老年乳腺癌患者外科治疗前后血清内皮素变化

张大伟 秦优优 习 勋 刘世浩 仲 磊 单东力 闫朝岐(哈尔滨医科大学第二附属医院，黑龙江 哈尔滨 150081)

乳腺癌是严重威胁妇女健康及生活质量的主要恶性肿瘤之一，尤其是绝经期前后(我国50岁左右)妇女呈高发人群。虽然其手术方式不断改进，但早期诊断及治疗甚为关键，故乳腺癌肿瘤标志物检测具有重要意义。内皮素及其受体通过调节有丝分裂、细胞生存周期、血管重构、肿瘤浸润免疫细胞、侵袭转移等方式在不同的肿瘤的生长和转移中发挥重要作用。在乳腺肿瘤的转移侵袭中内皮素1(ET-1)表达增加。ET-1与受体A结合并与缺氧诱导因子(HIF)协调分别促使肿瘤细胞表达趋化因子受体(CCR7)，而CCR7能诱导趋化现象和侵袭转移〔1〕。因此，阻断ET-1生成，就可能阻断乳腺癌的侵袭和转移。本研究旨在探讨血清ET-1在老年乳腺癌患者保乳手术与改良根治手术前后的表达水平，以及ET-1表达浓度与乳腺癌临床分期、组织学分级的关系。

1 材料与方法

1.1 检测对象 收集我科2010年10月至2012年9月乳腺癌患者40例，均为女性，年龄均＞50岁，平均年龄54岁。术前均经活检穿刺病理学证实为乳腺癌，术前均未行任何治疗。保乳手术者，肿瘤距离正常切缘≥0.5 cm，术中快速病理证实各切缘无癌细胞存留;其中肿瘤≤2 cm 20例，1.5 cm≤肿瘤＜2 cm者10例，肿瘤＜1.5 cm 10例，其中5例患者不同意保乳治疗，采用改良根治术治疗。收集乳腺良性肿瘤疾病10例。无乳腺疾病10例，作为健康对照组。

1.2 标本收集 采集健康志愿者及乳腺良性肿瘤患者、乳腺恶性肿瘤患者术前和术后3～5 d清晨空腹肘静脉血3～5 ml，注入含10%乙二胺四乙酸二钠和抑肽酶的试管中混匀，4℃下，3 000 r/min离心10 min，分离的血清用0.1% 三乙醇胺(TFA)6 ml酸化3 000 r/min离心20 min后取其上清液，放置于－70℃冰箱保存待测。

1.3 血清ET-1测定 采用放射免疫法测定血清ET-1，试剂盒购自长春市生物制品所。γ计数仪，美国bookman。主要技术参数:ET-1测定范围20～4 680 pg/ml，灵敏度10 pg/ml，回收率平均95% ～100%，批内变异系数(CV)＜5%，批间CV＜10%，正常参考值38.78～71.50 pg/ml。

1.4 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行分析，计量资料以±s表示，两均数比较和配对比较均采用t检验。

2 结果

2.1 各组血清ET-1水平 乳腺癌患者术前血清ET-1水平明显高于乳腺良性肿瘤患者和健康对照组(P＜0.01)，术后ET-1降低，但仍高于乳腺良性肿瘤患者和健康对照组(P＜0.01)。乳腺癌改良根术组与乳腺癌保乳手术组比较ET-1水平无显著差异(P＞0.05)。见表1。

2.2 乳腺癌患者血清ET-1水平与临床病理特征的关系 本组乳腺癌组织组织学分级Ⅰ～Ⅲ级者ET-1值明显升高(P＜0.05)，但与肿块大小无明显相关(P＞0.05)。见表2。

表1 各组患者外科治疗前后血清ET-1水平(± s，pg/ml)

表1 各组患者外科治疗前后血清ET-1水平(± s，pg/ml)

与健康对照组比较:1)P＜0.01;与术前比较:2)P＜0.01

组别 n 术前 术后健康对照10 42.11±7.02 －乳腺癌改良根治术组 5 76.08±8.251) 54.34±8.751)2)乳腺癌保乳手术组 35 75.32±7.121) 53.14±9.681)2)乳腺良性疾病对照组10 43.85±9.28 44.53±8.26

表2 癌组织ET-1值与肿瘤大小、病理组织学分级、临床分期(± s，pg/ml)

表2 癌组织ET-1值与肿瘤大小、病理组织学分级、临床分期(± s，pg/ml)

