谭 刚,谭志鑫,袁德培
湖北民族学院医学院(湖北恩施445000)
玄参(Scrophulariae Radix)为常用中药,来源于玄参科植物玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl.)的干燥根,味甘、苦、咸,性微寒。主要化学成分为环烯醚萜类、黄酮类、脂肪酸、多糖、苯丙素苷及挥发油等,具有清热凉血、滋阴降火、解毒散结的功效,多用于热入营血,温毒发斑,热病伤阴,舌绛烦渴,津伤便秘,骨蒸劳嗽,目赤,咽痛,白喉,痈肿毒疮等病症[1]。现代药理研究证实其具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗血小板聚集、抗氧化、增强免疫、镇痛解痉、保肝及降血糖等作用[2-4],临床上常用于烧伤病症的治疗。为探讨其作用及机制,本文以玄参提取物为研究对象,观察其对烧伤大鼠微血管反应性的影响,现报道如下。
1.1 动物及分组 SD大鼠(由湖北省实验动物中心提供),雌雄各半,体质量200~250 g,随机分为3组(每组10只),即对照组、模型组、玄参提取物组。3组动物分别按10 ml/kg灌胃生理盐水、生理盐水、玄参提取物4周,每天灌胃一次,自由进食。
1.2 仪器与药品 DH-1型呼吸机,BI2000图像分析系统;玄参1000 g购自湖北恩施宏升大药房,玄参水提取物,取经96%、60%乙醇各提取2次后的玄参,加水煎煮提取2次,每次加水10倍量,提取2 h,合并水煎液,过滤,滤液浓缩至1000ml,灭菌备用。
1.3 实验方法 将灌胃处理SD大鼠,用氨基甲酸乙脂溶液(浓度为20%,剂量为1.0 g/kg)腹腔注射麻醉后,将动物仰卧位固定于鼠台。从腹外侧切口,用镊子拉出肠系膜,选取无损伤肠系膜,用大头针扇形固定于内盛台氏液的微循环灌流盒内,恒温38℃,调节焦距,用BI2000图像分析系统选取并标记一条肠系膜微动脉(血管直径10~11 μm,血流速度3~4 mm/s),用来观察实验过程中血管口径和血流速度的变化。
将模型组和玄参提取物组SD大鼠背部脱毛处理,用3%凝固汽油进行烧伤处理,制备成大鼠体表面积20%为深Ⅱ度烧伤模型,而对照组动物仅进行背部脱毛,不进行后续烧伤处理。在显微镜下观察前述所标记肠系膜微动脉的口径和血流速度的变化,并分别于10、15、20、25min测量血管管径和血流速度。
1.4 数据处理 采用 SPSS FOR WINDOWS 11.5软件进行统计学处理。肠系膜微动脉血管口径和血流速度用均数±标准差(±s)表示,配对 t检验,P<0.05为差异具有显著性。
表1 玄参提取物对烧伤后SD大鼠微血管管径的影响(±s,n=10)
表1 玄参提取物对烧伤后SD大鼠微血管管径的影响(±s,n=10)
注:与对照组比较*P <0.05,**P <0.01;与模型组比较#:P<0.05
组别 实验前 实验时间(min)2 23.62 ±2.23模型 10.56 ±0.21 13.61 ±1.43** 21.29 ±1.92** 25.26 ±1.95* 27.45 ±2.15*玄参提取物 10.61 ±0.23 12.29 ±1.55 19.66 ±1.86 22.01 ±1.96# 23.11 ±2.01 10 15 20 25对照 10.77 ±0.23 11.25 ±0.30 17.33 ±2.06 21.71 ±2.0#
2.1 玄参提取物对烧伤SD大鼠微血管管径的影响模型组与对照组比较,肠系膜微动脉血管口径明显扩张(P<0.01,P<0.05)。玄参提取物组与模型组动物比较,血管口径在20 min和25 min时有明显变小(P<0.05)。结果见表1。
2.2 玄参提取物对烧伤SD大鼠血流速度的影响模型组与对照组比较,肠系膜微动脉在15 min血液流速开始减慢(P<0.05),25 min减速更明显(P<0.01)。玄参提取物组与模型组比较,血液流速在15 min时明显增快(P<0.01),20 min和25 min时增快幅度虽有所减缓,但仍有显著性差异(P<0.05)。见表2。
表2 玄参提取物对烧伤后SD大鼠血流速度的影响(±s,n=10)(mm/s)
表2 玄参提取物对烧伤后SD大鼠血流速度的影响(±s,n=10)(mm/s)
注:与对照组比较*P <0.05,**P <0.01;与模型组比较#P <0.05,##P <0.01
