陈明坤
在传统的血清标本分离方法中,分离速度缓慢严重延长了检验报告,尤其是急诊检验报告的发出时间,对患者的治疗造成了阻碍[1]。另外,利用传统方法制备的血清中常常遗留下纤维蛋白凝丝等杂质,在接下来的检验中,会对检验的器械造成损伤,在管道比较狭窄的器械中造成堵塞。同时,利用常规方法对血液进行分离,需要很高的操作技巧,一个小的失误就会对血液成分造成破坏,从而延长分离时间,不能满足临床对检验结果的需要。为了避免传统方法对血液检验造成的不便,提升检验速度,笔者所在科室采用肝素钠抗凝血浆作为常规生化指标检测,整个过程花费时间明显缩短,检验结果的误差比常规方法更小[2-3]。为了对肝素抗凝血浆应用于急诊生化检验的实用性和使用方法进行探讨,本科室在近期随机抽取了120例患者进行急诊生化项目检查,现报告如下。
1.1 一般资料 进行本次实验的患者均是从本院近期所收治的患者中随机抽取的,共120例,其中,男64例,年龄14~58岁,平均29.6岁,女56例,年龄16~63岁,平均32.1岁。在本次实验中,所用仪器为贝克曼DXC800。
1.2 方法 随机抽取120例患者的血清和肝素抗凝血浆进行10项急诊生化项目测定。在进行实验过程中,应该保障患者正常的生理状态。空腹抽取患者静脉血于真空肝素抗凝管和真空普通管各3.0 ml。将真空抗凝管的血液轻轻上下翻转使得肝素钠与血液混合均匀,便于肝素钠发挥血液抗凝作用,进行离心,离心速度3000 r/min,时间15 min,将血浆分离,实验备用。普通管放置在室温下进行血液自行凝固,然后在37 ℃恒温箱中水浴15~30 min,应特别注意血液在恒温箱中的保管,进行离心,离心速度和时间同真空抗凝管,将血清分离,实验备用。除去检验过程中无法使用的实验标本(脂血、溶血和黄疸等),在相同条件下进行测定。
1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0 统计软件进行数据分析,计量资料以(±s)表示,采用配对资料t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
在检验结果中,血清和血浆中所检验的K+、Na+以及Glu的测定结果比较差异具有统计学意义(P<0.05)。而钾(K+)的检验中差异更为显著(P<0.01)。其他几个检验项之间的差异无统计学意义(P>0.05)。根据血钾浓度的比较,血清钾平均浓度为(Y)0.5 mmol/L,高于血浆钾平均浓度(X),回归方程为Y=0.715X+0.499,r=0.749。这就说明,在利用肝素钠进行抗凝的真空管中的血液更适合于分离操作,方便血浆10项急诊生化项目的检验。详见表1。
组别 K+(mmol/L) Na+(mmol/L) Cl-(mmol/L) Ca2+(mmol/L) Mg2+(mmol/L) Glu(mmol/L) Bun(mmol/L)血清组 4.09±0.32 134.5±3.2 102±2.3 2.2±0.11 0.801±0.052 4.66±1.29 3.88±1.33血浆组 3.77±0.33 138.9±3.3 103±2.6 2.19±0.23 0.812±0.065 5.33±1.36 3.86±1.16 P值 0.039 0.008 0.975 0.974 0.79 0.044 0.057
续表1
患者的病情是不断发展的,对于患者来说,拥有更多的治疗时间无疑是获得了更多的机会,只有在充足的治疗时间中,才能使得急诊患者抢救成功,提高抢救的成功率,降低医疗事故的发生。在临床的治疗中,快速准确无疑是诊断工作的最基本的要求,是医务人员挽救生命的关键因素。而快捷准确的生化检验工作在很大程度上影响着诊断工作的进展,所以说,实现生化检验工作的准确迅速具有重要的意义[4]。近些年来,随着患者人数的不断上升,加快急诊生化检验报告的生成速度无疑成为了提高医院经济效益的重要手段之一。对于患者血液的急诊生化检验而言,根据常规的检验方法,耗时耗力,延长了患者的病患时间,将肝素应用于血液生化检验之中,不仅大幅度降低了急诊生化检验所耗费的时间,还为诊断和救治工作的进行提供了更为可靠的诊断报告,实现了急诊救治过程中死亡率的降低[5-6]。
