洛伐他汀烟酸缓释片中烟酸释放度检测方法研究

蒋艳霞，秦晶晶，焦志斌

(山西康宝生物制品股份有限公司， 长治 046011)

随着社会的发展及人们生活水平的提高，我们的饮食结构发生了巨大的变化。伴随着肉蛋奶等高营养物质摄入量显著增加，高血脂病症、冠心病的发病率显著提高。临床研究发现，烟酸可以有效改善血脂代谢，同时他汀类药物在防治冠心病方面具有显著效果［1］。相比他汀类药物、贝特类药物单独用药，洛伐他汀与烟酸两者结合对血脂进行调节，在效果上具有很大优势［2］。

烟酸也称作维生素B3，或维生素PP，在体内能迅速转化为烟酰胺做为辅酶Ⅰ与辅酶Ⅱ的组成部分，进而参与到生物体内包括脂代谢在内的各种代谢过程中。烟酸在改善血脂异常，尤其在降低甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)具有显著的效果［3］。为进一步明确洛伐他汀烟酸缓释片(山西康宝生物制品股份有限公司生产)中烟酸的体外释放特征，本文对缓释片中烟酸释放度的检测方法进行了研究。

1 试剂与仪器

1.1 供试品

洛伐他汀烟酸缓释片，规格:洛伐他汀20mg，烟酸500mg;批号:111101，111102，111103;生产厂家:山西康宝生物制品股份有限公司。

1.2 对照品

烟酸对照品，规格:100 mg，批号:100434－201102，购买自中国药品生物制品检定所。

1.3 仪器

AE240电子分析天平，梅特勒－托利多仪器(上海)有限公司;TU1901紫外可见分光光度计，北京通用仪器公司;ZRS－8G智能溶出试验仪，天津天大天发公司。

2 检验方法

2.1 烟酸释放条件的筛选及确定

参考FDA(美国食品药品监督管理局)批准的ADVICOR®(niacin extended-release and lovastatin tablets)中烟酸的释放条件及检测方法，本实验采用USP(United States Pharmacopeia，美国药典)中溶出度测定法方法的Ⅰ法(篮法)，对烟酸释放度进行测定［4］。选用900 ml纯化水(pH 为5.50)为释放度介质，温度(37±0.5)℃，转速 100 r/min，烟酸溶液检测波长为262 nm。

2.2 溶出度测定方法

参照USP中烟酸原料含量检测方法［4］，本实验对烟酸溶出度的测定方法为:待溶出仪器中释放介质状态稳定，加入样品，在规定时间点取出溶剂适量(并添加同体积同温度溶剂)，滤过，精密量取续滤液5 ml，置于25 ml容量品中(30 s内完成操作)，加水，定容，混匀，参照紫外－可见分光光度法(《中国药典》2010版，附录Ⅳ A)在262 nm处测定溶液吸光度［5］。

2.2.1 烟酸释放度测定干扰性实验 按处方精密称取相应辅料和洛伐他汀原料，照上述方法配制成溶液，参考2010《中国药典》中紫外－可见分光光度法，在190－350 nm范围进行紫外吸光度扫描，见图1。

图1 洛伐他汀和辅料干扰实验Fig 1 UV-Vis spectrophotometry of the solution of lovastatin and excipients

结果显示，辅料在262 nm处基本没有吸光度，表明洛伐他汀和辅料对烟酸的测定无干扰。

2.2.2 回收率实验 精密称取干燥至恒重的烟酸对照品适量，同时按处方比例混合相应辅料，配置成体积为900 ml样品溶液，照上述方法测定各样品紫外吸光度，计算回收率，结果见表1。

表1 不同含量的烟酸回收率测定结果Tab 1 Recovery rates of different contents of niacin

实验中对照溶液中，烟酸对照品称样量为20.18 mg，不添加辅料，对照溶液的吸光度为0.688 7。

试验结果显示，烟酸浓度在9.91－24.42μg/ml范围内回收率在99.70%－100.2%，表明辅料对各浓度下烟酸的溶出度没有影响。

2.2.3 溶液稳定性 精密称取烟酸对照品20 mg，照2.2.2中方法制得样品溶液，将测定溶液在水浴(37±0.5)℃中放置，0－24 h内每间隔3 h取样，在262 nm处测定吸光度，结果见表2。

表2 烟酸溶液时间梯度测定结果Tab 2 Time gradient measurement results of niacin solutions

结果显示，烟酸溶液在24 h内紫外吸光度变化无明显差异，表明该溶液稳定性良好。

2.2.4 重复性实验 分别精密称取6份烟酸对照品20 mg，照2.2.2中方法制得样品溶液，在262 nm处测定吸光度，计算均数的RSD，结果见表3。

结果显示，用本法检测烟酸含量重复性良好。

表3 6份烟酸对照品重复性测定结果Tab 3 Repeatability test results of 6 samples of niacin solutions

