HPLC法测定蒙药顺气-13味丸桂皮醛含量

李双钢 周雪梅 赵 阳

（1.呼和浩特市中蒙医医院，内蒙古呼和浩特010030；2.内蒙古食品药品检验所，内蒙古呼和浩特010020；3.内蒙古医学院药学系,内蒙古呼和浩特 010026）

本品开郁顺气，化滞消胀。用于肠胃不适。由石榴、红花、荜茇、光明盐、紫硇砂、肉桂、草果、诃子等 13味药材组成，收载于卫生部药品标准蒙药分册136页，“标准”无含量测定。

1 仪器、试剂及样品

1100型高效液相色谱仪(安捷伦公司)。乙腈，色谱级，由美国 Tedai公司生产；甲醇、磷酸、乙醇为分析纯。桂皮醛由中国药品生物制品检定所提供。顺气-13味丸由内蒙古国家蒙药制剂中心生产。

2 方法与结果

2.1 耐用性试验及色谱条件：AgiLent XDB-C8柱 (150×4.6 mm,5μm)、非罗门 KromasiL C18柱 （200×4.6 mm,5μm）；流动相：乙腈 -1%磷酸（38：62）、甲醇 -水 -磷酸（300：200：6）：流速：1mL·min-1；测定波长 290nm；柱温30℃，4μL进样测定。以上条件均可基线分离样品中桂皮醛。试验采用KromasiL C18柱；流动相为乙腈-1%磷酸（38：62）。

2.2 测定溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备：精密称取桂皮醛对照品适量，用甲醇配制成浓度为0.08mg·mL-1,的溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备：取本品（粉碎，研细，过 100目筛）0.4g，精密称重，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静止，滤过，即的。

2.2.3 专属性试验：依照样品工艺方法制备不含肉桂的阴性制剂，依照供试品制备与色谱条件测定，阴性对照品在桂皮醛保留时间内无干扰峰出现。

2.3 线性关系考察：精密吸取对照品溶液1mL置10mL量瓶内，加甲醇至刻度为A溶液，精密量取A溶液1mL同法稀释为 B溶液。吸取 B溶液 2.5、5μL，A溶液 1、2、4、8μL按色谱条件测定峰面积（A），绘制标准曲线，作回归分析。回归方程：Y=5738+4369354x，r=0.9999。桂皮醛在0.02～0.64μg范围内成线性。

2.4 精密度试验：精密吸取同一供试品溶液 4μL，连续进样 5次，测定桂皮醛 A，平均 A为 626351±4823，RSD为0.77%。

2.5 稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于样品制备后 第 0、2、4、8、12h进 样 ， 测 定 桂 皮 醛 A，RSD为0.82%，桂皮醛A无明显改变。

2.6 重复性试验：取同批次样品，按供试品制备方法制备5份样品,依照色谱条件测定。结果分别为0.26，0.25，0.26，0.27，0.26mg·g-1， 平 均 0.26 mg·g-1，RSD为2.7%。

2.7 回收率试验：取已知桂皮醛含量的制剂，置10mL容量瓶内，分别精密加入桂皮醛对照品溶液，加甲醇至刻度，溶液转入置50mL具塞锥形瓶中，按供试品方法制备，按色谱条件测定，平均回收率102.56%，RSD为1.51%。

表1 顺气-13味丸桂皮醛回收率试验

2.8 样品测定：分别吸取对照品与供试品溶液4μL，依上述色谱条件测定 3批桂皮醛含量，060124、070612、080301桂皮醛含量分别为 0.26、0.35、0.31 mg·g-1，平均含量为 0.31mg·g-1（n=3）。

3 小 结

桂皮醛含量测定方法有多种报道，对文献报道的流动相考察表明，乙腈 -1%磷酸（38：62）和甲醇 -水 -磷酸（300：200：6）均可基线分离样品中桂皮醛，分离度大于 1.2，乙腈 -1%磷酸（38：62）分离效果更为理想。色谱柱适用性研究表明，AgiLun XDB-C8柱 (150×4.6 mm,5μm)、非罗门 KromasiL C18柱（200×4.6 mm,5μm）均可适用本试验测定，本文采用较为廉价的非罗门KromasiL C18柱（200×4.6 mm,5μm）。采用HPLC法测定顺气-13味丸指标性成分，该方法重现性好，操作简便、灵敏、准确、可靠。