粗柄鸡枞菌子实体中氨基酸成分测定

施渺筱，杨坤耀，李祝，何映霞

（1.贵州省安顺学院化学与生物农学系，贵州安顺 561000；2.贵州大学生命科学学院真菌资源研究所，贵州贵阳 550025）

粗柄鸡枞菌子实体中氨基酸成分测定

施渺筱1，杨坤耀2，李祝2，何映霞1

（1.贵州省安顺学院化学与生物农学系，贵州安顺 561000；2.贵州大学生命科学学院真菌资源研究所，贵州贵阳 550025）

摘 要：采用L-8800型氨基酸自动分析仪，色谱条件：标准分析柱4.6 mm×60.0 mm，反应柱温度：57℃，反应器温度：136℃，测定了野生粗柄鸡枞菌子实体菌柄及菌盖中氨基酸组成。结果表明：粗柄鸡枞菌子实体菌盖中含有16种氨基酸，而菌柄中只含有15种氨基酸，菌柄比菌盖缺少甲硫氨酸。粗柄鸡枞菌的菌盖氨基酸总量（29.361 2%）高于菌柄（21.1567%）。由此可见，粗柄鸡枞菌子实体，尤其菌盖氨基酸种类齐全，含量丰富，是一种天然绿色、营养健康的食品。

关键词：粗柄鸡枞菌；氨基酸；L-8800型氨基酸自动分析仪

野生食用菌多为药食兼用，其含有多种维生素和人体必需的矿质元素，还含有丰富平衡的氨基酸组分，能增强人体的免疫机能，是宝贵的医药资源[1-2]。鸡枞菌是著名的野生食用菌，其属于担子菌亚门（Basidiomycotina），层菌纲（Hymenomycetes），伞菌目（Agaricales），口蘑科（Tricholomataceae），鸡枞菌属（或称蚁巢伞属）（Termitomyces）[3]。鸡枞菌属是法国人海姆[4]（R.Heim）于1942年根据T.striatus的模式种建立的。粗柄鸡枞菌（Termitomyces robustusHeim）又名火把鸡枞菌，是鸡枞菌属中的一个种，其菌柄粗壮、膨大，约2 cm～8.5 cm。菌盖大型，深褐色，直径3 cm～20 cm，中央尖突不明显[5]。与白蚁共生，子实体仅能在白蚁巢上生长，因白蚁菌圃中含有丰富的营养成分，能为鸡枞菌的生长繁殖提供良好的营养保证[6-7]。

本实验利用氨基酸分析仪，对贵州省安顺市普定县鸡场乡所产的野生粗柄鸡枞菌菌柄和菌盖中的氨基酸进行测定分析。

1 材料

1.1 供试材料

粗柄鸡枞菌（Termitomyces robustusHeim）：采自安顺市普定县鸡场乡。将鸡枞菌子实体菌盖、菌柄分离后分别切半，置于鼓风干燥箱中55℃干燥，烘至恒重，粉碎，过40目筛，备用。

1.2 仪器

FZ102型植物粉碎机：天津市泰斯特仪器有限公司；DB—211BSC型电热鼓风恒温干燥箱：成都天宇实验设备有限责任公司；L-8800型氨基酸自动分析仪：日本HITICHI公司。

2 方法

2.1 样品前处理

准确称取干粉试样（精确到0.000 1 g），使试样蛋白质含量在10 mg～20 mg范围内；将试样放于水解管中。在水解管内加6 mol/L的盐酸10 mL～15 mL，加入新蒸馏的苯酚3滴～4滴，再将水解管放人冷冻剂中，冷冻5 min，接到真空泵的抽气管上。抽真空，然后充人高纯氮气。再抽真空充氮气，重复3次后，在充氮气状态下封口或拧紧螺丝盖将已封口的水解管放在（110±1）℃的恒温干燥箱内，水解22 h后，取出冷却。打开水解管，将水解液过滤后，用去离子水多次冲洗水解管，将水解液全部转移到50 mL容量瓶内用去离子水定容。吸取滤液1 mL于5 mL容量瓶内，用真空干燥器在40℃～50℃干燥，残留物用1 mL～2 mL水溶解，再干燥，反复进行两次，最后蒸干，用1 mL pH2.2的缓冲液溶解，供仪器测定用。

2.2 测定

准确吸取0.200mL混合氨基酸标准，用pH2.2的缓冲液稀释到5mL，此标准稀释液浓度为5.00nmol/50μL，作为上机测定用的氨基酸标准，自动进样20μL（测定流速：缓冲溶液为0.400mL/min，茚三酮溶液0.350mL/min），测得样品色谱图见图1～图4（图1、图3为通道1的样品图谱，图2、图4为通道2的样品图谱，只有脯氨酸一种）。

