实验性动物种植体周围炎龈沟液中IL-1β与IL-6的测定

石卓瑾

种植体周围炎是由于细菌聚集和机体免疫反应引起的种植体周围软硬组织的炎症反应。种植体周围龈沟液量及其中的细胞因子能够反映种植体周围软硬组织炎症情况，可作为种植体周围炎症早期诊断的指标［1］。本实验建立比格犬实验性种植体周围炎模型，检测龈沟液量、龈沟液中IL-1β、IL-6含量的变化，探求种植体周围炎龈沟液中上述细胞因子的表达水平。

1 材料与方法

1.1 实验材料 成年比格犬5条(浙江中医药大学动物实验中心);Straumann种植体(ITI，瑞士);Whatman 3#滤纸(Whatman公司，英国);IL-1β、IL-6 试剂盒(Immunotech，法国)。

1.2 实验过程 成年比格犬5条，全麻下拔除双侧下颌第二、三、四前磨牙，同期植入种植体，每侧3枚，共计30枚。术后给予抗菌素，喂软食。3个月后行二期手术连接基桩，采用Whatman 3#滤纸测龈沟液量;采用ELISA法测其中IL-1β、IL-6含量。种植体颈部栓结丝线，停止口腔卫生护理，喂软食，建立种植体周围炎的动物模型。2个月后再次测量其龈沟液量及上述细胞因子含量。

1.3 龈沟液的采集 每颗种植体选择近远中2个位点采集龈沟液。将预先称重的Whatman 3#滤纸(2 mm*20 mm)插入龈沟内，有阻力时停止，停留30s后取出，置入EP管，称重后加入PBS 200μl，置-70℃冷贮待检。

1.4 IL-1β、IL-6的检测 采用ELISA法按照相应试剂盒使用说明操作。

1.5 统计学方法 采用SPSS 12.0进行统计分析。

2 结果

两组间龈沟液量，龈沟液内IL-1β、IL-6含量有显著差异(P ＜0.05)。龈沟液量，IL-1β、IL-6含量三者之间出现相应增长现象(表1)。

表1 种植体周围炎组与健康种植体组龈沟液量和IL-1β、IL-6水平比较(x ± s，n=30)

3 讨论

在众多炎症和免疫指标中，炎性细胞因子在种植体周围炎反应及组织重建中的作用受到特别的关注，某些炎性细胞因子已经被用于诊断和监测种植体周围组织的破坏。本实验比较正常种植体与种植体周围炎的龈沟液量变化，发现在种植体周围炎显著升高，提示龈沟液量在一定程度上反映种植体周围组织的炎症状况。

IL-1β是调节炎症反应的关键因子，可影响骨和成纤维细胞的代谢。研究表明，牙周炎患者龈沟液中IL－1β水平显著高于正常人［2］。IL-6是一种多效应细胞因子，可诱导B淋巴细胞分化并分泌免疫球蛋白;参与骨吸收。这些功能都与组织的破坏有关［3］。本实验发现种植体周围炎时龈沟液中IL-1β、IL-6水平显著升高，表明它们与种植体周围炎关系密切，可作为种植体周围炎早期诊断的有效检测指标，但其作用机制、两者之间的联系需要进一步的研究。

［1］Heasman P.Peri-implant diseases.Dent Update，2010，37(8):511-516.

［2］Hultin M.Microbiological findings and host response in patients with peri-implantitis.Clin Oral Implants Res，2002，13(4):349.

［3］吴亚菲.牙周治疗前后龈沟液中白细胞介素-6水平的变化.华西口腔医学杂志，2001，19(2):99-101.