沙蓬地上部分三萜皂苷类化学成分的研究

刘紫淳，李英华，曲俊业，李玉山

(沈阳药科大学 中药学院，辽宁 沈阳 110016)

中药科技

沙蓬地上部分三萜皂苷类化学成分的研究

刘紫淳，李英华，曲俊业，李玉山*

(沈阳药科大学 中药学院，辽宁 沈阳 110016)

目的：对沙蓬地上部分三萜皂苷类化学成分进行研究。方法：采用D-101大孔吸附树脂柱色谱、反复硅胶柱色谱、半微量制备型高效液相色谱和制备薄层色谱分离、纯化，根据1H-和13C-NMR波谱数据进行结构鉴定。结果：从沙蓬地上部分乙醇提取物的正丁醇萃取物中分离得到4个齐墩果烷型三萜皂苷类化合物，分别鉴定为木鳖子苷Ⅱc(1)、伪人参皂苷RT1(2)、齐墩果酸-3-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(3)、齐墩果酸-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(4)。结论：化合物2和3从藜科植物中首次分离得到，4从沙蓬属植物中首次分离得到。

沙蓬；化学成分；齐墩果烷型三萜皂苷

蒙药沙蓬为藜科植物沙蓬Agriophyllumsquarrosum(L.)Moq.的干燥地上部分，始载于《认药白晶鉴》，分布于我国东北、华北、西北、河南及西藏等地[1-2]。性平，味苦、涩；具有祛疫、清热、解毒、利尿之功效，主治瘟疫、头痛、赤目、黄疸、肾热、口舌生疮等症[3]。为了阐明其药效物质基础，课题组对沙蓬地上部分的化学成分进行研究报道[4-6]。在继续深入的研究过程中，又从沙蓬地上部分乙醇提取物的正丁醇萃取物中分离得到4个齐墩果烷型三萜皂苷类化合物，它们的化学结构式见图1。

图1 化合物1～4化学结构

1 仪器与材料

Bruker AV-400核磁共振波谱仪(瑞士Bruker公司)；LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器；色谱柱DFVELOSIL ODS-HG-5NOMURA CHEMICAI Mfg.No.2911328(300 mm×10 mm，5 μm)(日本Shimadzu公司)。

薄层色谱用硅胶GF254(10～40 μm)、柱色谱用硅胶(200～300 μm)(青岛海洋化工厂)。D-101大孔吸附树脂(沧州宝恩公司)。高效液相色谱用甲醇(分析纯，天津博迪化工股份有限公司)，水经重蒸馏后与有机溶剂按体积比配成流动相；其余试剂(分析纯，市售)。

沙蓬药材于2010年9月采自内蒙古，经沈阳药科大学李玉山教授鉴定为沙蓬Agriophyllumsquarrosum(L.)Moq.的干燥地上部分。药材标本保存在沈阳药科大学生药学教研室。

2 提取与分离

取干燥的沙蓬药材2 kg，粉碎，用体积分数70%的乙醇回流提取3次(3，2，2 h)，回收溶剂得乙醇浸膏150 g。将乙醇浸膏用0.5 L水制成悬浮溶液，依次用石油醚、正丁醇分别萃取3次，得到石油醚萃取物10 g、正丁醇萃取物70 g。全部正丁醇萃取物通过D-101大孔树脂柱色谱、半微量制备型高效液相柱色谱、硅胶柱色谱、制备薄层色谱分离、纯化，得到化合物1(17.5 mg)、2(25.5 mg)、3(30.7 mg)和4(25.6 mg)。

3 结构鉴定

化合物1：白色无定型粉末(甲醇)。在硅胶薄层色谱上与10%浓硫酸乙醇试剂喷雾后加热显紫色斑点。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)给出齐墩果烷型三萜皂苷元的7个甲基质子信号δ0.76(3H，s，H3-26)，0.79(3H，s，H3-24)，0.87(3H，s，H3-30)，0.89(3H，s，H3-29)，0.91(3H，s，H3-23)，1.00(3H，s，H3-25)，1.11(3H，s，H3-27)，1个连氧次甲基质子信号δ3.15(1H，dd，J=11.6，4.0 Hz，H-3)，1个烯质子信号δ5.21(1H，s，H-12)等特征信号。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波谱图数据(表1)给出齐墩果烷型三萜皂苷元的碳特征信号[7]，包括7个甲基碳信号δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.7(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1个连氧次甲基碳信号δ90.9(C-3)，1组双键碳信号δ123.9(C-12)和144.8(C-13)，1个羰基碳信号δ178.3(C-28)。1H-NMR谱给出3个单糖基的端基质子信号δ4.34(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)、4.52(1H，d，J=7.6 Hz，H-1″)、5.34(1H，d，J=8.2 Hz，H-1‴)。13C-NMR波谱给出3组单糖基碳信号(表2)，包括1个吡喃葡萄糖醛酸基[δ106.3(C-1′)、75.1(C-2′)、86.6(C-3′)、70.9(C-4′)、77.5(C-5′)、170.5(C-6′)]，1个吡喃木糖基[δ105.6(C-1″)、74.9(C-2″)、77.1(C-3″)、71.0(C-4″)、67.1(C-5″)]，1个吡喃葡萄糖基[δ95.7(C-1‴)、73.8(C-2‴)、78.6(C-3‴)、72.1(C-4‴)、78.2(C-5‴)、62.5(C-6‴)]。以上波谱数据与文献[8-9]数据基本一致，故鉴定化合物1为木鳖子苷(momordin)Ⅱc。

