詹克勤 ,彭卫华 ,詹长欣 ,洪智海 ,吴钦生
(1、婺源县人民医院检验科,江西 婺源333200;2、南昌大学第一附属医院检验科,江西 南昌330006)
心脏型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid-binding protein,H-FABP)是心肌细胞胞浆中含量最丰富的蛋白质之一[1]。当心肌细胞因缺血缺氧发生不可逆损害时,细胞膜破裂,胞浆中的H-FABP进人细胞间质,从而使H-FABP在心肌细胞中的含量减少呈脱失状态[2]。近年来,H-FABP作为一种新的心脏手术后观察的标志蛋白,日益受到重视和关注。本文对53例行心脏手术患者进行了H-FABP的观察,并对其结果分析报告如下。
1.1 研究对象 选取2011年10月至2012年12月在南昌大学第一附属医院胸外科住院行心脏手术的53例患者,其中男性25例,女性28例,年龄为17~48岁,平均年龄为38.7岁。对照组为在南昌大学第一附属医院体检科40名健康体检者,其中男性18例,女性26例,年龄为22~53岁,平均年龄为35.6岁。
1.2 方法
1.2.1 标本采集与保存 在患者主动脉阻断前、主动脉阻断开放后30min、主动脉阻断开放后3h、主动脉阻断开放后12h、主动脉阻断开放后24h分别取静脉血2~3ml,对照组为健康体检者,采集空腹血,常规分离血清标本,于-20℃保存。集中检测H-FABP。
1.2.2 试剂与测定方法 H-FABP采用美国MARKET INC公司生产的酶联免疫吸咐试验试剂。严格按我室SOP标准操作程序进行检测:将5μl样本血清加入500μl样本稀释液中,将10μl标准系列H-FABP和10μl已稀释的样品分别加入反应孔,每孔再加入100μl酶标物,混匀10s,置室温反应45min,用缓冲液洗涤5次,拍板后每孔加100μl TMB显色液,室温20min后加终止液,在450nm波长下比色。根据同标准H-FABP比较进行计算得标本中H-FABP含量。
1.2.3 手术 麻醉后,对患者施行开胸手术,关闭主动脉并建立体外循环,在心肌暂时缺血缺氧的情况下施行心内直视手术,手术后开放主动脉恢复心脏血供,并闭胸腔。
1.3 统计方法 数据以(x±s)表示,各组与对照组之间的比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。均应用SPSS 11.5软件进行数据分析。
53例心脏手术患者手术过程中不同时刻外周血及40例健康对照组检测血清H-FABP结果详见表1。
表1 手术过程中不同时刻外周血H-FABP浓度的改变(x±s,ng/ml)
体外循环心内直视手术时,是在心肌暂时性缺血缺氧的情况下施行,心肌的切割和术后心肌的缝合会对心肌有一定的损伤,手术后开放主动脉恢复心脏血供,由于缺血后恢复氧合血灌注,心肌损害会较缺血时更为明显和严重,称为缺血再灌注损伤[3]。
H-FABP是存在于心肌细胞浆内的小分子可溶性蛋白质,相对分子质量为(14KD~15KD),其作用是在细胞内摄取游离脂肪酸,将其转运至线粒体,从而进入能量代谢体系并最终生成三磷酸腺苷,后者是心肌收缩的主要能量来源[4]。在临床上,心肌损伤的标记物先后应用了CK-MB、肌红蛋白、心肌肌钙蛋白 T(cardiac troponinT,cTnT)、cTnI等。其中,H-FABP具有很高的组织特异性,非常符合心肌损伤的理想标记物所具有的特征。由于心肌细胞对缺血、缺氧的高度敏感性,因此,在缺血缺氧状态下,心肌细胞损伤,动员脂肪酸进行氧化供能,使心肌细胞内的H-FABP相应地迅速上升,而且由于H-FABP的相对分子质量小,可快速释放入血,因而是检测心脏手术时心肌损伤的理想标记物,目前已鉴定出有9种不同类型的FABP,主要分布在哺乳动物脂肪酸代谢活跃的组织如心肌、肝脏、小肠、脂肪细胞等[5,6],但不同类型的FABP具有不同的免疫学特征。H-FABP在脂肪酸代谢旺盛的心肌中含量高达骨骼肌的3~10倍,从而依据血中的H-FABP与肌红蛋白(Mb)之比可以区别心肌损伤和骨骼肌损伤[7]。心脏手术主动脉阻断开放后,血清中H-FABP逐渐升高。结果显示主动脉阻断放开后3h开始H-FABP增高,与文献报道基本一致[8]。
综上所述,血清H-FABP可作为心脏手术后心肌损伤的理想标记物之一,也可对心肌细胞缺血、缺氧后造成的心肌损伤控制具有非常重要的价值。
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