龙须藤的化学成分研究

徐 伟，李 煌，褚克丹，张玉琴，陈立典，沙 玫

福建中医药大学药学院，福建福州 350122;2福建中医药大学康复医学部，福建福州 350122

龙须藤 Bauhinia championi(Benth.)Benth为豆科羊蹄甲属多年生藤本植物，别名羊蹄藤、乌郎藤、过岗圆龙、九龙藤、五花血藤、梅花入骨丹、燕子尾、黑皮藤等，分布于浙江、江西、福建、广东、广西、湖南、湖北、贵州等省区［1］。龙须藤作为一种畲医病证论治中针对痹症治疗的特色药，其性平、苦涩，无毒，具有祛风除湿，活血止痛，健脾理气等功效［2］。根据《中国畲族医药学》记载以及前期对畲族地区用药调查统计，多位畲医的风湿疼痛经验方均记载有龙须藤的使用，在福建闽东地区，当地正大力发展龙须藤等当地特色经济作物。近年来，随着风湿、类风湿病发病率的不断上升，对龙须藤的深入研究逐渐受到重视。文献报道该植物含有黄酮类化合物［3，4］、挥发油［5］、多糖［6］等成分。为了进一步了解龙须藤的化学成分，我们对其进行了化学成分研究。本文报道从其乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部分分离得到7个化合物，其中化合物oblongixanthone A为首次从该种植物中分离发现。

1 仪器和材料

熔点用MDS-3型显微熔点测定仪，YANAGIMOTO MFG，CO;Agilent 1100 series液质联用质谱仪，美国Agilent公司;红外光谱用Bruker公司傅利叶红外光谱仪(VECTOR22);核磁共振波谱用Burker核磁共振仪(ACF200型)。柱层析硅胶和薄层用硅胶G购自青岛海洋化工厂，Sephadex LH-20购自Pharmacia公司，所用试剂均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司。

本样品于2011年4月采于福州永泰，经福建中医药大学药学院中药教研鉴定室卢伟教授鉴定为龙须藤Bauhinia championi(Benth.)Benth。药材样本存放于福建中医药大学药学院标本室。

2 提取和分离

取龙须藤藤茎7.8 kg，粉碎成粗粉后用80%乙醇回流提取3次，每次2 h，合并提取液，回收乙醇，得到乙醇提取物。提取物加水混悬后，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，回收溶剂后得到石油醚部分3 g，三氯甲烷部分30.8 g，乙酸乙酯部分236.5 g，正丁醇部分503 g。取乙酸乙酯部分(100 g)经粗硅胶(160～200目)以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱(体积比90∶1-50∶1)，等体积收集洗脱液，流分经TLC检识再合并，经反复的硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20、ODS分离和纯化，得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。

取正丁醇部分(100 g)用热水溶解，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脱(体积比 4∶1、3∶2、1∶4、2∶3)，等体积收集洗脱液，流分经 TLC检识再合并，经反复的硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20、ODS分离和纯化，得到化合物Ⅴ、Ⅶ。

3 结构鉴定

化合物1 白色针状结晶(丙酮)，mp 141～142℃，2%浓硫酸香草醛反应，105℃条件下加热显紫红色。IR 中显示在 3432、2936、2860、1461、1381、1054、959、800 cm-1处有吸收带，与 Sigma Biological Sample Library谱库中β-谷甾醇的匹配度达90%以上。在石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、二氯甲烷-丙酮三种不同展开条件下，其Rf值与谷甾醇一致，混合熔点不下降，故鉴定为β-谷甾醇。

化合物2 白色粉末，mp 288～289℃，2%浓硫酸香草醛反应，105℃条件下加热显紫红色。IR中显示在 3397、2959、2933、2869、1463、1379、1073、1024 cm-1处有吸收带，与 Aldrich Condensed Phase Sample Library谱库中胡萝卜苷的匹配度达90%以上。在硅胶薄层板上用二氯甲烷-丙酮、二氯甲烷-甲醇、二氯甲烷-甲醇-水等体系展开，均为单点，其Rf值与胡萝卜苷标准品一致，且混合熔点不下降，故鉴定为胡萝卜苷。

化合物3 白色片状结晶(石油醚-乙酸乙酯)，mp 65～66 ℃。IR 中显示在 2917、2848、1472、1061、719 cm-1有吸收带，与 Aldrich Condensed Phase Sample Library谱库中三十烷的匹配度达90%以上，且在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开，均为单点，其Rf值与三十烷标准品一致，故鉴定为正三十烷。

化合物4 白色片状固体(石油醚-乙酸乙酯)，mp 97～98 ℃。IR 中显示在 2917、2849、1742、1472、1363、1239、1179 cm-1处有吸收带，与 Aldrich Condensed Phase Sample Library谱库中六十烷的匹配度达90%以上，且在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开，均为单点，故鉴定为正六十烷。

