星毛冠盖藤不同药用部位的高效液相色谱分析

李咏梅 佘朋桂 肖冰梅

湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208

星毛冠盖藤 (Pileostegia tomentella Hand.Mazz)是土家族常用药[1]，全年可采。具有祛风除湿，散瘀止痛，接骨的功效，临床常应于腰腿酸痛、风湿麻木，外用治跌打损伤、骨折、外伤出血[2]。浙江、江西、湖南、湖北、四川、贵州、广东、台湾等地分布较广，资源蕴藏量丰富。但其在应用时随意性较强，根、茎、花和叶可分别入药[3]，亦可全株入药[2]，直接影响到疗效的可靠性与稳定性。应用HPLC法对星毛冠盖藤不同药用部位进行分析，以期了解其不同药用部位化学成分的差异性，从而为临床用药选择位及其化学成分研究提供可靠的实验依据。

1 仪器与材料

LC－10AT液相色谱 (日本岛津);C18色谱柱4.6mm×250mm，5μm(依利特)。甲醇、乙腈为色谱纯;水为纯净水，其余试剂为分析纯。芦丁购自上海源叶生物科技有限公司。星毛冠盖藤采自湖南怀化，经笔者鉴定为虎耳草科冠盖藤属星毛冠盖藤Pileostegia tomentella Hand.Mazz。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备 取过50目筛的各药用部位粉末10g，置于100ml的圆底烧瓶中。依次加入70%的乙醇100ml、50ml，在90℃恒温水浴分别回流1.5h、1h。过滤，合并虑液。精密移取滤液1ml，用70%乙醇定容于10ml容量瓶中。微孔滤膜过滤，滤液为样品溶液。精密称取芦丁，配制成浓度为0.1mg/ml对照品溶液。

2.2 黄酮类化合物鉴别 取过50目筛的药材全株粉末，按“2.1”项下方法提取后过滤。滤液与盐酸－镁粉反应颜色泡沫处呈紫红色，与醋酸铅反应生成浅黄色沉淀，与NaOH溶液反应呈黄色，加盐酸后颜色褪去。

2.3 色谱条件 分别以甲醇－水 (10:90)、甲醇－水(20:80)、甲醇 －水 (30:70)、甲醇 －水 (40:60)、甲醇 －水 (50:50)、乙腈 －水 (10:90)、乙腈 －水(20:80)为流动相。在流速为0.8ml/min，波长为254nm，进样量为10μl，柱温为室温条件下洗脱90min。乙腈－水系统得到的色谱图谱出峰数目少且保留时间短，不适合于星毛冠盖藤。甲醇－水系统以甲醇－水 (40:60)的分离效果较好，出峰数目较多。在保留时间33min后无峰再出现。

因此选择甲醇－水 (40:60)作为本实验的流动相，洗脱时间为40min。在此条件下根﹑茎﹑叶和枝的高效液相图谱见图1－5;芦丁与各部分峰的数目、保留时间、峰面积和峰面积百分比见表1－5所示。

表1 芦丁

表2 星毛冠盖藤根的色谱情况

表3 星毛冠盖藤茎的色谱情况

表4 星毛冠盖藤枝的色谱情况

表5 星毛冠盖藤叶的色谱情况

3 分析与讨论

在进行高效液相等度洗脱分析时，甲醇－水 (40:60)对药用各部位均具有较好的分离效果。在色谱条件下，根有四个峰，茎有十二个峰，枝有六个峰，叶有六个峰。茎和叶在29.541min与29.542min处各有一个峰保留时间接近，可视为同一类物质，但对峰面积及其百分比相比较，该物质在茎和叶的含量和所占比重有很大差异。枝和根在此保留时间附近内无峰出现，说明不含有此成分。从各部分峰的保留时间间隔分析，根、茎较枝、叶均匀，表明枝与叶所含化合物的物理或化学性质差异性较大，可能和根、茎与枝、叶之间新陈代谢的差异性有关系。各药用部位在6.500－6.550min、7.217－7.285min两区间均有且只有一个峰出现。反映了各药用部位化学成分的个性与共性关系，亦为在临床使用时是否区分药用部位研究提供了可靠的实验基础。

黄酮类化合物是中药中常见的一类有效成分，具有多种生物活性[4]。如葛根总酮、葛根素和银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管的作用，临床用于治疗冠心病。芦丁、橙皮苷等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用，可用做毛细血管出血的止血药和治疗高血压的辅助药。实验证实，星毛冠盖藤中含有黄酮类化合物，茎与枝含有芦丁，为后续的开发利用及活性成分的深入研究提供科学的参考依据。

[1]中国药材公司.中国中药资源[M].北京:科学出版社.1995:46.

[2]赵运林，喻勋林，傅晓华.湖南药用植物资源[M].长沙:湖南科学技术出版社，2009:446－447.

[3]浙江药用植物志编写组.浙江药用植物斟[M].上册.杭州:浙江科学技术出版社，1980:460.

[4]匡海学.中药化学[M].北京:中国中医药出版社，2006.