高水平的正氮平衡状态。