化合物5 黄色针状结晶(氯仿-甲醇)，mp＞300℃。365 nm紫外下黄色荧光，盐酸-镁粉反应为阳性，故初步判断为黄酮类化合物。ESI-MS m/z:301.0［M-H］-;IR 中显示在 2918、2849、1664、1610、1521、1450、1381、1318、1261、1198、1167、1013 cm-1处有吸收带，与HR Aldrich Aldehydes and Ketones谱库中槲皮素的匹配度达90%以上。1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ:12.464(1H，s，5-OH)、10.760(H，s，7-OH)、9.319(1H，s，4'-OH)、9.288(1H，s，3'-OH)、7.674(1H，d，J=2.2 Hz，H-2')、7.553(1H，dd，J=2.2 Hz，H-6')、6.868(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')、6.402(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)、6.18(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)。13C NMR(DMSO-d6，300 MHz):175.766(C-4)，163.837(C-7)，160.655(C-5)，156.075(C-9)，147.637(C-2)，146.746(C-3')，144.991(C-4')，121.890(C-1')，119.898(C-6')，115.532(C-5'')，115.010(C-2')，102.938(C-10)，98.114(C-6)，93.275(C-8).1H NMR 和13C NMR数据与文献报道［7-9］的槲皮素数据一致。且在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开，均为单点，且Rf值与槲皮素对照品一致，混合熔点不下降。故鉴定为槲皮素。

化合物6 黄色粉末，mp 276～278℃。365 nm紫外光下显黄色荧光，盐酸-镁粉反应呈阳性，FeCl3反应呈阳性。1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ:12.476(1H，s，5-OH)、10.732(1H，s，7-OH)、9.291(2H，brs，3'，5'-OH)、8.765(1H，brs，4'-OH)、7.222(2H，s，H-2'，6')、6.351(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)、6.168(1H，d，J=2.2 Hz，H-6);1H NMR 数据与文献报道［7］的杨梅素数据一致。且在硅胶薄层板上用不同的溶剂体系展开，均为单点，且Rf值与杨梅素对照品一致，混合熔点不下降。故鉴定为杨梅素。

化合物7 黄色颗粒状晶体，mp:＞280℃。ESI-MS m/z:327.2［M-H］-;IR(KBr)cm-1:3409，1647，1611，1576，1458，1293，1257，1168，1119;1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)7.335(1H，s)，6.896(1H，d)，6.402(1H，d)，6.169(1H，d)，5.936(1H，d)，1.471(6H，s)。比较环 B和氧杂蒽醌(xanthone)的NMR数据和该化合物的HMBC谱可得出该化合物 与氧杂蒽醌(xanthone)相似。1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)中 δH6.169(1H，d，J=1.9 Hz)和6.402(1H，d，J=1.9 Hz)的信号提示有 1，2，3，5-四取代苯环，δH13.012(OH-1，s)的信号提示有螯合氢质子，芳香质子δH7.335(1H，s)，二甲基色烯环［δH6.896，5.936(1H，d，J=10.0 Hz)和1.471(6H，s)］;芳香质子(δH6.169 和6.402)彼此相关，1，2，3，5-四取代苯环 B 环上的 H-1 和 H-3;给出来信号δH7.335(1H，s)的芳香质子归属于环A。从HMBC 谱中，观察到 H-8与 δC147.3、145.3、143.4(C-6，C-7 和 C-10a)、C-9(δC178.9 s)的远程相关信号，H-11与 C-5，C-6，和 C-10a的远程相关信号，二甲基苯并吡喃连接于氧杂蒽醌的C-5和C-6上。综上分析，与文献报道［10］相一致，故鉴定该化合物为 1，3，7-三羟基 13，13-二甲基-2H-吡喃［5，6-B］呫吨酮，即oblongixanthone A，结构见图1。

图1 Oblongixanthone A的结构Fig.1 Structure of oblongixanthone A

1 《全国中草药汇编》编写组.《全国中草药汇编》(上册).人民卫生出版社，1996:264-265.

2 Jiangsu New Medical College(江苏新医学院).Dictionary of Chinese Traditional Drugs.Shanghai Scientific and Technical Publishers.Shanghai，China.1986.pp 43.

3 Bai HY(白海云)，Zhan QF(詹庆丰)，Xia ZH(夏增华)，et al.Studies on the chemical constituents of Bauhinia championii(benth.)Benth.(II).Nat Prod Res Dev(天然产物研究与开发)，2004，4:312-313.

4 Bai HY(白海云)，Zhan QF(詹庆丰)，Lao AN(劳爱娜)，et al.Studies on the chemical constituents of Bauhinia championii(benth.)Benth(I).Chin J Chin Mater Med(中国中药杂志)，2005，30(1):42-43.

5 Ye HZ(叶蕻芝)，Zheng CS(郑春松)，Lin W(林薇)，et al.Component Analysis of Volatile Oil From Bauhinia Championii(Benth.)Benth.by GC-MS.J Fujian College of TCM(福建中医学院学报)，2009，19:20-22.

6 Ye HZ(叶蕻芝)，Yang MP(杨名平)，Lin W(林薇)，et al.Determination of Polysaccharide in Bauhinia Championi(Benth.)Benth.J Fujian College of TCM(福建中医学院学报)，2009，19(4):22-24.

7 Zhang GY(张国英)，Zeng T(曾韬).Study on Chemical Constituents of Polygonum Hydropiper Linn.Chemistry＆ Industry of Forest Products(林产化学与工业)，2005，25(3):21-24.

8 中国科学院上海药物研究所植物化学研究室。黄酮体化合物鉴定手册.北京:科学出版社，1981，674.

9 Mao YW，Tseng HW，Liang WL，et al.Anti-Inflammatory and Free Radial Scavenging Activities of the Constituents Isolated from Machliuszuihoensis.Molecules，2011，16，9451-9466.

10 Huang SX，Chao F，Yan Z，et al.Bioassay-Guided Isolation of Xanthones and Polycyclic Prenylated Acylphloroglucinols from Garcinia oblongifolia.J Nat Prod，2009，72:130-135.