对氯苯氧异丁酸甲氧基苯丙烯酸酯的结构确证＊

胡庆梅，彭 红，程青正

(江西中医学院，江西 南昌 330004)

对氯苯氧异丁酸甲氧基苯丙烯酸酯(AZ)是经结构改造，具有调血脂作用的全新化合物，其作用机制是通过降低极低密度脂蛋白(VLDL)的合成，促使VLDL分解而使甘油三酯减少，从而调节血脂[1－5]。笔者采用元素分析、核磁共振、质谱以及红外光谱对AZ的结构进行了确证[6－9]。现报道如下。

1 仪器与试药

Vario ELⅢ型元素分析仪(德国EA公司);Varian Cary 5000型紫外/可见/近红外分光光度计;Avance 400型核磁共振波谱仪(瑞士布鲁克公司);Agilent 6460型质谱仪;Diamond TG/DTA热重分析仪;D/max－2500/PC型转靶X射线衍射仪。AZ对照品(批号为090806，由江西中医学院药物化学学科组提供)，化学结构式见图1;其他试剂均为分析纯，水为超纯水。

图1 AZ的化学结构式

2 方法与结果

2.1 元素分析

AZ对照品的元素C及H百分含量与理论值相符，见表1。

表1 AZ对照品的元素C及H的百分含量(%)

2.2 核磁共振谱(NMR)

2.2.11H 核磁共振谱(1H －NMR)

AZ对照品在CDCl3溶剂中的1H谱测定数据见表2，1H谱图见图 2。根据二维相关(COSY)谱(图 3)，结合 DEPT谱(图 4)、异核单量子关系(HSQC)谱(图5)、多键碳氢关系(HMBC)谱(图6)，可对AZ对照品的1H谱进行归属。

表2 AZ对照品的1H－NMR数据

图2 核磁共振氢谱(1H－NMR)

图3 COSY谱

1)氢谱共给出8组氢，各组峰积分比例由低场到高场为1∶1 ∶2 ∶2 ∶3 ∶1 ∶3 ∶6。

2)第1组在HSQC谱中与分子结构中的任何碳均不存在相关性，因此应是分子结构中的活泼质子，即δ11.19 ppm为21位质子。

图4 DEPT谱与碳谱

图6 HMBC谱

3)第2组和第6组峰的积分比例为1∶1，DEPT谱和HSQC谱显示该两组峰均与CH类型的碳相连，COSY谱表明该两组峰与其他质子没有相关关系，但相互之间存在相关关系，另外在HMBC谱中，第2组峰除与第6组峰存在相关关系以外，还与两个CH类型的碳和两个季碳存在相关关系，第6组峰仅与两个季碳存在相关关系，因此可以判断出δ7.79及7.75 ppm是18位质子，δ6.45 及 6.41 ppm 为 19 位质子。

4)第3组、第4组和第5组峰的积分比例为2∶2∶3，DEPT谱和HSQC谱显示这3组峰均与CH类型的碳相连，其中第4组峰和第5组峰均与两个CH类型的碳存在相关关系;在COSY谱中第3组峰和第4组峰分别与第5组存在相关关系;另外在HMBC谱中，第3组峰与2个季碳存在相关关系，第4组峰与4个CH类型的碳和2个季碳存在相关，且其中1个CH为18位的碳;第5组峰与2个CH类型的碳和5个季碳存在相关关系，因此 δ7.28 及 7.26 ppm 是 2 位、6 位质子，δ7.18 及 7.15 ppm 是13位、16位质子，δ7.02－6.99 ppm 是 3位、5和 15位质子。

5)DEPT谱和COSY谱显示第7组和第8组峰均是与CH3类型的碳相连，HMBC谱显示第7组峰仅与1个季碳存在相关关系，第8组峰与2个季碳存在相关关系，因此δ3.87 ppm是17位质子，δ1.77ppm 是 8位、9位的质子。

