GC-MS 内标法测定苹果中哒螨灵残留量不确定度的评定

赖添财，蔡恩兴

（漳州市农业检验监测中心，福建漳州363000）

哒螨灵又名哒螨酮、速螨酮，属广谱、高效、低毒的杂环类杀虫、杀螨剂，用于防治苹果、梨、柑橘等果树上的害螨[1-3]。其作为一种广泛使用的农药，哒螨灵的残留及其相关研究情况一直倍受关注[4-7]。农业部于2012年2月14日印发了《茄果类蔬菜等37类无公害农产品检测目录》，其中，柑果和浆果类果品则要求依据国标GB/T 19648检测的农残项目检测哒螨灵等多个项目。

测量不确定度是对测量结果质量的定量表征，测量结果的可靠性很大程度上取决于不确定度的大小。测量不确定度的评定是实验室质量管理和认可评审的重要内容[8]，本研究参照《测量不确定度评定与表示》[9]，通过《水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法（GB/T 19648—2006）》[10]评定苹果中哒螨灵残留量的不确定度，为实验室质量控制提供科学、准确的依据，同时为测量其他农药残留量的不确定评定提供参考。

1 材料和方法

1.1 主要仪器与试剂

气相色谱-质谱联用仪Agilent 6890/5975B（美国安捷伦公司），电子天平（0.1 mg：CPA224S，赛多利斯；0.01 g：TMP-500，湖南仪器仪表厂），哒螨灵标准品（99.0%±0.4%，农业部环境科研监测所），环氧七氯（99.5%±0.5%，Dr.Ehrenstorfer GmbH，德国），甲苯（色谱纯），乙腈（色谱纯）。

1.2 测定方法

按照GB/T 19648—2006的要求，称取20 g苹果试样（精确至0.01 g），加入40 mL乙腈，匀浆提取1 min，加5 g氯化钠，再匀浆提取1 min，3 000 r/min离心后取20 mL上清液于45℃水浴中旋转浓缩至约1 mL，经GCB/PSA固相萃取柱净化后，样液浓缩定容为1 mL，加入50μL内标溶液，混匀，用于气相色谱质谱的测定。

1.3 数学模型

式中，X 为试样中被测物残留量（mg/kg）；cs为基质标准工作溶液中被测物的浓度（μg/mL）；A为试样溶液中被测物的色谱峰面积；As为基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；ci为试样溶液中内标物的浓度（μg/mL）；csi为基质标准工作溶液中内标物的浓度（μg/mL）；Asi为基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积；Ai为试样溶液中内标物的色谱峰面积；V 为样液最终定容体积（mL）；m 为试样溶液所代表试样的质量（g）。

2 不确定度的来源

测定不确定的主要来源为：校准过程产生的不确定度；测量重复性产生的不确定度；样品称质量产生的不确定度；体积量取产生的不确定度；回收率产生的不确定度。

3 不确定度的评定

3.1 校准过程产生的不确定度

3.1.1 标准物质产生的不确定度u1（C）

3.1.1.2 标准溶液配制过程产生的不确定度 取1 mL哒螨灵标准储备液（400μg/mL）放入100 mL容量瓶（A级）中，用甲苯定容至刻度，得到4μg/mL的标准溶液。再用5 mL分度吸量管移取5，2.5，1.25，0.5 mL标准溶液于一系列10 mL容量瓶中，每个容量瓶加0.5 mL内标溶液，定容至刻度，得到浓度分别为2.0，1.0，0.5，0.2μg/mL的标准溶液。

按照3.1.1.1计算方法，由标准溶液配制过程产生的不确定度分量列于表1，合成相对不确定度为：u11rel（C）＝0.010 8。

表1 标准溶液配制过程产生的不确定度分量

故合成标准物质配制产生的相对不确定度为：

3.1.2 标准工作曲线拟合产生的不确定度 分别取以上5种不同浓度的标准溶液1μL于气质联机重复测定2次，通过化学工作站积分得到相应的色谱峰面积A，使用内标法拟合而成的线性回归方程为A＝b C＋a（a为截距，b为斜率），计算结果如表2所示。

拟合而成的线性回归方程为：A＝190 655C-23 505（线性相关系数r＝0.999 0）。

取一阳性样品，进行3次重复检测，测得其平均质量浓度C0为1.803μg/mL，则由标准工作曲线拟合所产生的不确定度和相对不确定度分别为：

合成校准过程产生的相对不确定度为：

表2 标准曲线数据

3.2 测量重复性产生的不确定度u（）

表3 苹果中哒螨灵含量测定的结果

3.3 回收率产生的不确定度u（R）

3.4 样品称质量产生的不确定度

3.5 体积量取产生的不确定度

量取体积产生的不确定度主要由定容体积和进样体积不确定度组成，属B类不确定度。

3.5.1 定容容量产生的不确定度

3.5.1.2 添加50μL内标物引起的不确定度 根据校准结果可知，移取体积为50μL（V8）的最大允许差为±1.5%，按照正态分布（k＝3）计算，其引入的相对不确定度为：urel（V8）＝1.5%/3＝0.005。

4 合成标准不确定度

5 扩展不确定度及测定结果的表示

取包含因子k＝2，哒螨灵含量的扩展不确定度U（uc（X）×k）为0.004 4 mg/kg，故GC-MS法测定苹果中哒螨灵含量的结果表示为（0.090 0±0.004 4）mg/kg，k＝2。

6 结论

苹果中哒螨灵残留量测定不确定度的来源有称量、提取、净化、质谱测定等；由于始终使用同一份内标物，故配制内标溶液时无需精密称量，由内标物引起的不确定度仅考虑由内标液转移至标准溶液和供试样品溶液过程中引入的不确定度。

评定结果表明，标准曲线拟合过程和标准溶液配制所产生的不确定最大，而体积量取和检测重复性所产生的不确定度分量也较大。在日常检查过程中，需要注意，尽量保持气相色谱-质谱仪较高的灵敏度，并定期对所涉仪器进行检定和提高操作人员的熟练水平，从而减小测量不确定度。

［1］钱宗耀，刘河疆，王建梅，等.气相色谱-质谱联用测定水果和蔬菜中哒螨灵残留量[J].农药，2010，49（11）：828-829.

［2］李蓓，杨仁斌，余佳荣.哒螨灵的残留分析方法研究进展[J].农业环境科学学报，2007，26（增刊）：662-667.

［3］贺春娟，郑卫锋.杀螨药剂防治苹果红蜘蛛田间药效试验[J].山西农业科学，2008，36（11）：112-114.

［4］张昌朋，赵华，吴珉，等.我国小麦中农药残留及代谢研究进展[J].农药学学报，2013，15（3）：243-249.

［5］丁立平，魏云昊.茶叶中哒螨灵和噻嗪酮残留量的测定[J].农药，2011，50（5）：352-354，376.

［6］邬元娟，陈子雷，李明立，等.哒螨灵在苹果上的残留量检测与消解动态[J].农药学学报，2007，9（4）：419-422.

［7］马辉，张少军，张东海，等.哒螨灵在苹果和土壤中的残留动态研究[J].河北农业科学，2007，11（1）：108-110.

［8］郭铁筝，潘国卿，赵治国，等.荞麦仁水分测量不确定度评定[J].内蒙古农业科技，2012（5）：53，72.

［9］中国计量科学研究院.JJF 1059—1999 测量不确定评定与表示[S].北京：中国标准出版社，1999.

［10］中华人民共和国秦皇岛出入境检疫检验局.GB/T 19648—2006 水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法[S].北京：中国标准出版社，2006.