2.2.5 线性实验 精密称取烟酸对照品约20 mg，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀释到刻度，摇匀作为母液。分别精密量取母液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 ml置50 ml容量瓶中，稀释至刻度后摇匀，于262 nm处测定吸光度(A)。结果见表4。

以样品浓度c为横坐标，A为纵坐标，绘制曲线。将A对相应的浓度c做回归处理，回归方程A=0.0342c+0.0016，相关系数r=0.9999，结果表明，烟酸在3.88－23.28 μg/ml浓度范围内，吸光度与溶液浓度呈良好的线性关系。

2.3 转速及取样时间的选择

选取一批洛伐他汀烟酸缓释片作为样品，分别在转速为50 r/min，75 r/min，100 r/min条件下进行释放度试验。检测样品溶出度的时间为1 h，3 h，6 h，9 h，12 h，16 h，20 h，24 h 取样(每次取样后补充同温度溶剂5 ml)，依据检测结果计算烟酸的累积释放量，并绘制释放度曲线，以进行转速和取样时间的选择，结果见图2，表5。

表4 烟酸浓度梯度测定结果Tab 4 Concentration gradient results of niacin solutions

图2 三种转速下烟酸的积累释放量Fig 2 Accumulated release quantity of niacin at the revolutions of 50，75，100 r/min

结果表明转速为100 r/min时烟酸24 h后释放较为完全，在3 h，9 h与20 h积累释放量分别为22.14%，51.78%与 89.65%，符合《中国药典》2010年版收载缓释、控释制剂指导原则，故选定取样时间为3 h，9 h 与20 h，且转速为100 r/min。

2.4 烟酸释放均一性实验

照上述烟酸释放度测定方法，分别对上述三批片剂进行释放度测定，每批样品测定6片，取样时间分别为3，6，9，12，16，20，24 h。计算每批样品在相同时间点各平行样的溶出度偏差，结果见表6。

表5 各转速下烟酸的释放量 (%)Tab 5 Accumulated release quantity of niacin at various revolutions (%)

表6 三批样品中烟酸释放度均一性试验结果 (%)Tab 6 Release homogeneity measurement results of niacin in three batches of products (%)

2.5 烟酸释放度测定方法

我们选用900 ml水作为释放介质，温度(37±0.5)℃，转速100 r/min作为烟酸的释放条件，参照上述溶出度测定方法，测定了三批样品在3 h，9 h和20 h的紫外吸光度，并通过吸光度计算了相应的烟酸溶出度。结果见表7。

结果显示，三批样品在各时间点的溶出度没有显著差异，表明样品的释放均一性较好，释放规律基本一致。

表7 三批样品中烟酸溶出度测定结果 (%)Tab 7 Niacin dissolution measurement results in three batches of samples (%)

3 结论

洛伐他汀烟酸缓释片的辅料干扰试验表明释放介质中的烟酸不会受到处方中辅料的影响。试验表面，在我们选定的释放介质中，烟酸的回收率大于99.70%，24 h内稳定性没有发生显著变化，在3.88－23.28μg/ml浓度范围内线性非常好。不同转速对烟酸体外释放速率的影响比较大。对各时间烟酸的溶出度进行测定后表明，我们选用100 r/min的转速，样品中烟酸的释放度在3 h，9 h与20 h分别为10%－30%、40%－60%和75%以上，且释放的均一性很好，其体外释放特征完全符合《中国药典》2010年版收载缓释、控释制剂指导原则的要求，而且符合Higuchi缓释释放方程的特征［6］。结果表明该方法适合洛伐他汀烟酸缓释片烟酸释放度的测定。

［1］黄艳红，许丹焰.缓释烟酸对血脂代谢的影响研究［J］.医学信息，2011，24(12):174－175.

［2］杨春光.复方烟酸和洛伐他汀缓释片的研究［D］.天津:天津大学，2005.

［3］赵进，韦建瑞，吴同果.烟酸缓释片治疗混合性高脂血症的疗效［J］.广东医学，2008，29(8):1402.

［4］美国(FDA)食品和药物管理局.美国药典:24版［S］.

［5］国家药典委员会.中国药典二部［M］.2010版.北京:中国医药科技出版社，2010.

［6］Higuchi T.Mechanism of sustained-action medication.Theoretical analysis of rate of release of solid drugs dispersed in solid matrices［J］.JPharm Sci，52(12):1145－1149.