肝素具有多方面的抗凝作用,是一种分子量较大的粘多糖,含有硫酸基团,自身带多个负电荷。对于血液抗凝的作用机制主要是对血液中的凝血活酶及凝血酶的形成和活性进行抑制,阻碍血液中的血小板聚集,从而达到血液抗凝的作用。具体来说,肝素能够与血液中的抗凝血酶发挥协同作用,在低浓度的环境下,血液中的IXa、Ⅷ和PF3之间不能发生有效的相互反应。肝素还能进一步强化抗凝血酶Ⅲ的抗凝作用,抑制血液中丝氨酸蛋白酶的活性,达到阻止凝血酶形成的目的[7]。同时,肝素还具有抑制凝血酶的自我催化的发生和抑制血液中的X因子的作用。由于肝素能够在多方面对血液进行抗凝,所以医务人员在进行血液生化检验中,为防止血液发生凝集影响检验结果,故多将肝素加入到将进行检验的血液中,方便检验操作,缩短时间。下面本文将对肝素对几项检验项的作用进行深入的研究。
肝素钠抗凝血浆对K+检验结果的影响,通过表1观察可知,两组检验结果中的K+浓度差异具有统计学意义(P<0.01),产生这种情况的原因主要包括以下几点:(1)溶血现象的发生。在利用肝素钠进行血浆的抗凝过程中,发生了极少量的溶血,而在普通血液标本的凝固过程中,血小板的破裂会释放出一小部分的K+到血液中,同时在离心过程中,由于离心机和离心速度的影响,使得检验对象中的部分红细胞细胞膜遭到破坏,存在于细胞内的K+流入血液。(2)K+的渗出。根据细胞膜内外浓度差的渗透原理,随着血清分离时间的延长,红细胞内的部分K+会渗出到红细胞外,升高血清中的K+浓度[8-9]。(3)肝素与血液中的K+生成肝素钾,影响离子电极对K+的测定,使血浆K+浓度低于血清K+。
肝素钠抗凝血浆对Na+检验结果的影响,通过表格数据得知,两组中的Na+含量也存在较大的差异(P<0.05),造成这种结果的原因主要是由于实验过程中发生了肝素与Na+的结合,降低了离子电极对Na+的敏感性,但是在肝素钠抗凝的血浆中含有较高的Na+,由于肝素的结合有所降低了Na+在血液中的含量,所以血浆Na+高于血清Na+浓度肝素钠抗凝血浆对Glu检验结果的影响,根据表1的检测结果可知,肝素钠抗凝血浆Glu含量明显高于血清中Glu含量,造成这种现象发生的主要原因可能是因为检验对象在进行检验的过程中,由于检验时间过长,血液中的细胞需要进行自身代谢,导致标本中部分Glu作为底物被分解消耗。相比运用肝素的抗凝血浆,由于血浆未凝集,分离过程持续时间较短,减少了细胞的代谢时间,使得Glu消耗量降低。
通过探究发现,肝素抗凝血浆中的LDH和α-HBD两种物质的含量低于血清组(P<0.05),造成这种情况发生的原因可能是因为在血液进行凝固和离心的过程中,由于离心机转速过快和操作的失误,导致血细胞在实验过程中出现了变形和被挤,细胞膜破裂,使得细胞内高浓度的LDH释放进入血清中,导致血清中的LDH含量升高,两组实验结果的差异性较大。对于α-HBD,当α-羟基丁酸存在于周围环境中,LDH的H亚基则与其发生反应,生成物为α-HBD,随着血清中的LDH数目的增多,其在血清中的含量也升高,使得两组的实验结果存在较大的差异性。
肝素钠抗凝血浆对TP和GGT检验结果的影响,在两组实验结果中,TP含量也存在一定的差异,原因可能是因为利用肝素进行抗凝后的血浆同血清比较而言,血浆中的纤维蛋白原的含量有所升高,若此时通过血浆中TP含量比血清中TP之间的比较,可以更为直接的得到体内蛋白质的总量。表格中肝素抗凝血浆中的GGT含量明显低于血清中,这就表明,血浆中GGT的活力明显高于血清,其在肝素抗凝酶催化下所进行的活力变化机制仍需进一步探讨。
就目前临床血清学应用而言,静脉血清作为生化检验分析的标本而得到了较为普遍的使用,静脉血清在很大程度上决定着患者血液中各项指标的测定以及临床诊断依据。但是,在实际应用过程中,血清的检测不一定就代表着正常指标的测定,也有可能因为标本的污染而影响测验的结果。这是因为血清分离的过程耗时较长,在整个过程中血细胞所进行的生理代谢和凝固、离心都有可能导致细胞变形、挤压和破坏等情况的发生,这些情况一旦发生,都会对检测的部分项目结果造成影响,并随着研究时间的延长导致结果差异的拉大。应用肝素进行抗凝后,可以避免血液凝固的发生,提高了血清学检测过程和结果的准确性,为临床诊断提供了更为实用和可靠的依据。
经过本实验的深入研究分析,确定肝素抗凝血浆检验适合于血浆10项急诊生化项目。将肝素运用于血浆的生化检验中,由于肝素自身的抗凝作用,能够保证检验过程中的检验对象的活性,避免因为血液凝集影响检验结果。同时,肝素的应用还有效的降低了检验所需要的时间,为临床救治提供了更为充足的救治时间,适合于急诊自动生化检验的需求。需要进行特别说明的是,在进行肝素的应用中,在凝血过程中,血小板的参与也会释放一定量的钾离子,导致血浆和血清中的钾离子的浓度存在差异,通常约为0.5 mmol/L,此浓度差在检验中应特别注意。
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