不同厂家三黄片有效成分的比较

北京市东城区药品检验所（100027）尤立华 叶萌 赵希贤 聂然

三黄片是常用中药，具有清热解毒，泻火通便的功效，用于三焦热盛，目赤肿痛，口鼻生疮，咽喉肿痛，牙龈出血，心烦口渴，尿赤便秘；急性胃肠炎，痢疾等[1]。三黄片由东汉张仲景《金匮要略》泻心汤方剂得来，由大黄、黄芩、黄连3味药组成；后处方改为由大黄、盐酸小糪碱和黄芩浸膏组成，质量标准提高后收载在《中国药典》2010年版一部。《中国药典》2010年版规定，对大黄素、大黄酚，盐酸小糪碱、黄芩苷等多种有效成分进行含量测定，以此作为三黄片的质量控制指标，较好地控制了三黄片的质量。三黄片生产厂家众多，实践中发现，不同厂家生产的三黄片有效成分的含量存在一定差异，我所采用药典方法进行含量测定，对不同厂家7个批次的三黄片有效成分的含量进行比较，评价质量标准对药品质量保证的合理性和有效性。

1 仪器与试药

岛津LC2010液相色谱仪；大黄素对照品（批号：110736-201035，由中国药品生物制品检定所提供）；大黄酚对照品（批号：110736-201035，由中国药品生物制品检定所提供）；盐酸小糪碱对照品（批号：110736-201035，由中国药品生物制品检定所提供）；黄芩苷对照品（批号：110736-201035，由中国药品生物制品检定所提供）；7个样品分别为山东A厂（批号：120101；120302）、河北B厂（批号：D15051；D95033）和邯郸C厂（批号：111172；111210；111138）提供；试剂为分析纯；甲醇、乙腈为色谱纯。

2 方法

2.1 色谱条件

2.1.1 大黄素、大黄酚 色谱柱：WAT045905 C18（150mm×4.6mm，5µm）；柱温：30℃；流速：1.0 mL/min；以甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）为流动相；检测波长：254nm。

2.1.2 盐酸小糪碱 色谱柱：WAT045905 C18（150mm×4.6mm，5µm）；柱温：3 0 ℃；流速：1.0 L/m i n；以乙腈-水（1∶1，每1000mL中加入磷酸二氢钾3.4g和十二烷基硫酸钠1.7g）为流动相；检测波长：265nm。

2.1.3 黄芩苷 色谱柱：WAT045905 C18（150mm×4.6mm，5µm）；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；以甲醇-0.1%磷酸溶液（40∶60）为流动相；检测波长：280nm。

2.2 对照品溶液制备

2.2.1 取大黄素和大黄酚对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯（2∶1）的混合溶液制成每1mL含大黄素10µg、大黄酚25µg的混合溶液，即得。

2.2.2 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液即得。

2.2.3 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含25µg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液制备

附表1 7个不同厂家三黄片样品的测定结果

附表2 邯郸C厂数据分析

2.3.1 大黄素、大黄酚含量 取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过三号筛），取约0.26g精密称定，置锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，称定重量，加热回流1h，放冷，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，置烧瓶中，蒸干，加30%乙醇-盐酸（10∶1）的混合溶液15mL，置水浴中加热回流1h，立即冷却，用三氯甲烷强力振摇提取4次，每次15mL，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯（2∶1）的混合溶解，转移至25mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3.2 盐酸小糪碱含量 取本品10片，除去包衣，称定重量，研细，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇—盐酸（500∶1）的混合溶液20mL，密塞，称定重量，超声处理（功率160W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。

2.3.3 黄芩苷含量 取本品10片，除去包衣，称定重量，研细，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇—盐酸（500∶1）的混合溶液20mL，密塞，称定重量，超声处理（功率160W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。

2.4 样品的测定 取7个不同厂家的三黄片，按2.3制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10µL，按2.1色谱条件，分别测定7个样品中的大黄素、大黄酚，盐酸小糪碱、黄芩苷，以外标法计算含量，见附表1。

3 讨论

3.1 质量标准规定每片含大黄以大黄素和大黄酚的总量计，不得少于1.55mg；含盐酸小檗碱应为4.0～5.8mg，黄芩浸膏以黄芩苷计，不得少于13.5mg。以上7个批次各成分含量测定结果均符合规定。其中盐酸小檗碱的含量有上限，含量控制在一定的范围，而大黄素和大黄酚的总量、黄芩苷的含量只有下限，没有上限，表明质量标准对于以单一化学成分作为原料的处方中的成分控制严格。

3.2 比较不同有效成分含量测定的结果，从三个厂家的测定结果数据中，分析各有效成分批次间差异的多少，表明各有效成分在工艺控制过程中存在差异。以邯郸 C厂为例，比较三个批次各成分含量结果的相对偏差，数据分析见附表2。其中三批次的大黄素与大黄酚总量的相对偏差最高，盐酸小檗碱含量的相对偏差最低，表明盐酸小檗碱的含量在有效成分的控制中，批次间重现性较好，说明其工艺控制的程度较高，而大黄素和大黄酚含量测定结果的重现性不如盐酸小檗碱和黄芩苷，表明其工艺控制的程度较低，其结果与质量标准的设计思路及要求相符，证实了质量标准对于原处方改进的必要性及制定的含量测定限度的合理性。

3.3 比较各厂家有效成分的含量测定结果，三厂家各成分间存在明显的差异。分析原因应主要归于原料的选取，生产工艺的控制两方面。同一种药材，产地不同[2][3]，储存条件不同导致药材含量的差异[4]；生产工艺控制点及控制量的差异，也会造成有效成分的含量的不同，因此，厂家应严格把关原料尤其是原药材的质量，严格按照工艺规定操作控制，确保产品质量的稳定可控，以保证药品的临床疗效和安全。