化合物2：白色无定型粉末(甲醇)。在硅胶薄层色谱，与10%浓硫酸乙醇试剂喷雾后加热显紫色斑点。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)波谱图给出齐墩果烷型三萜皂苷元上的7个甲基质子信号δ0.83(3H，s，H3-26)，0.87(3H，s，H3-24)，0.95(3H，s，H3-30)，0.97(3H，s，H3-29)，0.98(3H，s，H3-23)，1.08(3H，s，H3-25)，1.19(3H，s，H3-27)，1个连氧次甲基质子信号δ3.17(1H，m，H-3)，1个烯质子信号δ5.28(1H，br s，H-12)等特征信号。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波谱图数据(表1)给出齐墩果烷型三萜皂苷元碳特征信号[7]，包括7个甲基碳信号δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.8(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1个连氧次甲基碳信号δ90.8(C-3)，1组双键碳信号δ123.9(C-12)和144.8(C-13)，1个羰基碳信号δ178.1(C-28)，以上数据表明化合物2的皂苷元与1相同。1H-NMR谱给出3个糖基相应的端基质子信号δ4.41(1H，d，J=7.9 Hz，H-1′)、4.59(1H，d，J=7.1 Hz，H-1″)、5.41(1H，d，J=8.0 Hz，H-1‴)。13C-NMR谱给出3组单糖基碳信号(表2)，包括1个吡喃葡萄糖醛酸基[δ105.6(C-1′)、83.5(C-2′)、75.1(C-3′)、74.0(C-4′)、77.6(C-5′)、171.7(C-6′)],1个吡喃木糖基[δ106.4(C-1″)、75.0(C-2″)、77.6(C-3″)、71.0(C-4″)、67.2(C-5″)],1个吡喃葡萄糖基[δ95.8(C-1‴)、74.0(C-2‴)、78.3(C-3‴)、71.2(C-4‴)、78.7(C-5‴)、62.5(C-6‴)]。化合物2和1的区别在于C-3位的糖链上的木糖基连接在葡萄糖醛酸基的C-2位上。以上波谱数据与文献报道[10]数据基本一致，故鉴定化合物2为伪人参皂苷(pseudoginsenoside)RT1。

化合物3：白色无定型粉末(甲醇)。在硅胶薄层色谱与10%浓硫酸乙醇试剂喷雾后加热显紫色斑点。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)波谱给出三萜皂苷元上的7个甲基质子信号δ0.83(3H，s，H3-26)、0.87(3H，s，H3-24)、0.95(3H，s，H3-30)、0.97(3H，s，H3-29)、0.98(3H，s，H3-23)、1.08(3H，s，H3-25)、1.19(3H，s，H3-27)，1个连氧次甲基质子信号δ3.23(1H，m，H-3)，1个烯质子信号δ5.29(1H，br s，H-12)等特征信号。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波谱图数据(表1)给出齐墩果烷型三萜皂苷碳特征信号，包括7个甲基碳信号δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.7(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1个连氧次甲基碳信号δ90.8(C-3)，1组双键碳信号δC123.8(C-12)和144.8(C-13)，1个羰基碳信号δC178.1(C-28)，以上数据表明化合物3的苷元为齐墩果酸[7]。1H-NMR波谱给出3个糖基相应的端基质子信号δ4.42(1H，d，J=7.7 Hz，H-1′)、4.60(1H，d，J=7.4 Hz，H-1″)、5.42(1H，d，J=8.1 Hz，H-1‴)。13C-NMR波谱给出3组单糖基碳信号(表2)，包括1个吡喃葡萄糖醛酸基[δ105.6(C-1′)、72.1(C-2′)、86.8(C-3′)、70.9(C-4′)、77.6(C-5′)、ND(C-6′)],1个吡喃阿拉伯糖基[δ106.3(C-1″)、74.9(C-2″)、73.9(C-3″)、70.9(C-4″)、67.1(C-5″)],1个吡喃葡萄糖基[δ95.7(C-1‴)、75.0(C-2‴)、78.7(C-3‴)、71.1(C-4‴)、78.3(C-5‴)、62.5(C-6‴)]。经与文献值[11]对照，确定化合物3为齐墩果酸-3-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷{oleanolicacid3-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)-β-D-glucuronopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranosyl ester}。

