士的宁透皮剂对家兔实验性面瘫的电生理学研究

李建伟，兰 天，闫 青，吴 倩，张文杰＊

（吉林大学 基础医学院1.生物化学及分子生物学实验中心；2.生理学系；3.遗传学系，吉林 长春130021）

面瘫是由各种原因导致的面神经受损而引起的病症，表现在面部运动功能障碍，口角流涎、口眼歪斜等症状。面瘫的真正原因尚不完全清楚，多数患者在受到凉风吹袭后突然发病，出现临床症状。多数学者认为炎症、病毒感染或过敏等导致血运供给紊乱产生面神经水肿而发生面部瘫痪。常规治疗方法大多使用类固醇激素，改变细胞生物膜的磷脂成分或膜的稳定性起到抗过敏、抗炎、抗水肿作用，使面神经水肿消退，恢复面神经功能［1］。本实验通过建立面神经麻痹模型，然后给予不同浓度的士的宁透皮膏剂，观察其对面神经诱发电位（Antidromic Nerve Evoked Potentials，AEP）和肌电图（electromyography，EMG）的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物分组及实验药品 实验动物及分组：家兔60只（2.0－2.5kg），由吉林大学实验动物中心提供。随机分为6组，每组10只。对照组、模型组、模型＋0.25%士的宁、模型＋0.5%士的宁、模型＋1%士的宁、阳性对照药物组（模型＋地塞米松组）。模型建立后，每组每只动物每日给予维生素B110 mg、维生素B1250mg。实验药品：士的宁膏剂由吉林省天风制药有限责任公司提供。

1.2 家兔面神经麻痹动物模型的制作 按文献［2，3］方法。3%戊巴比妥钠（1ml／kg）静脉注射麻醉，分离左侧面神经，在距茎乳孔0.5cm处（定位）用小号持针器钳夹面神经总干，满扣（压力约5kg，时间为5s，损伤面宽约1.5mm），结束后分层缝合肌肉、皮肤，饲养。

面神经麻痹动物实验模型制备后，给予适量青霉素，缝合切口给予消毒处理，在其靠近中枢端，皮肤外部外敷士的宁浓度为50mg、100mg和200mg（含0.25%、0.5%和1%士的宁成份）膏剂，每天2次，在30℃的室温下复苏，连续给药7天后进行各项指标的测定。地塞米松组每日给予1mg／只，肌肉注射。

1.3 实验仪器设备 电子刺激器（型号SEN－3201，日本光电公司），信号经平均叠加仪（DAT－100 NIHON KOHDEN，日本），示波器（VC－10，日本，滤波10K，时间常数0.5）。

1.4 家兔面神经逆行动作电位（AEP）和神经肌电图（EMG）的测定 刺激电极放置于面神经远端，经刺激隔离器给予15－50V，时程为100－200ms，频率1Hz的刺激脉冲。记录电极置于靠近面神经出茎突处，用银丝电极记录面神经的动作电位，信号经前置放大器放大（5000倍，滤波lK，时间常数0.25）后，用平均叠加仪叠加（叠加64次）信号显示在示波器，记录并计算动作电位的幅值及时程。

同心圆记录电极放置于口轮匝肌处，接地电极置于耳缘部位，信号经平均叠加仪（DAT－100NIHON KOHDEN，日本）、示波器（VC－10，日本，滤波10K，时间常数0.5），幅值标尺为2mV／cm，时间标尺为2 ms／cm叠加16次信号显示在示波器，用数码照相机记录原始数据，记录神经肌电图诱发电位［2，4］。

1.5 统计学方法 数值采用均数±标准差，组间比较用t检验。

2 结果

2.1 家兔面神经麻痹模型的建立 根据文献［5］通过眨眼反射、触须运动对面神经麻痹评分，诱发眨眼反射的刺激是用5ml注射器18号针头距离兔眼3 cm瞬间吹风2ml，比较双侧眨眼反射的频度、速度和幅度，评分标准：0分为双侧正常且对称；1分为比健侧减弱或延缓；2分为消失。触须运动的观察是通过比较双侧触须细微颤搐、节律性拂动的程度进行评分：0分为双侧拂动正常且对称；1分为比健侧减弱；2分为消失。将两项指标的评分相加进行面神经麻痹的评价：0、1分为无面神经麻痹；2、3分为不完全面神经麻痹；4分为完全性面神经麻痹。