临床病理 n ET-1 P值肿瘤大小 ≤2.0 cm 20 68.12±8.12 ﹥0.05 1.5～2.0 cm 10 70.20±8.54≤1.5 cm 10 59.25±8.26组织学分级 Ⅰ 15 68.22±7.89 ﹤0.05Ⅱ15 82.88±9.98Ⅲ10 84.21±8.32 TNM分期 Ⅰ～Ⅱ 21 82.82±9.27 ﹤0.05Ⅲ9 79.20±8.54淋巴结转移 阳性 8 69.29±7.65 ﹤0.05阴性22 68.85±7.58

3 讨论

在正常人血液中ET主要由血管内皮细胞产生，以非常低的生理浓度存在，发挥神经调节因子或局部激素样作用，对组织器官具有重要的生物学作用。ET有三种类型ET-1、ET-2和ET-3，它们共同特点是具有＜1个α螺旋及2个二硫基桥接〔1〕。其中ET-1生理作用最为突出，在乳腺癌患者血液中ET-1表达增加〔2〕，Armstrong 等〔3〕对 60 例乳腺癌患者的血浆ET-1水平进行研究表明肿瘤组织含有大量ET-1〔5〕。在前列腺癌中，其特异性ETA R拮抗剂BQ-123对前列腺癌PC3细胞株增殖的抑制效应具有时间依赖性，可诱导肿瘤细胞自然凋亡〔4〕。Mabjeesh 等〔4〕研究发现，HIF-1 抑制剂 2-甲氧雌二醇(2-Methoxyestradil，2ME2)与BQ-123联合作用于前列腺癌细胞时显著增强2ME2诱导的细胞毒性反应。实践证明，多西他赛和阿曲生坦联合化疗治疗前列腺癌效果较好〔5〕。ET及其受体的相互作用可通过激活多种信号途径和使某些标志性分子水平上调或下调来促进肿瘤的发生发展〔6〕，如上调血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达，促使癌细胞淋巴管生成〔7〕，为肿瘤的侵袭转移提供重要的理论基础。分子靶向治疗将成为治疗乳癌侵袭、转移新的研究方向。

本研究结果与Armstrong等〔5〕研究结果一致。经手术治疗后其ET-1下降，但改良根治术组与保乳手术组比较ET-1下降无明显差异，说明老年女性患者如乳腺癌肿块≤2 cm，行保乳手术与改良根治术其血清ET-1表达程度无明显差异。提示50岁以上老年乳腺癌患者行保乳手术治疗与改良根治术治疗预后可能无明显差异，有待进一步随访。ET-1能够反映出乳腺癌恶性程度高低，其表达浓度与临床分期呈正比。ET-1表达水平越低，肿瘤恶性度越低。采集静脉血做ET-1含量测定方便、快捷，应用于保乳手术具有一定参考价值。乳腺癌患者血清ET-1术前升高，术后显著降低，癌组织不同病理分级中有显著性差异，提示其可作为乳腺癌的一种肿瘤标志物常规检测。ET-1高表达可影响乳癌患者预后，因此术后均应行辅助治疗定期检测血清ET-1表达水平，将有助于乳腺癌患者术后放、化疗等辅助治疗疗效观察，指导治疗和判断预后。

1 Wilson JL，Burchell J，Grimshaw MJ.Endothelins induce CCR7 expression by breast tumor cells via endothelin receptor a and hypoxia-inducible factor-1〔J〕.Cancer Res，2006;66(24):11802-7.

2 Bagnato A，Rosano L.The endothelin axis in cancer〔J〕.Int J Biochem Cell Biol，2008;40(8):1443-51.

3 陆 晔，潘湘涛，杨育生.乳腺癌HPA、ET-1表达和肿瘤血管生成关系〔J〕.国际医药卫生导报，2009;15(10):11-3.

4 Mabjeesh NJ，Shefler A，Amir S，et al.Potentiation of 2-methoxyestradiolinduced cytotoxieity by blocking endothelin a receptor in prostate cancer cells〔J〕.Prostate，2008;68(6):679-89.

5 Armstrong AJ，Creel P，Turnbull J，et al.A phase Ⅰ-Ⅱ study of docetaxel and atrasentan in men with castration-resistant metastatic prostate cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2008;14(19):6270-6.

6 汪 艳，尹春香，李庆昌.内皮素与恶性肿瘤侵袭转移〔J〕.医学信息(上旬刊)，2010;23(12):4679-80.

7 Spinella F，Garrafa E.Endothelin-1 stimulates lymphatic endothelial cells and lymphatic vessels to grow and inavde〔J〕.Cancer Res，2009;69(6):2669-76.