光纤药物溶出度实时测定仪监测乙酰螺旋霉素片实时溶出度

杨 静，苗爱东，徐轶飞

乙酰螺旋霉素属大环内酯类抗生素，临床用于治疗需氧革兰阳性球菌和杆菌所致的感染。近年利用光纤药物溶出仪测定药物溶出度的报道很多［1-5］，它能实现药物的连续、在线、实时分析，是评价药物动态溶出过程的有效方法，也是衡量工艺稳定性的重要手段。本文采用光纤药物溶出度实时测定仪对5个厂家6个批次的乙酰螺旋霉素片的溶出过程进行实时、在线分析，以期评价药品内在质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器 FODT-601光纤药物溶出度实时测定仪(上海富科思分析仪器有限公司);UV-2450岛津紫外－可见分光光度计(日本岛津公司);MettLer-AG285型电子分析天平 (MettLer公司)。

1.2 试药 乙酰螺旋霉素标准品(中国药品生物制品检定所，批号:130347-200403，含量:78.3%);乙酰螺旋霉素片:均为国产，规格:0.1 g/片。A厂，A1、A2，批 号:080309、0656006;B 厂，批 号:1070186;C厂，批号:20060804;D厂，批号:061003;E厂，批号:070625。纯化水自制。

2 方法与结果

采用FODT-601光纤药物溶出度实时测定仪，按照《中华人民共和国药典》2010年版中乙酰螺旋霉素片溶出度测定条件［6］，以《中华人民共和国药典》2010年版(二部)附录XC第一法(转篮法)，对样品进行测定。

2.1 检测波长及探头的选择 精密称取乙酰螺旋霉素标准品35.42 mg，置250 ml量瓶中，用盐酸溶液(稀盐酸24→1000)制成 110.9 μg/ml的对照品溶液，即相当于900 ml溶出介质中乙酰螺旋霉素片100%溶出时的浓度。采用 FODT-601在220～600 nm波长范围扫描吸收光谱，选择最大吸收波长232 nm为测定波长，与国家药品标准规定的测定波长一致。在550 nm处无吸收，故选择550 nm作为参比波长。根据朗伯比尔定律结合实践，确定最佳光程为2.0 cm，即选用1.0 mm的光纤探头。

2.2 标准曲线的建立 精密称取乙酰螺旋霉素标准品69.97 mg，置250 ml量瓶中，用盐酸溶液溶解并定容，制成219.15 μg/ml的储备液，分别精密量取储备液 5、10、20、30、40、50、60 ml置 100 ml量瓶中，用盐酸溶液稀释至刻度得10.96、21.91、43.83、65.74、87.66、109.58、131.49 μg/ml的乙酰螺旋霉素系列溶液，相当于 9.86%、19.72%、39.45%、59.17%、78.90%、98.62%、118.34%的药物溶出百分率。以盐酸溶液为空白，分别取上述溶液，在6个通道上同时测定在232 nm波长处的吸收度，系统自动回归得每个通道的线性方程(Y=bX+a，式中Y:溶出百分率，X:吸收度)，见表1。结果表明乙酰螺旋霉素浓度在10.96～131.49 μg/ml范围内时，浓度与吸收度呈良好的线性关系。

表1 6个通道的乙酰螺旋雷素溶出度与吸收度线性方程及相关系数

2.3 精密度试验 将光纤探头放入上述系列乙酰螺旋霉素溶液中，在FODT-601“对照品”模式考察日内、日间精密度，其相对标准偏差(RSD)分别为0.4%和 0.9%(n=5)。

2.4 溶出度测定 以脱气后的盐酸溶液(稀盐酸24→1000)900 ml为溶出介质，温度:37℃，转篮法，转速100 r/min，溶出时间45 min，检测波长232 nm，溶出限度75%。在每批样品中随机取样12片，分别投入转篮中，应用光纤药物溶出度实时测定仪每隔30 s自动记录吸光度及溶出度。

2.5 回收率试验 采用FODT-601，照2.4项下的溶出度测定条件对供试品C进行实时溶出度测定，供试品C在45 min时溶出百分率为99.1%，即溶出液的浓度为110.1 μg/ml。精密量取在45 min时的溶出液25 ml，置50 ml量瓶中，再分别精密加入555.6 μg/ml的对照品溶液 3、5、7 ml，用水稀释至刻度，摇匀作为加样供试品溶液(每个浓度各做3份)。在光纤药物溶出度测定仪上分别测定供试品溶液及加样供试品溶液的吸收度并求得其含量，计算对照品溶液的加入量及回收率。低、中、高3种浓度的回收率结果见表2。