组别 实验前 实验时(min)9 ±0.31模型 3.65 ±0.25 3.31 ±0.24 2.78 ±0.30* 2.53 ±0.32* 2.14 ±0.25**玄参提取物 3.43 ±0.31 3.36 ±0.34 3.32 ±0.25## 2.95 ±0.19# 2.48 ±0.11 10 15 20 25对照 3.52 ±0.32 3.45 ±0.28 3.35 ±0.32 3.11 ±0.13 2.6#
正常生理情况下,肠黏膜屏障能阻止肠腔中绝大部分细菌和毒素的移位,少量移位的细菌和毒素,也可通过肠道和肝脏正常免疫系统予以清除,从而维持机体内环境相对稳定[5]。烧伤后机体会发生应激反应,引起局部组织缺血、缺氧和免疫紊乱,导致肠道组织受损,因此,肠道往往成为烧伤后最易受损的器官之一[6-7]。肠道菌群失调,内毒素入血,免疫细胞被激活,炎性介质释放,肠系膜微循环紊乱,微循环血流瘀滞,导致肠黏膜屏障功能完整性遭到破坏,有时还会导致全身炎症反应综合征(SIRS)以及多器官功能障碍综合征(MODS)等严重并发症,这些情况与肠黏膜损伤导致肠系膜微循环障碍关系密切[8]。因此,稳定和改善肠黏膜微循环的功能,是治疗烧伤和防止烧伤并发症发生的关键之一。
有研究表明,玄参醚、醇、水提取物有抗血小板聚集、增强纤维蛋白溶解活性作用[2],玄参提取液具有较好的抗肿胀作用[9],对脑缺血损伤也具有保护作用[10]。本实验发现,模型组大鼠与对照组比较,肠系膜微动脉口径明显扩张,但血液流速明显减慢,这可能是由于烧伤后血液流变学发生浓、粘、凝、聚的改变,形成肠系膜微动脉血流瘀滞,导致血管口径扩张,血流速度减缓,从而造成微循环障碍。玄参提取物组与模型组比较,血液流速明显加快,有效改善血流状态,抑制血管口径扩张在烧伤20 min后作用明显。这些变化表明,玄参提取物对烧伤后微循环血流速度和血管口径都有所改变,这种变化可能与以下三个方面有关。一是血液流变学的改变,玄参提取物有抗血小板聚集、促进纤溶、改善血液流变性作用,这与倪正[4]等报道一致。二是烧伤后肠道内毒素入血是诱发其他炎症介质释放的重要原因。烧伤后透过肠黏膜屏障的内毒素具有很强的免疫刺激活性,能激活多种免疫细胞,产生大量炎症介质,加重组织损伤和参与高代谢反应。而玄参提取物可治疗内毒素血症、改善微循环与毛细血管的通透性、扩张血管和降血压的作用,有效维护肠黏膜屏障,减少细菌和毒素移位,降低机体过度炎症反应,对心血管系统具有很好的保护作用。这与吴修文、谢小艳、李媛[5,11,12]等报道一致。三是玄参提取物具有抗炎作用。玄参的抗炎活性可能与其苯丙素苷类成分的抗氧化作用关系密切[6]。
烧伤早期所发生的微循环障碍属于低排高阻型,其原因归咎于毛细血管通透性增加和应激所引起的一系列神经内分泌功能紊乱[13]。由于微循环的改变与血液流变学、血液动力学等多种因素有关,各种因素相互影响,所以玄参提取物对微循环的影响机制极其复杂,有待进一步深入研究。
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[3] 倪正,蔡雪珠,黄一平,等.玄参提取物对大鼠血液流变性、凝固性和纤溶活性的影响[J].中国微循环,2004,8(3):152-153.
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[5] 吴修文,王焕,吴炜,等.重组人肠三叶因子减轻烧伤后肠源性高代谢的实验研究[J].重庆医学,2012,41(15):1465-1466.
[6] 孙勇,孙曙光,王静,等.乌司他丁对严重烧伤大鼠肠道损伤及炎症因子的影响[J].重庆医学,2011,40(26):2601-2602.
[7] 孙勇,孙曙光,王良喜,等.谷氨酰胺强化的肠内营养减轻大鼠烧伤后肠道损伤的实验研究[J].重庆医学,2009,38(8):2342-2343,2361.
[8] 徐晓燕,王红梅,应颖,等.大黄对严重烧伤大鼠肠黏膜屏障保护作用的实验研究[J].江西医学院学报,2008,48(1):16-18.
[9] 李静,陈长勋,高阳,等.玄参提取物抗炎与抗动脉硬化作用的探索[J].时珍国医国药,2010,21(3):532-534.
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[13] 张向清.烧伤早期微循环功能障碍的本质——“外压”、“内堵”[J].中国烧伤创疡杂志,2012,24(3):171-182.