CDK2、p27及Ki-67在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

史 琳 张安文 罗 宇 赵时梅 任传伟 杨燕初

广西科技大学医学院病理教研室，广西柳州 545005

甲状腺乳头状癌是甲状腺癌中发病率最高的组织学类型，已有研究指出细胞周期调控异常引发的DNA链结构改变是乳头状癌的病因之一[1]。CDK2以cyclin-CDK复合物的形式参与调控细胞周期，是DNA复制的重要启动因子。p27是CDKI家族中的一份子，能通过负性调控cyclin-CDK复合物来防止DNA异常复制的发生[2]。Ki-67是目前较为肯定的与细胞分裂增殖相关的蛋白，与很多恶性肿瘤的发展、转归、预后均具有相关性。CDK2和p27表达异常均可导致细胞恶性转化，同时联合检测Ki-67对判断肿瘤细胞的恶性趋势与增殖活性有重要意义。目前国内在PTC中联合检测CDK2、p27及Ki-67的报道尚少，三者在PTC中表达的关系还有待进一步探索和研究。本文主要研究采用的免疫组化法检测PTC、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿及正常甲状腺组织中CDK2、p27及Ki-67蛋白的表达，着重阐述了三者的表达与PTC发生、发展的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

随机选取广西科技大学医学院第二附属医院于2007年7月—2010年1月期间在该院接受治疗的外科手术切除的甲状腺病变组织100例，其中有乳头状癌40例，结甲30例，腺瘤30例。40例癌组织中女性患者35例、男性患者5例；最大年龄71岁，最小年龄16岁，中位年龄38岁；100例病变组织肿瘤直径0.1～7 cm，平均0.36 cm，其中＞1 cm者17例，≤1 cm者23例；无淋巴结转移者29例，有淋巴结转移者11例。全部材料术前均无化、放疗及免疫治疗史。另外抽取了20例死亡于非甲状腺疾病的尸体解剖中的正常甲状腺组织作为对照组。

1.2 试剂及方法

兔抗人CDK2多克隆抗体和SP试剂盒、鼠抗人p27单克隆抗体、及Ki-67单克隆抗体均购自福州迈新生物技术开发有限公司。所采用的SP法免疫组化技术，染色操作步骤流程是按照试剂盒说明书进行。用PBS液取代一抗作阴性对照，用已知乳腺癌CDK2、p27阳性切片及已知肺鳞癌Ki-67阳性切片作阳性对照。

2 结果

2.1 不同甲状腺组织中CDK2、p27及Ki-67蛋白的表达

见图1～2。PTC中Ki-67蛋白的阳性表达率为80.0%（32/40）、CDK2蛋白的阳性表达率为80.0%（32/40），两者均明显高于结甲、腺瘤及正常组（P ＜ 0.01，P ＜ 0.01）。在PTC中p27蛋白的阳性表达率为22.5%（9/40），显著低于正常组、腺瘤及结甲（P ＜ 0.01）。

图1 甲状腺乳头状癌中Ki-67蛋白的阳性表达

图2 甲状腺乳头状癌中CDK2蛋白的阳性表达

2.2 PTC中CDK2、p27、Ki-67蛋白表达与临床病理参数之间的关系

PTC中CDK2、ki-67蛋白表达与临床病理参数均无相关性（均为P＞0.05）；p27蛋白表达与患者年龄有关联（P=0.049），与患者的性别、肿块直径及淋巴结转移情况均无相关性（均为P＞0.05）。

2.3 PTC中CDK2、p27、Ki-67蛋白表达的相互关系

PTC中CDK2与Ki-67蛋白的表达呈正相关（r=0.947，P ＜ 0.01），CDK2、Ki-67与p27的表达呈负相关（r=-0.413，P ＜ 0.01；r=-0.381，P ＜ 0.05）。

3 讨论

在正常组织中，p27的高表达阻止了细胞由G1期到S期转化，使进入S期的瘤细胞减少，从而导致了Ki-67不能充分发挥促进和参与DNA复制的功能，而在肿瘤中情况则相反。CDK2、p27及Ki-67的异常表达，提示细胞周期紊乱，导致异常复制和多倍体的形成，有助于细胞的恶性转化。Hiroaki I等[4]检测卵巢透明细胞癌中CDK2和p27的表达，提出CDK2的低表达和p27的高表达可能涉及了卵巢透明细胞癌的发生发展。本组资料与Hiroaki I报道有所不同，PTC中CDK2高表达而p27低表达。Yasusei K等[5]检测p27、Ki-67在口腔鳞癌中的表达，得出p27在淋巴结转移癌中的表达明显低于原发灶，而Ki-67在原发灶和转移灶中均为过表达。本组资料与Yasusei K报道有差异，PTC中Ki-67与临床病理参数间均无相关性，而p27仅与患者年龄有关。本实验研究表明，PTC中CDK2、Ki-67蛋白的高表达而p27蛋白低表达，良性病变及正常组中则相反。CDK2、Ki-67蛋白高表达及p27低表达与PTC的发生、发展可能存在某种关联，因此，二者或三者联合检测可以作为早期临床诊断和评价甲状腺肿瘤细胞增殖活性的潜在的参考指标。

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