基质金属蛋白酶-2、-9含量与卵巢癌的相关性

孟繁娟 刘贤英 祁盛昆(长春市人民医院，吉林 长春 3005)

卵巢癌在女性生殖器恶性肿瘤中占第3位，死亡率第1位，其中约70%的患者发现时已是中、晚期，并且Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌5年生存率为80% ～90%，Ⅲ、Ⅳ期仅为20% ～30%。因此，寻求卵巢癌浸润、转移的诊断指标，做到早期发现、早期诊断并有效治疗对卵巢癌预后非常重要。本研究分析不同时期卵巢癌患者血清中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9含量变化，旨在为卵巢癌侵袭、转移及预后判断提供客观指标。

1 材料与方法

1.1 材料 72例卵巢癌患者血清均由我院住院病人提供，所有病人均有病理诊断:转移癌44例，非转移癌28例。病理分级:Ⅰ级17例，Ⅱ级26例，Ⅲ级29例。根据TNM分期，T115例，T225例，T318例，T414例。40例健康人血清来源于血站献血员，MMP-2、MMP-9试剂盒购于北京中山生物试剂有限公司。

1.2 方法 取-70℃冰箱内冻存的人卵巢癌血清1∶100倍稀释，严格按着使用说明书进行操作，分别加入含有 MMP-2、MMP-9抗体的酶标板内，每孔100 μl，4复孔，置37℃ CO2培养箱内反应60 min，取出后磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次，每次5 min，每孔内加入酶标抗体工作液100 μl，置37℃ CO2培养箱内继续反应60 min，取出后甩干，PBS洗三次，加入邻苯二胺底物工作液100 μl，避光保温10 min，每孔内加入终止反应液50 μl，立即于酶标仪波长492 nm测OD值，根据标准品OD值在半对数坐标纸上作图，查出MMP-2、MMP-9含量，结果乘以稀释倍数即为MMP含量。

1.3 统计学方法 应用SPSS11.0软件进行t检验。

2 结果

2.1 各组血清 MMP-2、-9含量比较 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与对照组相比差异有统计学意义，尤其是卵巢癌转移组与非转移组相比，MMP-2、-9含量升高非常明显(P＜0.01)。见表1。

2.2 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与病理分级的关系 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与病理分级呈相关关系，即病理分级越高，MMP-2、-9含量亦升高明显。见表2。

表1 卵巢癌病人与对照组血清MMP-2、-9含量比较(±s，ng/ml)

表1 卵巢癌病人与对照组血清MMP-2、-9含量比较(±s，ng/ml)

与正常对照组比较:1)P＜0.05，2)P＜0.01

组别 n MMP-2 MMP-9正常对照组40 212.8±31.6 224.5±36.3卵巢癌非转移组 28 292.3±29.11) 356.2±40.21)卵巢癌转移组 44 623.1±47.42) 494.9±42.52)

表2 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与病理分级的关系(±s，ng/ml)

表2 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与病理分级的关系(±s，ng/ml)

与Ⅰ级比较:1)P＜0.05，2)P＜0.01

组别 n MMP-2 MMP-9Ⅰ级17 323.8±36.2 269.2±37.9Ⅱ级 26 457.2±40.41) 356.2±42.51)Ⅲ级 29 627.8±32.12) 580.6±40.72)

2.3 卵巢癌患者血清中MMP-2、-9含量与临床分期的关系MMP-2、-9含量与临床分期有关，但是，T1、T2两组间 MMP-2、-9含量接近，无统计学意义;T1、T2组分别与T3、T4组相比差异显著。见表3。

表3 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与临床分期的关系(±s，ng/ml)

表3 卵巢癌病人血清中MMP-2、-9含量与临床分期的关系(±s，ng/ml)

与T1组比较:1)P＜0.05，2)P＜0.01

组别 n MMP-2 MMP-9 T115 302.1±27.6 381.2±29.2 T2 25 421.7±30.41) 406.5±33.1 T3 18 554.3±35.21) 516.5±37.31)T4 14 753.7±41.42) 531.3±27.52)

3 讨论

上皮性卵巢癌由于缺乏特异性肿瘤标记物和临床症状，早期诊断率非常低，绝大部分患者就诊时已属于晚期，尽管可行瘤体减灭术和药物治疗，但预后不容乐观〔1〕。文献报道〔2〕，卵巢癌组织类型和分化程度是决定肿瘤行为及预后的关键因素。掌握不同卵巢癌组织病理学和分子生物学特征，有助于选择早期筛查肿瘤标识物。

此外，本文结果还表明，卵巢癌临床分期越高，其MMP-2、-9含量亦升高，因为临床上分期越高的病人肿瘤病变范围越大。Cottcchia等〔3〕研究发现MMP-2、-9检测对进展和复发卵巢癌的诊断有重要价值。MMP-2、-9属于基质金属蛋白酶家族中的明胶酶类，能够降解细胞外基质，在肿瘤细胞生长、分化、侵袭、转移、调节肿瘤血管生成及免疫监视中发挥重要作用〔4〕。研究显示MMP-2、-9含量可以作为一种很有潜力的判断卵巢癌预后的生物学标志物〔5〕，动态观察其含量变化可以作为评估卵巢癌预后的客观指标。

1 张英丽，羊正炎.上皮性卵巢癌组织病理学及分子生物学研究进展〔J〕.国际肿瘤学杂志，2010;37(12):942-5.

2 Landen CN Jr，Birrer MJ，Sood AK.Early events in the pathogenesis of epithelial ovarian cancer〔J〕.J Clin Oncol，2008;26(6):995-1005.

3 Cottcchia CM，Curatolo AS，Zurakowski D，et al.Urinary MMP-2 and MMP-9 predict the presence of ovarian cancer in women wity normal CA125 levels〔J〕.Gynecol Oncol，2011;123(2):295-300.

4 Qie S，Sun BC，Zhao XL，et al.Correlation between expressions of matrix metalloproteinsse-2 and 9 and vasculogenic mimicry in gastrointestinal stromal tumors〔J〕.Zhong hua Yi Xue Za Zhi，2009;89(16):1106-9.

5 张明明，徐玉清.MMP-2和MMP-9在恶性肿瘤中的研究进展〔J〕.国际肿瘤学杂志，2012;39(11):820-3.