红皮病性银屑病患者外周血淋巴细胞亚群的研究

滕艳，王强

（1.辽宁中医药大学，沈阳110032；2.沈阳市第七人民医院，沈阳110003）

红皮病性银屑病是一种严重的皮肤病，属中医学“银屑疯”、“红皮”范畴，由脏腑积热，感受毒邪，毒热入营，熏蒸肌肤而发病。本病多由寻常性银屑病转化而来，刺激性药物、使用糖皮质激素、免疫抑制剂过程中突然停药或减量过快以及感染、精神压力等可诱发。目前认为银屑病是一种T细胞介导的自身免疫性疾病[1]。本文检测了15例红皮病性银屑病患者外周血中淋巴细胞亚群的表达情况，并与寻常性银屑病患者和正常人对照、分析，旨在探讨T细胞亚群在红皮病性银屑病患者外周血中的表达情况。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 15例患者为2010年1月—2012年12月沈阳市第七人民医院收治的经临床和病理确诊为红皮病性银屑病的患者，其中男10例，女5例，年龄 21～65岁，平均（57.4±8.7）岁，病程 7个月～30年，检测者1个月内未系统口服或外用皮质类固醇或其他免疫抑制剂治疗。

对照组Ⅰ为20例经皮肤科临床及病理确诊为寻常性银屑病患者，其中男13例，女7例，年龄18～62岁，平均（46.7±7.6）岁，病程 20 d～28年，检测者 1个月内未系统口服或外用皮质类固醇或其他免疫抑制剂治疗。对照组Ⅱ为20例健康体检者。

1.2 主要试剂及仪器 试剂 美国Becton-Dickinson（BD）公司生产的Simultest IMK Lymphocytes Kit检测试剂盒，其组成Isotype Control（MouseIgG1/IgG2a）；CD3-FITC/CD19-PE；CD3-FITC/CD4-PE；CD3 FITC/CD8-PE；CD3-FITC/CD16+CD56-PE；FACS Lysing Solution红细胞裂解液。流式细胞仪由美国Becton-Dickinson（BD）公司生产，型号为 FACSCalibur型。

1.3 方法 流式细胞分析法：抽取静脉血2 mL，用20 IU/mL EDTA-K2抗凝，取流式试管加荧光抗体20 μL与0.1 mL抗凝剂混匀，室温避光反应20 min，加10%溶血素混匀，室温避光反应10 min，待管内液体透亮,然后1500 r/min，离心5 min，去上清，加PBS 1 mL，轻轻混匀，1500 r/min，离心 5 min，去上清，然后加入0.5 mL PBS混匀，制成单细胞悬液标本，通过流式细胞仪对待测细胞进行检测定量分析。

1.4 统计学方法 采用SPSS15.0统计软件进行数据统计，数据采用均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验，显著性检验水平为0.05。

2 结果

2.1 观察组与对照组Ⅰ患者外周血T细胞亚群测定 观察组CD19+细胞较对照组Ⅰ降低，差异有统计学意义（P<0.05），其余各项指标比较差异，无统计学意义（P＞0.05）。见表 1。

表1 2组患者外周血淋巴细胞中T细胞亚群表达（±s）

表1 2组患者外周血淋巴细胞中T细胞亚群表达（±s）

注：观察组为红皮病性银屑病组，对照组Ⅰ为寻常性银屑病组。检验水平为0.05。

组别观察组对照组Ⅰn 1520 t P CD3+（T）70.03±5.5871.40±3.570.6840.258 CD19+（B）8.94±4.2812.67±4.091.8850.020 CD4+（Th）35.10±8.1436.09±5.520.3910.201组别观察组对照组Ⅰn 1520 t P CD8+（Ts）40.14±9.2837.34±6.890.9390.704 CD3-16+56+（NK）11.35±5.2110.78±5.820.2840.727 CD4+/CD8+（Th/Ts）0.97±0.501.01±0.300.2680.403

