复方米诺地尔维A酸酊的制备及质量控制

甘 亮，张 松

(湖北省黄石市第一医院，湖北 黄石 435001)

复方米诺地尔维A酸酊(鄂药制字H20110418)系黄石市第一医院自行研制的酊剂，主要用于斑秃、脂溢性脱发、病后脱发、老年性脱发的治疗。该制剂制备工艺简单、质量稳定，经医院多年临床验证显示，疗效显著。为有效控制制剂质量，笔者参照相关文献[1－6]，用高效液相色谱(HPLC)法对其中的米诺地尔、维A酸进行定性鉴别和含量测定。现报道如下。

1 仪器与试药

紫外分光光度计(美国Waters公司);高效液相色谱仪(美国Agilent公司);TG328A光学机械分析天平(湘仪天平仪器设备有限公司)。复方米诺地尔维A酸酊(黄石市第一医院制剂室，批号分别为20110201，20110306，20110513);米诺地尔对照品(批号为1083－201013)、维A酸对照品(批号为 0862－201005)均来自中国药品生物制品检定所;生姜、月桂氮酮均为药用标准，其余试剂为色谱纯或分析纯，水为注射用水。

2 方法与结果

2.1 处方与制备

处方:米诺地尔 10 g，维 A 酸 0.25 g，生姜 100 g，辣椒 50 g，月桂氮酮30mL，75%乙醇加至1 000mL。

制备:取生姜、辣椒洗净，加适量乙醇浸泡1周以上，常加搅拌，滤过，残渣压榨滤过，合并滤液，静置24 h，滤过至澄清，加入米诺地尔、维A酸乙醇溶解液及月桂氮酮，加75%乙醇至1 000mL，搅匀，即得。

2.2 质量控制

性状:本品为淡黄色至棕褐色的澄清液体。

鉴别:在含量测定项下的色谱图中，供试品溶液应呈现与米诺地尔、维A酸对照品溶液保留时间相同的色谱峰。

检查:乙醇量应为65% ～75%，应符合2010年版《中国药典(二部)》附录ⅠC酊剂剂项下的各有关规定。

2.3 米诺地尔含量测定

2.3.1 色谱条件

色谱柱:KromasilC18柱(250mm×4.6mm，5μm);填充剂:十八烷基硅烷键合硅胶;流动相:甲醇－水(70∶30);流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:285 nm;理论板数按米诺地尔峰计算应不低于2 000。

2.3.2 溶液制备

精密量取本品5mL，置50mL容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置50mL容量瓶中，加流动相至稀释刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密称取米诺地尔对照品25mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取 5 mL，置50 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度为100μg/mL的对照品溶液。

图1 米诺地尔高效液相色谱图

2.3.3 方法学考察

专属性试验:取 2.3.1 项下供试品溶液与对照品溶液及不含米诺地尔 (取除米诺地尔外，其余组方及制备方法与复方米诺地尔维A酸酊相同的空白酊剂，用依法制备空白样品溶液)的阴性对照品溶液，分别进样。结果见图1。供试品溶液呈现与米诺地尔保留时间相同的色谱峰，而阴性对照品溶液未见该色谱峰，说明空白样品不干扰含量测定。

线性关系考察:称取米诺地尔约10mg，精密称定，置100mL容量瓶中，加乙醇40 mL，超声波处理15min使溶解后定容至刻度，摇匀，分别取 10，5，3，2，1mL，加流动相稀释至50 mL，摇匀，制成系列对照品溶液。分别进样10μL，测定峰面积，以质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程 A=619 638C+37 606，r=0.999 8(n=5)。结果表明，米诺地尔检测质量浓度的线性范围为2.00～20.00μg/mL。

加样回收试验:取空白样品9份，每份100mL，分别精密加入米诺地尔适量(约相当于制剂中米诺地尔含量的80%，100%，120%)，依法测定米诺地尔含量，计算回收率。结果见表1。

精密度试验:取同一对照品溶液，依法测定其含量。结果的RSD为1.00%，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，于0，1，2，4，8 h 时分别测定峰面积。结果的RSD为0.93%，表明待测溶液在8 h内稳定。

