黑胡椒的浸出物测定实验研究

阿依努尔·阿不来提 吐尔孙阿衣·克力木 库尔班江·艾买提

(新疆喀什维吾尔医医院，新疆 喀什 844000)

黑胡椒为胡椒科植物胡椒pipernigrum L.的干燥近成熟或成熟果实，秋末至次春果实呈暗绿色时采收、晒干为黑胡椒。是一种常用中药和维药。有生干生热，消失开胃，通气除胀，止咳化痰，补脑止痛等功能。主要用于湿寒性或黏液质性疾病，胃寒纳差，消化不良，脘腹气张，咳嗽痰多，脑虚头疼，牙痛等症。其检查项目中《中国药典》仅对胡椒收载了性状(黑胡椒和白胡椒)、鉴别、检查、含量测定。而未对胡椒的浸出物测定做出规定。为完善胡椒检测项目、确定胡椒类质量安全、有效、确定、可控。我们就照《药典》胡椒检查项目对黑胡椒的浸出物进行测定。为胡椒的开发利用奠定基础且填充研究的空白。

1 实验内容

1.1 实验试剂:黑胡椒(新疆采摘)，黑胡椒标准品(中国药品生物制品鉴定所购买)，95%乙醇(分析纯，天津市富宇精细化工有限公司)，无水乙醇(分析纯，天津市富宇精细化工有限公司)，甲苯(上海曹杨二中化工厂)，乙酸乙酯(分析纯，天津市富宇精细化工有限公司)，丙酮(天津市东丽区大华庄镇欢坨村)，薄层层析硅胶(青岛海洋化工厂)，药用凡士林(白，城都是制药厂)，羧甲基纤维素钠CMCNa(实验试剂，天津市福晨化学试剂厂)。

1.2 实验仪器:超声波清洗器(SG3300H型，上海冠特超声仪器有限公司)，水浴锅(HH.S21－4北京长安科学仪器厂)，干燥箱(202型电热恒温干燥箱)，电子天平(BS10002型，浙江永康市正恒电子有限公司)，薄层层析展开缸(P－200*100型，上海信宜仪器有限公司)，硅胶板(青岛海洋化工厂)。

2 实验方法

2.1 水溶性浸出物测定法(测定用的供试品粉碎、使能通过二号筛、并混合均匀)。

2.1.1 冷浸法:取供试品约4g、精密称定、置250ml的锥形瓶中精密加水100ml密塞、冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥计算供试品中水溶性浸出物的含量%。

2.1.2 热浸法:取供试品4g、精密称定、置100ml的锥形瓶中，精密加水100ml，密塞称定重量、静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶、密塞、再称定重量、用水补足减失的重量、摇匀，用于燥滤器滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中、在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥中却30分钟、迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量% 。

2.1.3 实验结果:见表1。

表1 两种方法试验结果

2.2 薄层层析:取本品浸膏0.5g，加无水乙醇5ml，超声处理30分钟，过滤，滤液作为供试品溶液。另取胡椒碱对照品，置棕色量瓶中，加无水乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法“中国药典”一部附录ⅥB试验，吸取上述各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯－丙酮(7:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

2.2.1 结果:展开剂:甲苯－乙酸乙酯－丙酮(7:2:1)，显色剂:10%硫酸乙醇溶液，点样:(从左到右－1标准品2热浸法提取)供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，相同颜色(黄绿色荧光)的斑点。

通过薄层层析该斑点清晰，集中，无干扰，经空白对照液试验，认为从定性角度看，完全可以控制该药材真伪。

3 讨论

浸出物测定(determination of extractive)以药材浸出物的含量作为其质量标准的测定，一般用于该药材的活性成分或指标性成分不清或含量很低或尚无精确的定量方法时采用。本次实验中，利用热浸法和冷浸法提取黑胡椒的浸膏，再利用薄层色谱法(TLC)检测。薄层板在紫外灯下，在365nm下检视较好。方法简便、快速、准确，重现性好，可完善胡椒类检测项目和质量控制很有意义。

［1］中华人民共和国药典［S］.2010年1部.227

［2］蒋传中，李志萍，邓寒霜.丹参浸出物与灰分测定实验研究［J］.西北药学杂志，2004，4.

［3］新疆维吾尔自治区中药维吾尔药饮片炮制规定，新疆人民出版社(K)，2010－12，83－84

［4］刘勇民，维吾尔药志［M］.新疆科技卫生出版社，1999，364－367