2.2 观察组与对照组Ⅱ外周血T细胞亚群测定观察组 CD19+细胞、CD4+细胞、CD3-16+56+细胞、CD4+/CD8+比值较对照组Ⅱ均降低，差异具有统计学意义（P＜0.05），观察组CD8+细胞较对照组Ⅱ升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 2组外周血淋巴细胞中T细胞亚群表达 （±s）

表2 2组外周血淋巴细胞中T细胞亚群表达 （±s）

注：观察组为红皮病性银屑病组，对照组Ⅱ为健康体检组。检验水平为0.05。

组别观察组对照组Ⅰn 1520 t P CD3+（T）70.03±5.5872.37±4.791.2310.961 CD19+（B）8.94±4.2811.55±1.031.8850.020 CD4+（Th）35.10±8.1442.13±1.742.6720.003组别观察组对照组Ⅰn 1520 t P CD8+（Ts）40.14±9.2830.18±2.363.1380.022 CD3-16+56+（NK）11.35±5.2112.24±1.490.5240.009 CD4+/CD8+（Th/Ts）0.97±0.501.39±0.132.5480.048

3 讨论

银屑病患者存在自身免疫紊乱[1]。细胞活化是银屑病细胞免疫紊乱的重要环节，银屑病皮损表皮和真皮内都有活化T细胞存在[2]。细胞活化、增殖，进而分泌细胞因子作用于表皮细胞，最后产生临床可见的银屑病皮损[3]。对不同淋巴细胞的CD抗原进行测定，可了解红皮病性银屑病外周血中各类淋巴细胞及其功能亚群的比例及动态变化，有助于了解本病发病机制尤其是细胞在参与免疫调节异常中的作用。

本实验结果显示，红皮病性银屑病与寻常性银屑病对照，CD19＋B细胞降低，B细胞与免疫调节、自身免疫病密切相关，主要表达CD19+，产生高亲和力抗体，行使体液免疫功能，通过数据分析可看出，B细胞功能紊乱，提示体液免疫功能紊乱可能在寻常性银屑病转变为红皮病性银屑病过程中起一定作用。

红皮病性银屑病与正常健康组比较，CD4+T细胞降低，CD8+T细胞升高，CD4+/CD8+比值降低，CD19+B细胞降低、CD3-16+56+NK细胞降低，说明红皮病性银屑病患者T细胞亚群、B细胞、NK细胞功能发生紊乱，提示免疫活性细胞功能异常，导致整个免疫调控网络失衡，最终导致病情加重。学者普遍认为CD4+/CD8+比例失衡对银屑病的发生发展非常重要[4]。 T 细胞分两个亚群 Th（CD4＋）、Ts（CD8＋），CD4+T细胞在银屑病发病环节上处于优先状态，即在早期和充分发展的皮损中主要是CD4+T细胞，而CD8+T细胞可能在皮损消退期起作用[4]。CD4+T细胞降低，可能由于周围血中一部分活化的CD4+T细胞有选择地进入皮损中致皮损中CD4+细胞增多，而致循环中CD4+细胞减少[5]。

综上所述，在疾病的发生、发展过程中体液免疫功能紊乱可能起一定作用，具体机制有待于对大样本病例数进行深一步研究。

[1] 韩凤娴，徐丽敏，赵宏丽，等.流式细胞分析法测定外周血皮肤淋巴细胞相关抗原阳性T细胞在寻常性银屑病中的表达[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2008,7（3）：158-159.

[2] 何玉情，张锡宝，曾抗.银屑病T细胞活化和信号转导的进展[J].国际皮肤性病学杂志,2008,34（1）：54-56.

[3] 韩义香，杨毅，章圣辉，等.银屑病患者外周血T细胞亚群及B7/CD28 的表达[J].中国麻风皮肤病杂志,2007,23（10）：908-909.

[4] 李玲玲，翟幸.寻常性银屑病不同病期T细胞亚群的表达[J].中国麻风皮肤病杂志,2011,27（11）:816-817.

[5] 翁孟武.免疫皮肤病学基础与临床[M].上海：上海科学技术出版社，1996：445.