图1 粗柄鸡枞菌菌盖氨基酸图谱Fig.1 Amino acids in pileus of Termitomyces robustus Heim

2.3 结果计算

以峰面积测定结果，用外标法计算各氨基酸含量。

3 结果与讨论

本实验对粗柄鸡枞菌的菌盖、菌柄进行了氨基酸含量测定，结果见表1。

图2 粗柄鸡枞菌菌盖脯氨酸图谱Fig.2 Pro in pileus of Termitomyces robustus Heim

图3 粗柄鸡枞菌菌柄氨基酸图谱Fig.3 Amino acids in stipes of Termitomyces robustus Heim

图4 粗柄鸡枞菌菌柄脯氨酸图谱Fig.4 Pro in stipes of Termitomyces robustus Heim

由表1、图1、图2可知，粗柄鸡枞菌的菌盖中含有16种氨基酸。由表1、图3、图4可知菌柄中含有15种氨基酸（缺少甲硫氨酸）。其中含有苏氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸7种人体必需氨基酸（色氨酸未测）。粗柄鸡枞菌的菌盖氨基酸总量为29.36%，菌柄氨基酸总量为21.16%，菌盖的氨基酸总量高于菌柄，是菌柄的1.39倍。且每一种氨基酸在菌盖中的含量均高于菌柄中的含量。其中，菌盖中的异亮氨酸是菌柄的2.21倍，丙氨酸是菌柄的1.57倍，苯丙氨酸是菌柄的1.65倍，赖氨酸是菌柄的1.57倍，精氨酸和丝氨酸分别是菌柄的1.5倍。

4 结论

从以上数据中可得出，粗柄鸡枞菌的菌盖和菌柄的营养价值有所差别。由于粗柄鸡枞菌的菌盖比菌柄多含一种人体必需氨基酸，且每一种氨基酸在菌盖中的含量均高于菌柄中的含量，所以粗柄鸡枞菌菌盖的营养价值要高于菌柄。由此可见，粗柄鸡枞菌子实体，尤其菌盖氨基酸种类齐全，含量丰富，是一种天然绿色、营养健康的食品。

表1 粗柄鸡枞菌菌盖和菌柄中氨基酸组成Table 1 Content of amino acids from pileus and stipes of Termitomyces robustus Heim %

：

[1]罗思远,席武俊.楚雄州野生食用菌类资源的开发与利用[J].楚雄师范学院学报,2007,22(3):29-33

[2]刘颖.我国食用菌产业发展存在的问题及对策[D].中国农业大学,2005

[3]Kirk P M,Cannon P F,David J C,et al.Ainsworth&Bisby ’s dictionaryofthefungi[M].Wallingford,UK:CAB1Publishing,2001

[4]Heim R.Etudes descriptives et expérimentales sur lesagarics termitophiles d’Afrique tropicale[J].Mémoires del’Académie des Sciences de l’Institut de France,1941,64:25-29

[5]贺新生.中国鸡枞菌的种类与分布[J].食用菌,1995,14(6):3-4

[6]张贞华,董兆良.黒翅土白蚁及其菌圃的糖、脂肪、蛋白质、维生素、氨基酸分析[J].科技通报,1993,9(1):41-43

[7]张贞华,董兆良.黒翅土白蚁及其菌圃的9种必需金属元素组成分析[J].科技通报,1991,7(6):340-342

Determination of Amino Acids Content in Pileus and Stipes of Termitomyces robustus

SHI Miao-xiao1，YANG Kun-yao2，LI Zhu2，HE Ying-xia1
（1.Anshun Normal Universits，Department of Chemistry，Anshun 561000，Guizhou，China；2.Institute of Fungus Resource，College of Life Science，Guizhou University，Guiyang 550025，Guizhou，China）

Abstract：To determine the content of amino acids from pileus and stipes ofTermitomyces robustusby L-8800 amina acid mobile analyzer.Chromatographic condition：standard column was 4.6 mm×60.0 mm，temperature of reactive column and reactor part were respactively 57℃and 136℃.The results showed that 16 kinds amino acids were assayed in its pileus， but 15 kinds amino acids （no Met）were assayed in its stipes.The total content of amino acid in its pileus were higher（29.361 2%）than the stipes（21.156 7%），There are abundant amino acids in theTermitomyces robustus，it is a natural and nutritional food.

Key words：Termitomyces robustusHeim；amino acids；L-8800 amina acid mobile analyzer

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.14.024

贵州省教育厅自然科学研究项目[黔教科2009（0075）号]

施渺筱（1971—），女（汉），副教授，硕士，从事生物化学及微生物学研究。

2012-10-07