表2 乙酰螺旋霉素片的回收率测定结果

2.6 各厂家产品的实时溶出度情况 5个厂家6个批次的乙酰螺旋霉素片在45 min时平均溶出率均达到75%，符合《中华人民共和国药典》2010年版的规定。各厂家样品间的实时溶出曲线存在较大差异，A1与D两个样品的溶出曲线批内差异都较大，提示其质量均一性较差。C厂生产的样品实时溶出曲线重合性相对较好，说明制剂工艺较稳定、均一。A厂生产的2批次样品，溶出过程明显不同，其中A2溶出较快，10 min即达平台;A1则在16 min时才缓慢溶出，而且片间差异较大，说明该厂的制剂工艺不稳定。见图1。

图1 5个厂家6批乙酰螺旋霉素片的实时溶出曲线

2.7 溶出曲线的统计分析 样品 A2、B、C、E在15 min内平均溶出率均超过85%，体内吸收与溶出速率无关，采用单点比较法即可，无需进行溶出曲线的比较，否则易得到错误结论。而A1与D两个样品的批内差异都较大，在各取样点的组内溶出值RSD均不符合要求，因此，6批样品的溶出曲线相似性均不能采用相似因子(f2)法进行统计分析。

3 讨论

通过对5个厂家6个批次的乙酰螺旋霉素片进行实时溶出度测定，虽然体外溶出度均符合《中华人民共和国药典》2010年版的规定，但各厂家产品的实时溶出曲线批内、批间均存在明显差异。同一种药物由多个厂家生产已是一种普遍现象，由于生产厂家众多，制剂工艺很难达到统一，可能是临床普遍反映不同厂家的产品不仅起效时间不同，而且疗效差距甚大的主要原因［7］。《中华人民共和国药典》中规定的溶出度检查也仅是测定药物的终点溶出度，不能反映药物溶出的全过程，溶出曲线是严格控制药品质量的一种科学手段与有效方法。因此，要积极开展药品上市后再评价工作，提高溶出度评价标准，完善药物的质量标准评价体系，促进制药企业改进制剂工艺，全面提高产品质量，保证临床用药的有效性与一致性。

溶出度是评价药物质量的一个内在指标，它已经成为评价固体制剂生物利用度的体外方法。光纤药物溶出度实时测定仪是一种新型的药物溶出度测定装置，实现了对药物溶出行为的监测。它的连续自动化检测和分析，与现有的溶出度测定仪相比，不需取样分析，不需过滤，降低了劳动强度，消除了人为因素对测定结果的影响，提高了分析检测的准确性和精密度并真正实现了原位实时的溶出监测，可反映药物的真实溶出过程［8］，是评价药物制剂的安全性和有效性、提高药品监管水平的有效手段。

［1］金丽，杭娟.利用实时溶出曲线对尼莫地平片的质量再评价［J］.中国药业，2011，20(15):31-32.

［2］苏芳，孔爱英，郭长君，等.不同厂家苯磺酸氨氯地平片溶出度的考察［J］.解放军医药杂志，2012，24(3):44-46.

［3］陈英.光纤药物溶出度实时监测仪评价法莫替丁片的体外溶出度［J］.华西药学杂志，2010，25(2):189-190.

［4］傅小英，金丽，伍小勇，等.不同厂家硝苯地平缓释片(Ⅱ)光纤原位实时溶出曲线的考察［J］.药物分析杂志，2010，30(3):513-517.

［5］李建光，姚军，艾尔肯·依不拉音，等.光纤浸入法过程监测利福平胶囊的体外溶出度［J］.新疆医科大学学报，2008，31(2):177-179.

［6］国家药典委员会.中华人民共和国药典［K］.二部.北京:中国医药科技出版社，2010:9.

［7］魏立平，徐闯，武向峰，等.光纤药物溶出度实时测定仪监测头孢氨苄片的溶出度［J］.药物分析杂志，2010，30(3):518-521.

［8］杨淑梅，陈艳芬.过程分析阿莫西林分散片的溶出度［J］.新疆医科大学学报，2010，33(6):631-633.