重复性试验:取同一批样品6份，依法制备供试品溶液6份并测定含量。结果的 RSD为1.03%，表明方法重复性良好。

2.3.4 样品含量测定结果

取供试品3批，每批2份，依法制备供试品溶液，精密吸取供试液10μL，按2.3.1项下色谱条件进样测定，按外标法定量，用回归方程求得样品含量。结果见表2。

表1 加样回收试验结果(n=9)

表2 样品含量测定结果

2.4 维A酸含量测定

2.4.1 色谱条件

色谱柱:Kromasil C18柱(250mm ×4.6mm，5 μm);填充剂:十八烷基硅烷键合硅胶;流动相:甲醇 －水－冰醋酸(90∶10∶0.3);流速:1.0mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:250 nm，理论板数按维A酸峰计算应不低于2 000。

图2 维A酸高效液相色谱图

2.4.2 溶液制备

精密量取本品5mL，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取10 mL，置25 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取维A酸对照品25 mg，精密称定，置100 mL容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取10mL，置100mL容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀得稀释液，精密量取稀释液10mL，置25m L容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度为10μg/mL的对照品溶液。

2.4.3 方法学考察

专属性试验:取供试品溶液与对照品溶液及不含维A酸 (取除维A酸外，其余组方及制备方法与复方米诺地尔维A酸酊相同的空白酊剂)的阴性对照品溶液，分别进样。结果见图2。供试品溶液呈现与维A酸保留时间相同的色谱峰，而阴性对照品溶液未见该色谱峰，说明空白样品不干扰供试品溶液的测定。

线性关系考察:称取维A酸约12.8mg，精密称定，置50mL容量瓶中，加乙醇40mL，超声波处理15min使溶解后定容至刻度，摇匀，分别取 5，3，2，1mL 加流动相稀释至 10mL，摇匀，制成系列对照品溶液。分别进样10μL，测定峰面积，以质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归，回归方程为 A=745 94C+8 540.2，r=0.999 9(n=5)。结果表明，维 A 酸质量检测浓度的线性范围为 25.60～128.00μg/mL。

加样回收试验:取空白样品9份，每份50mL，分别精密加入维A酸适量(约相当于制剂中维A酸含量的80%，100%，120%)，依法测定维A酸含量，计算回收率。结果见表1。

精密度试验:取同一对照品溶液5份，依法测定其含量。结果的 RSD为1.3%，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，于 0，1，2，4，8 h 时分别测定峰面积。结果的 RSD为0.91%，表明待测溶液在8 h内稳定。

重复性试验:取同一批号样品6份，依法制备供试品溶液6份，依法测定含量。结果的 RSD为1.19%，表明方法重复性良好。

2.4.4 样品含量结果

取供试品3批，每批2份，依法制备供试品溶液，精密吸取供试液10μL，按2.4.1项下色谱条件进样测定，按外标法定量，用回归方程求得样品含量。结果见表2。

3 讨论

根据米诺地尔的理化性质，并参照相关文献[1，3，6]，以甲醇－水(70∶30)为流动相，以对照品的峰形和样品的分离情况进行试验，结果显示，二者在相同保留时间内峰形完好，样品中米诺地尔能够获得良好的分离。

根据维A酸的理化性质，参照相关文献[2，4，5]，以甲醇－水－冰醋酸(90∶10∶0.3)为流动相，以对照品的峰形和样品的分离情况进行试验，结果显示，二者在相同保留时间内峰形完好，样品中维A酸能够获得良好的分离。

以高效液相色谱法分别测定复方米诺地尔维A酸酊中米诺地尔和维A酸的含量，方法灵敏、准确、重现性好、专属性强，可用于该制剂的质量控制。

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[3]范玉峰，胡守莲.高效液相色谱法测定米诺地尔搽剂中米诺地尔的含量[J].中国医药指南，2010，8(8):42－43.

[4]王福霞，冯文菊，姜武民.HPLC法测定维A酸与异维A酸含量 [J].药物分析杂志，2007，27(4):585 －587.

[5]马亚中，吴 燕，刘丽平，等.中空纤维分离－高效液相色谱法测定复方痤疮凝胶中主药的含量 [J].医药导报，2011，30(10):1 340－1 343.

[6]邓 莉，林 彩，胡 斌，等.高效液相色谱法测定生发素中米诺地尔含量[J].中国药业，2011，20(3):18 －19.