化合物4：白色无定型粉末(甲醇)。在硅胶薄层色谱与10%浓硫酸乙醇试剂显紫色斑点。1H-NMR(CD3OD，400 MHz)波谱给出三萜皂苷元上的7个甲基质子信号δ0.84(3H，s，H3-26)、0.87(3H，s，H3-24)、0.95(3H，s，H3-30)、0.97(3H，s，H3-29)、0.98(3H，s，H3-23)、1.08(3H，s，H3-25)、1.19(3H，s，H3-27)，1个连氧次甲基质子信号δ3.2(1H，d，4.2，H-3)，1个烯质子信号δ5.29(1H，br s，H-12)等特征信号。13C-NMR(CD3OD，100 MHz)波谱图数据(表1)给出7个甲基碳信号δ16.0(C-25)、17.0(C-24)、17.8(C-26)、24.0(C-30)、26.3(C-27)、28.5(C-23)、33.5(C-29)，1个连氧次甲基碳信号δ90.8(C-3)，1组双键碳信号δ123.9(C-12)和144.8(C-13)，1个羰基碳信号δ178.1(C-28)，以上数据表明化合物4苷元亦为齐墩果酸[7]。1H-NMR波谱给出3个糖基的端基质子信号δ4.61(1H，d，J=7.2 Hz，H-1′)、4.42(1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)、5.42(1H，d，J=8.0 Hz，H-1‴)。13C-NMR波谱给出3组单糖基碳信号(表2)，包括1个吡喃阿拉伯糖基[δ105.6(C-1′)、72.1(C-2′)、86.7(C-3′)、71.0(C-4′)、67.1(C-5′)],2个吡喃葡萄糖基[δ106.3(C-1″)、73.9(C-2")、77.6(C-3″)、71.2(C-4″)、76.9(C-5″)、62.5(C-6″)]、[δ95.7(C-1‴)、75.0(C-2‴)、78.7(C-3‴)、71.2(C-4‴)、78.3(C-5‴)、62.5(C-6‴)]。经与文献值[12]对照，确定化合物4为齐墩果酸-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃阿拉伯糖基]-28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷{oleanolic acid 3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranosyl ester}。

表1 化合物1～4中皂苷元的13C-NMR数据(CD3OD，100MHz，δC)

表2 化合物1～4中单糖基的13C-NMR数据(CD3OD，100MHz，δC)

续表2

4 结论

在对沙蓬地上部分的化学成分研究过程中，从沙蓬地上部分乙醇提取物中分离得到了4个齐墩果烷型三萜皂苷类化合物，其中化合物2和3为从藜科(Chenopodiaceae)植物首次分离得到，4为首次从沙蓬属(Agriophyllum)植物中分离得到。

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TriterpeneSaponinsfromtheAerialPartsofAgriophyllumsquarrosum

LIU Zi-chun，LI Ying-hua，QU Jun-ye，LI Yu-shan*

(SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica，ShenyangPharmaceuticalUniversity，Shenyang110016，China)

Objective：To study triterpene saponins constituents fromAgriophyllumsquarrosum(L.)Moq.Methods：The chemical constituents were isolated by means of various chromatographic methods such as macro porous resin column chromatography，silica gel column chromatography and HPLC chromatography.Chemical characters and spectroscopic analysis，including1H-NMR and13C-NMR spectra，were employed for the structural identification.Results：Four compounds were isolated from then-BuOH extract of the aerial parts ofA.squarrosum，and their structures were identified as momordin Ⅱc(1)、pseudoginsenoside RT1(2)、oleanolic acid 3-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)-β-D-glucuronopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranoside(3)、oleanolic acid 3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-arabinopyranosyl]-28-O-β-D-glucopyranoside(4).Conclusion：Compounds2and3were isolated from the family Chenopodiaceae for the first time，and Compound4was isolated from the genusAgriophyllumfor the first time.

Agriophyllumsquarrosum；Chemical constituents；Olean-type saponins

2013-05-29)

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李玉山，教授，博士，主要从事生药学研究工作，Tel：(024)23986496，E-mail：lyshan888@126.com