结果表明：对照组与假手术组未出现面神经麻痹现象，模型组左侧面神经压榨后，与右侧面相比较，7天后10只家兔均出现2分以上面神经麻痹状态，表现为左侧眨眼反射、触须活动减弱或消失。同时，对家兔面神经干动作电位和口轮匝肌肌电图记录的结果表明，与假手术组相比较，模型组损伤面神经干动作电位的幅值从197.00±17.67降低到60.50±16.06明显减小。肌电图幅值从373.10±44.19μV降低到150.10±43.21μV，潜伏期从1.79±0.28ms延长到3.60±0.70ms（P＜0.001，n＝10）。上述结果表明，家兔面神经麻痹模型成立［5］。

2.2 士的宁对家兔面神经麻痹模型AEP和EMG的作用 实验结果提示，外敷一定浓度士的宁，可使面神经诱发电位（AEP）、肌电图（EMG）幅值增加，肌电图（EMG）潜伏期缩短，呈现剂量依赖性，其作用和地塞米松相似。表明士的宁通过修复受损动物面神经功能和神经肌肉的兴奋性，产生治疗面神经麻痹的作用。实验结果见表1和表2。

表2 士的宁对家兔神经肌电图的影响

3 讨论

面神经是人体中穿过骨管最长的脑神经，主要包括运动神经纤维和感觉神经纤维，其中大多数为运动神经纤维，因此面神经主要以运动功能为主。所以，面神经从中枢到末梢之间的任何部位受到损伤，都可以导致部分性或完全性面神经麻痹。面神经损伤大多在膝状神经节处，比较靠近面神经的中枢侧，一旦受损，面神经的变性影响范围较广，而且面神经骨管紧紧包绕着面神经，间隙较窄，受损后对其所支配的运动功能会产生严重的影响［6］。

面神经麻痹早期由于面神经水肿、脱髓鞘致神经传导速度减慢，主要表现为面神经功能性障碍，使得面神经运动潜伏期延长、波幅降低。伴随着病情的发展和电生理的异常改变病情愈加严重。因此，面神经AEP和EMG对临床面瘫的定位诊断和预后可提供可靠的理论依据，目前是临床治疗面瘫常用的生理指标。

士的宁（strychnine）又被称为番木鳖碱，是从马钱子中提取的一种生物碱，能选择性的兴奋脊髓，增强骨骼肌的紧张度。具有兴奋脊髓反射和抑菌作用，能直接扩张外周血管，提高动物耐氧能力并有抑菌作用，临床上通常被用于面瘫的治疗。士的宁进入体内以后，可以兴奋中枢神经系统的某些部位，对脊髓产生兴奋作用，提高神经肌肉的反射功能，增加肌肉紧张度。现有研究报道，静脉注射士的宁也可穿透血脑屏障，直接对中枢系统产生作用［7，8］。

本实验应用动物实验模型观察了士的宁对面瘫的作用机制，在一定剂量范围内外敷士的宁，0.5%到1%范围的士的宁可使面瘫实验动物模型组的动作电位的幅值显著增加，肌电图电位的幅值明显增加，潜伏期显著缩短。其作用明显优于激素类药物地塞米松的作用，提示士的宁可能通过某些途径，修复受损面神经，改善面神经肌肉的传导功能，恢复面部神经肌肉的兴奋性，产生治疗面神经麻痹的作用。这些结果为士的宁治疗面神经麻痹的作用机理提供了实验室的依据。

［1］陆海泉，顾月萍，汤善发.大剂量地塞米松递减法治疗Bell面瘫64例［J］.上海铁道大学学报，2000，21（3）：83.

［2］宣丽颖，张文杰，曹玉凤，等.士的宁对豚鼠实验性面瘫的治疗作用［J］.内蒙古民族大学学报（自然科学版），2010，25（4）：430.

［3］刘 稳，高志强.周围性面神经麻痹的动物模型［J］.国际耳鼻咽喉头颈外科杂志，2006，30（3）：138.

［4］彭更生，余青云.特发性面瘫肌电图及面神经运动传导速度的观察［J］.中国神经精神疾病杂志，2000，26（3）：186.

［5］刘 稳，高志强，神 平，等.单纯疱疹病毒性面神经炎的动物模型［J］.中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2006，41（1）：17.

［6］叶爱萍.面神经麻痹肌电图及面神经传导速度的观察［J］.中国临床康复，2003，7（1）：106.

［7］蔡宝昌，徐晓月，潘 扬.马钱子生物碱在大鼠体内的组织分布［J］.中国药理学通报；2004，20（4）：421.

［8］魏 宁，张松伟.马钱子的研究进展［J］.航空军医，2004；32（3）：131.