2.2.213C 核磁共振谱(13C －NMR)

AZ对照品在CDCl3溶剂中的13C谱测定数据见表3。碳谱中给出17组峰，图3中的DEPT90谱和DEPT135谱说明有7个CH和2个CH3存在，其余均为季碳。

表3 AZ对照品的13C谱测定数据

1)分子的结构中有7个CH存在，根据氢谱分析结果，可知δ146.24 ppm 是 18 位碳，δ129.12 ppm 是 2 位、6 位碳，δ122.99 ppm是 15 位碳，δ121.63 ppm 是 16 位碳，δ120.87 ppm 是 3 位、5 位碳，δ117.71 ppm 是 19 位碳，δ111.48 ppm 是 13 位碳。

2)DEPT135图谱显示结构中有2个CH3，即δ55.89 ppm是17位碳，δ25.47 ppm 为 8 位、9 位碳。

3)比较13C谱和DEPT135谱，可发现该分子结构中有8个季碳，HMBC 谱显示，δ172.24 ppm 和 δ79.53ppm 均与 8 位、9 位质子存在相关关系，比较与此2个质子存在相关季碳的化学环境可判断出，δ172.24 ppm 应是 10 位季碳，δ79.53 ppm 应是 7位季碳;δ171.97 ppm与18位、19位质子存在相关关系，应是20位季碳;δ153.93 ppm与2位、6位质子存在相关关系，因此应属于1位季碳;δ151.45 ppm与13位、16位质子存在相关关系，应是12位季碳;δ141.54 ppm与13位、15位、16位的质子存在相关关系，应是11位季碳;δ133.29 ppm与15位、18位、19位的质子存在相关关系，应是 14位季碳;δ127.51 ppm 与 2位、3位、5位、6位的质子存在相关关系，应是4位季碳。

综上所述，NMR给出的信息与结构式相符。

2.3 质谱

离子化方式为ESI(－)。质谱测得本品的分子离子峰[M－H]－，其质荷比 m/z为 389.05，与 AZ的相对分子质量(分子式C20H19ClO6，相对分子质量为390.814)一致。

2.4 紫外光谱分析

在甲醇溶液中，λmax275为取代苯环的大共轭体系的π→π＊跃迁特征吸收，λmax224为取代苯环的K带特征吸收。

2.5 红外光谱(IR)分析

仪器校正:用聚苯乙烯薄膜的红外光谱吸收峰对仪器波数进行校正[参考2010年版《中国药典(第二部)》附录ⅣC]，符合规定。方法为KBr压片法。AZ对照品的IR谱各吸收峰归属见表4。

表4 AZ的IR谱数据及归属

3 讨论

元素分析结果表明，AZ对照品的组成与C20H19ClO6相符，测量不确定度在允许范围内。氢谱显示，共8组氢，各组峰积分比例由低场到高场为 1∶1∶2∶2∶3∶1∶3∶6。AZ分子结构中有 20个碳，本品的13C谱显示有17组碳峰;DEPT谱显示结构中有2个CH3，即 δ55.89 ppm 是 17 位碳，δ25.47 ppm 为 8 位、9 位碳;结合氢谱分析可知，δ129.12 ppm 是 2 位、6 位碳，δ120.87 ppm 是 3位、5位碳。质谱测得本品的分子离子峰[M－H]－，其质荷比 m/z为389.05，与AZ的相对分子质量一致。经红外光谱验证，与AZ的分子结构相符。

本研究采用薄层色谱法和高效液相色谱法对AZ的纯度进行检查。采用硅胶G薄层板，分别选用甲醇－氯仿(20∶20)，甲醇－乙酸乙酯(20∶30)为展开剂展开，置紫外灯365 nm下检视。结果表明，AZ对照品在两个展开条件下均能显示1个斑点，所含成分单一，无杂质。通过高效液相色谱法，经面积归一法计算，对照品含量为100%，可以作为对照品使用。

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